Name: Utilisation d’une pince à épiler optique pour la génération de sphéroïdes hybrides (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-05-30T12:30:00.000+00:00
Duration: 12 min 11 s
Description: Découvrez la construction de sphéroïdes hybrides de lymphome à l'aide de pinces optiques pour étudier les interactions cellule-cellule. Cette méthode offre un contrôle précis de la formation et de l'adhésion des cellules.

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<table><tbody><tr><td>&micro ;-Plat 35 mm, fond haut en verre</td><td>IBIDI</td><td>81158</td><td></td></tr><tr><td>12-256 mico-moule 3D PetriDish&nbsp ;</td><td>Microtissues Inc., RI, États-Unis</td><td>12-256TR</td><td></td></tr><tr><td>3 & micro ; microsphères de polystyrène Polysciences</td><td></td><td>17134-15</td><td></td></tr><tr><td>anticorps anti-CD20 (clone L26)</td><td>Dako</td><td>IS604</td><td></td></tr><tr><td>Compteur de cellules automatisé, EVE</td><td>NanoEntek</td><td>EVE/ EVE-MC</td><td></td></tr><tr><td>Autostainer Link 48</td><td>Dako</td><td>D09634</td><td></td></tr><tr><td>Caméra&nbsp ;</td><td>Incubateur</td> de CO2 <td>Olympus U-TV0.63XC</td><td></td></tr><tr><td>CelCulture</td><td>Esco Technologies, Inc.</td><td>Lames</td> de comptage de cellules CCL<td></td></tr><tr><td>, EVE</td><td>NanoEntek</td><td>NE-EVS</td><td></td></tr><tr><td>Lignée cellulaire HS-5</td><td>ATCC</td><td>CRL-3611</td><td></td></tr><tr><td>Lignée cellulaire Ri-1&nbsp ;</td><td>DSMZ&nbsp ;</td><td>ACC 585</td><td></td></tr> Sérum <tr><td>fœtal bovin</td><td>Gibco</td><td>A5256701</td><td></td></tr><tr><td>Microscope à fluorescence</td><td>Olympus</td><td>BX43</td><td></td></tr><tr><td>ImageJ program</td><td>National Institutes of Health, MD, USA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Microscope inversé</td><td>Olympus</td><td>IX73</td><td></td></tr><tr><td>Kit de réactifs sous tension/mort&nbsp ;</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>L3224</td><td></td></tr><tr><td>Pénicilline-Streptomycine (10 000 U/mL)</td><td>Gibco</td><td>15140122</td><td></td></tr><tr><td>Solution saline tamponnée au phosphate, pH 7,4</td><td>Gibco</td><td>10010023</td><td></td></tr><tr><td>RPMI 1640 Moyenne</td><td>Gibco</td><td>11875093</td><td></td></tr><tr><td>Solution de chlorure de sodium</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>7647-14-5</td><td></td></tr><tr><td>Solution de chlorure de sodium 0,9 %, stérile</td><td>ITW ReITW Reagents, S.R.L.agents, S.R.L.</td><td>A1671</td><td></td></tr><tr><td>Trypan Blue Solution, 0,4 %</td> <td>Gibco</td><td>15250061</td><td></td></tr><tr><td>TrypLE Express Enzyme (1X), sans rouge de phénol</td><td>Gibco</td><td>12604013</td><td></td></tr><tr><td>Trypsine-EDTA (0,05 %), rouge de phénol</td><td>Gibco</td><td>25300096</td><td></td></tr><tr><td>UltraPure Agarose</td><td>Invitrogen</td><td>16500500</td><td></td></tr><tr><td> Pince à épiler optique</forte></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Miroirs dichroïques</td><td>Thorlabs</td><td>DMSP805R</td><td></td></tr><tr><td>Appareil photo numérique</td><td>Mikrotron GmbH</td><td>MC1362</td><td></td></tr><tr><td>Système de balayage Galvano-mirror XY</td><td>Thorlabs</td><td>GVS002</td><td></td></tr><tr><td>Microscope inversé&nbsp ;</td><td>Olympus</td><td>IX71</td><td></td></tr><tr><td>Objectif 1</td><td>Thorlabs</td><td>AC254-050-B-ML</td><td></td></tr><tr><td>Objectif 2</td><td>Thorlabs</td><td>AC508-200-B-ML</td><td></td></tr><tr><td>Nd :YAG 1064 nm</td><td>laser Laser Quantum</td><td>Ventus</td><td></td></tr></tbody></table>

utilisation d’une pince à épiler optique pour la génération de sphéroïdes hybrides

Using Optical Tweezers for the Generation of Hybrid Spheroids

Nos résultats précédents ont montré que les cellules stromales mésenchymateuses cultivées avec des cellules de lymphome constituent le noyau stromal homogène auquel les cellules cancéreuses se fixent uniformément18. Dans cette étude, nous avons réussi à concevoir le sphéroïde hybride humain composé de cellules stromales mésenchymateuses et de cellules de lymphome à l’aide d’une pince optique sur mesure. La figure 2B montre un sphéroïde représentatif dans un microscope...

Utilisation d’une pince à épiler optique pour la génération de sphéroïdes hybrides

Two-dimensional (2D) cell culture is still among the most commonly used models in preclinical cancer research. However, the three-dimensional (3D) in ...

