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DOI: 10.3791/67368-v
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Le protocole décrit une étude des effets systémiques et locaux sur la peau de l’exposition aux ultraviolets B chez la souris.
Nous étudions les effets systémiques de l’exposition de la peau à de faibles doses de rayons UVB, en particulier à des niveaux inférieurs à ceux qui causent un érythème. Notre protocole permettra de comprendre les effets systémiques de l’exposition aux UVB à faible dose au-delà des effets directs ou locaux sur la peau. Notre méthode imite étroitement l’exposition chronique de faible intensité aux UVB inférieurs aux niveaux d’érythème. Ainsi, nous sommes en mesure d’étudier les effets endogènes des UVB.
[Narrateur] Pour commencer, placez la souris anesthésiée sur une plate-forme de travail et rasez 50 à 60 % de sa région dorsale. Après avoir retiré la fourrure à l’aide d’une crème dépilatoire, placez la souris dans une cage de récupération propre et sèche avec une litière de cage. Laissez la souris se reposer dans la cage de la maison avec de la nourriture et de l’eau à volonté. Pour commencer, portez une chemise à manches longues, un pantalon, une blouse de laboratoire, des chaussures fermées, des gants doubles et un écran facial pour assurer votre sécurité personnelle. Effectuez l’irradiation ultraviolette B à l’intérieur d’un capot biologique avec le couvercle en plexiglas de 10 millimètres abaissé et un écran de protection en place. Placez la lampe ultraviolette B sur la chambre en plexiglas transparent. Allumez la lampe ultraviolette B et laissez-la fonctionner jusqu’à ce que l’intensité se stabilise. Allumez ensuite le radiomètre Ultraviolet X, équipé d’une tête de mesure Ultraviolet B pour surveiller l’intensité. Placez la chambre d’exposition nettoyée à l’intérieur de la chambre en plexiglas transparent à deux chambres pendant que la lampe ultraviolette est allumée ou éteinte pour les expositions ultraviolettes ou simulées respectives. À l’aide d’une calculatrice, déterminez le temps nécessaire pour exposer la souris à l’intensité souhaitée des ultraviolets B. Transférez la souris de la cage domestique à la chambre d’exposition pendant le temps d’exposition souhaité. Exposez la souris à une dose d’ultraviolets B de 50 millijoules par centimètre carré, qui est une dose sous-érythématique. Pour valider l’efficacité du rayonnement, mesurez la pigmentation de l’oreille et de la queue à l’aide d’un spectrophotomètre dermique. Étalonnez le spectrophotomètre en définissant la ligne de base avec du papier blanc ordinaire. Une fois l’étalonnage terminé, placez le capteur de mesure sur l’oreille ou la queue de la souris et enregistrez les lectures d’intensité de mélanine. Des augmentations progressives et significatives des niveaux de mélanine ont été observées chez les souris mâles et femelles exposées au rayonnement ultraviolet B pendant quatre semaines par rapport aux témoins, confirmant l’induction réussie de la pigmentation de la peau.
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