18 avril 2025
Ici, nous présentons un protocole pour établir un modèle murin de cardiomyopathie diabétique et un dispositif de fixation d’électroacupuncture chez la souris pour l’utilisation de l’électroacupuncture chez la souris, qui peut fixer les souris plus doucement pendant le traitement.
Le champ de nos recherches est l’électroacupuncture pour le traitement de la cardiomyopathie diabétique. Nous présentons un appareil de fixation par électroacupuncture de niveau pour souris. Notre dispositif de fixation d’électroacupuncture chez la souris est plus facile à fixer chez la souris, plus sûr et ne se croise pas secrètement avec les souris pendant le traitement d’électroacupuncture par rapport à d’autres technologies. Notre laboratoire continuera de se concentrer sur l’électroacupuncture pour le traitement des maladies métaboliques telles que l’obésité, le diabète, la cardiomyopathie diabétique, etc.
[Narrateur] Pour commencer, vérifiez l’intégrité du tube en plastique creux dans un dispositif de fixation par électropuncture assemblé. Installez les languettes de fermeture. Déplacez les languettes de fermeture le long du corps du tube pendant que les vis glissent dans les rainures, en veillant à ce que la longueur de fixation puisse être ajustée en fonction de la taille de la souris. Allumez maintenant l’instrument de thérapie d’électroacupuncture et assurez-vous qu’il est opérationnel. Appuyez une fois sur chaque bouton pour vérifier son fonctionnement. Placez l’instrument de thérapie d’électroacupuncture à côté des tubes en plastique creux pour effectuer des traitements d’électroacupuncture sur des souris. Saisissez ensuite une souris par la queue avec la main droite et retirez-la de la cage. Placez la souris sur la surface de la cage et tirez doucement sa queue vers l’extérieur. Immobilisez la souris avec la main gauche et retournez-la pour exposer l’abdomen. Injectez la souris par voie intrapéritonéale en utilisant la main droite avec une seringue d’un millilitre préchargée avec la quantité appropriée de solution de streptozotocine à 1 %. Pour pratiquer l’acupuncture, sélectionnez d’abord les points d’acupuncture selon la théorie des points d’acupuncture de Biao Ben, y compris le PC6 bilatéral et le ST36. Maintenant, saisissez la souris, pincez sa queue et placez-la sur la surface de la cage. Positionnez la bouche du tube en plastique creux en acrylique à un angle de 30 degrés par rapport au plan horizontal, en vous assurant que le petit trou au centre fait face au sol et que la bouche du tube s’aligne avec la tête de la souris. Faites pivoter lentement la tête de la souris dans le tube en utilisant un mouvement volontaire et une légère poussée. Tapotez doucement les fesses de la souris pour l’encourager à entrer complètement dans le tube. Ajustez les languettes de fermeture, puis soulevez la queue de la souris hors de la rainure. Serrez l’écrou et utilisez les languettes de fermeture aux extrémités supérieure et inférieure pour limiter le mouvement de la souris. À l’aide d’une pince à épiler, tirez doucement les quatre membres de la souris à travers les petits trous de chaque côté du tube. Une fois les membres exposés, fixez-les doucement à l’extérieur du corps du tube. Localisez les points d’acupuncture PC6 et ST36 en touchant les membres de la souris avec le majeur de la main droite. Ensuite, piquez doucement la peau de la souris avec la pointe de l’aiguille stérile. Insérez rapidement l’aiguille obliquement à une profondeur d’environ trois millimètres. Retirez ensuite la main droite. Allumez maintenant l’appareil de thérapie par électroacupuncture et ajustez-le sur une onde intermittente d’un hertz. Fixez le clip sous tension de l’appareil d’électroacupuncture à la poignée de l’aiguille, en veillant à ce qu’il y ait un clip par aiguille. Ajustez ensuite le courant, avec le clip attaché à un milliampère. Après 15 minutes, observez l’état des souris pendant le prétraitement d’électroacupuncture. Le tissu myocardique du groupe témoin présentait une structure intacte avec des cardiomyocytes régulièrement disposés, et aucune lésion apparente n’a été observée. Dans le groupe modèle, les cellules myocardiques étaient disposées de manière irrégulière, certaines cellules présentant des dommages et une désintégration ainsi qu’une infiltration significative de cellules inflammatoires dans l’espace interstitiel. Dans le groupe prétraité, la structure du tissu myocardique était claire, avec un petit nombre de cellules endommagées et désintégrées, mais pas d’autres lésions significatives. Les indices de fonction cardiaque de l’échocardiographie ont montré que le diamètre diastolique de l’extrémité ventriculaire gauche et le diamètre systolique de l’extrémité ventriculaire gauche étaient significativement augmentés dans le groupe modèle, tandis que la fraction d’éjection ventriculaire gauche et le raccourcissement fractionnel ventriculaire gauche étaient significativement réduits. Dans le groupe de prétraitement, le diamètre diastolique de l’extrémité ventriculaire gauche et le diamètre systolique de l’extrémité ventriculaire gauche ont été significativement réduits, tandis que la fraction d’éjection ventriculaire gauche et le raccourcissement fractionnel du ventricule gauche ont été significativement augmentés par rapport au groupe modèle. La glycémie était significativement élevée dans le groupe modèle par rapport au groupe témoin au jour 36. Après le traitement par électroacupuncture, la glycémie dans le groupe prétraitement a été considérablement réduite au jour 49 par rapport au groupe modèle.
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Cette étude présente un protocole permettant de mettre en place un modèle murin de cardiomyopathie diabétique et introduit un nouveau dispositif de fixation pour l'électroacupuncture conçu spécifiquement pour les souris. Ce dispositif améliore la sécurité et la facilité d'utilisation lors des traitements par électroacupuncture.
Une fixation fiable et une surveillance quantitative sont essentielles pour l'évaluation préclinique des interventions d'électroacupuncture dans les modèles de maladies métaboliques. Le dispositif de fixation pour souris décrit ici permet une préparation standardisée et reproductible à l'électroacupuncture dans les modèles de cardiomyopathie diabétique, facilitant ainsi une évaluation rigoureuse des paramètres cardiaques et métaboliques. Cette capacité renforce la fiabilité prédictive des tests d'hypothèses thérapeutiques en phase précoce et oriente la recherche translationnelle sur les interventions non pharmacologiques.
Cet appareil de fixation et ce protocole s'intègrent dans la continuité de la découverte précoce et du développement préclinique pour la recherche sur les maladies métaboliques et cardiovasculaires.