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Les sphéroïdes sont un type de modèle de culture cellulaire 3D utilisé pour représenter plus précisément l’environnement d’une cellule par rapport aux modèles monocouches de culture cellulaire 2D. Dans l’exemple de protocole, nous verrons les scientifiques générer des sphéroïdes à partir d’une lignée cellulaire de cancer colorectal et appliquer l’imagerie de cellules vivantes pour suivre la croissance des sphéroïdes.

Génération de sphéroïdes à partir de lignées cellulaires : une méthode de culture cellulaire tridimensionnelle (3D)

Source : Huang, Y. et al., Surveillance morphologique et physiologique longitudinale des sphéroïdes tumoraux tridimensionnels à l’aide de la tomographie par cohérence optique. J. Vis. Exp. (2019)Cette vidéo démontre l’utilisation de la tomographie par cohérence optique (OCT) pour surveiller les sphéroïdes tumoraux dans une plaque multi-puits en capturant des images en coupe transversale haute résolution. En analysant les réflexions lumineuses des structures cellulaires, l’OCT construit des...

Suivi morphologique et physiologique des sphéroïdes tumoraux par tomographie par cohérence optique 

Ici, nous décrivons un protocole rapide et flexible pour la formation de sphéroïdes cellulaires 3D par agrégation cellulaire. Il s’adapte facilement à plusieurs types de cellules et peut être utilisé dans une variété d’applications, notamment la migration cellulaire, l’invasion ou les tests d’anoïkis, ainsi que pour l’imagerie et la quantification des interactions cellule-matrice.

Une méthode d&#39;agrégation cellulaire efficace et flexible pour 3D Spheroid production

Tomographie par cohérence optique (OCT), une technologie d’imagerie en trois dimensions, a été utilisé pour surveiller et caractériser la cinétique de croissance des sphéroïdes multicellulaires de tumeur. Une quantification volumétrique précise des sphéroïdes de tumeur à l’aide d’un voxel comptage approche et la détection de tissu mort exempte d’étiquette dans les sphéroïdes basé sur contraste intrinsèque d’atténuation optique, ont été démontrées.

Longitudinale morphologiques et physiologiques surveillance des sphéroïdes de tumeur en trois dimensions à l’aide de la tomographie à cohérence optique

Nous présentons un dispositif microfluidique centrifuge à moteur qui peut cultiver des sphéroïdes cellulaires. À l'aide de cet appareil, les sphéroïdes de types de cellules simples ou multiples pourraient être facilement cocultivés dans des conditions de haute gravité.

Plateforme Lab-on-a-CD pour générer des sphéroïdes multicellulaires tridimensionnels

Le protocole décrit la génération de sphéroïdes à haut débit pour la bio-impression à l’aide de l’analyse multiparamétrique de leur oxygénation et de leur mort cellulaire sur un microscope à fluorescence standard. Cette approche peut être appliquée pour contrôler la viabilité des sphéroïdes et effectuer une normalisation, ce qui est important dans la modélisation des tissus 3D, le microenvironnement tumoral et la biofabrication réussie des (micro)tissus.

Biofabrication assistée par microscopie à oxygène abordable de sphéroïdes multicellulaires

Ce protocole détaille une méthode pour la production de trois types différents de sphéroïdes d’une manière qui les rend adaptés au criblage et à l’analyse à grande échelle à haute teneur. En outre, des exemples sont présentés montrant comment ils peuvent être analysés au niveau des sphéroïdes et des cellules individuelles.

Une méthode robuste pour la production à grande échelle de sphéroïdes pour les applications de criblage et d’analyse à haute teneur

Le protocole actuel décrit une technique permettant de produire des sphéroïdes tissulaires à grande échelle de manière rentable à l’aide d’un dispositif imprimé en 3D semblable à un tampon.

Génération de sphéroïdes tissulaires à l’aide d’un dispositif imprimé en 3D semblable à un tampon

Les sphéroïdes tumoraux sont de plus en plus utilisés pour évaluer les interactions cellule tumorale-microenvironnement et la réponse thérapeutique. Le présent protocole décrit une méthode robuste mais simple pour l’imagerie à semi-haut débit des sphéroïdes tumoraux 3D en utilisant un nettoyage optique rapide.

Nettoyage optique rapide pour l’analyse à semi-haut débit des sphéroïdes tumoraux

Cette étude présente une méthodologie rentable et efficace pour générer des structures cellulaires 3D à l’aide d’un système basé sur des tampons pour créer des micropuits dans des moules d’agarose. Le système favorise la formation de sphéroïdes/organoïdes uniformes, améliorant ainsi les interactions cellulaires. Cette approche réduit la variabilité expérimentale et soutient les applications dans les tests de médicaments et l’ingénierie tissulaire.

Génération de sphéroïdes/organoïdes tridimensionnels à partir de cultures cellulaires bidimensionnelles à l’aide d’un nouveau dispositif de tamponnage

Découvrez la construction de sphéroïdes hybrides de lymphome à l'aide de pinces optiques pour étudier les interactions cellule-cellule. Cette méthode offre un contrôle précis de la formation et de l'adhésion des cellules.

Utilisation d’une pince à épiler optique pour la génération de sphéroïdes hybrides

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