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DOI: 10.3791/67389-v
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Ici, nous fournissons un protocole détaillé pour effectuer une imagerie en direct de la division asymétrique des cellules souches germinales (GSC) dans la niche ovarienne de la drosophile. Nous utilisons une lignée transgénique qui exprime de manière ubiquitaire une fusion de la protéine fluorescente verte (GFP) de la protéine du spectrosome Par-1.
Nous nous intéressons à la découverte de nouveaux mécanismes cellulaires et moléculaires contrôlant la souche des cellules. Notre objectif principal est de déchiffrer comment les cellules souches évitent la différenciation dans les niches. Puisque nous travaillons dans des conditions expérimentales, il est essentiel de préserver l’intégrité des tissus pour s’assurer que les GSCs reçoivent un comportement physiologique.
Notre protocole maintient une niche de GSC saine et fonctionnelle permettant le suivi des GSC en division telles qu’elles le seraient in vivo. L’utilisation de l’imagerie à durée de vie prolongée nous permet d’étudier l’ensemble du cycle cellulaire des CSG et la dynamique des spectrosomes. Plus précisément, nous réussissons à caractériser les changements de spectrosome tout au long du cycle cellulaire, une tâche qui était auparavant difficile à réaliser avec des images fixes ou des périodes d’imagerie plus courtes.
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