Mise en place de modèles de rats imitant les thérapies hormonales d’affirmation de genre

Notre recherche a développé des modèles animaux pour reproduire des thérapies hormonales d’affirmation de genre pour les personnes transgenres, en utilisant de la testostérone pour les hommes transgenres et de l’œstrogène avec des anti-androgènes pour les femmes transgenres. Nous examinons si les personnes qui suivent ces thérapies sont aussi vulnérables aux produits chimiques environnementaux que la population générale et s’il y a des effets secondaires à long terme du traitement hormonal. Ce modèle est unique dans son domaine, car des données et des outils sont actuellement disponibles pour évaluer la susceptibilité potentiellement différente aux produits chimiques des personnes transgenres subissant une hormonothérapie et leurs effets secondaires.

Une découverte importante de nos travaux est l’utilisation de la SCP hépatique spécifique au sexe comme marqueur pour évaluer le succès des thérapies hormonales. Cette approche, développée pour la première fois dans notre étude, constitue un outil précieux pour confirmer l’exactitude et l’efficacité du modèle.

Notre protocole comble le manque de compréhension des effets à long terme des hormonothérapies. Il cherche également à savoir si l’exposition quotidienne aux produits chimiques alimentaires et environnementaux peut interagir avec les traitements hormonaux ou en modifier les effets au fil du temps.

À l’avenir, nous explorerons si le modèle est adapté à des tests à long terme, et nous étudierons d’autres biomarqueurs tels que des tests comportementaux étroits pour mieux évaluer les effets de la thérapie.

[Instructeur] Commencez par pincer et soulever la peau au site d’injection pour administrer de la testostérone et de l’œstradiol ainsi que de l’acétate de cyprotérone dissous dans de l’huile de sésame. Insérez l’aiguille d’une seringue d’un millilitre parallèlement au dos de l’animal. Une fois l’aiguille à l’intérieur, injectez lentement 100 microlitres de testostérone ou 200 microlitres d’œstradiol plus acétate de cyprotérone, selon le modèle. Après deux semaines de traitement, placez chaque rat anesthésié en position couchée sur un coussin chauffant. Ensuite, préparez une seringue de cinq millilitres avec une aiguille de calibre 21, en vous assurant que le vide est retiré. Utilisez les doigts pour localiser le cœur. Nettoyez délicatement la paroi thoracique et insérez soigneusement l’aiguille dans la paroi thoracique latérale, perpendiculairement au corps, au point aligné avec les coudes fléchis, entre les côtes cinq et six. Une fois que l’aiguille atteint le ventricule cardiaque, le sang pénètre dans la seringue par capillarité. Rétractez le piston de la seringue lentement et continuellement jusqu’à ce que le sang soit prélevé. Après le sacrifice, placez chaque animal sur la table de dissection en position couchée, les pattes avant vers le haut et les pattes arrière vers le bas. Fixez les membres avec des épingles, puis saupoudrez la surface ventrale de l’animal avec une solution désinfectante pour préparer la dissection. À l’aide de ciseaux, coupez le long de la ligne médiane du pubis vers le haut de l’abdomen. Faites deux coupes latérales le long des surfaces médiales de chaque membre postérieur à partir de l’incision abdominale ventrale médiane et exposez les viscères abdominaux. Chez les rats mâles, exciser les testicules situés dans le sac scrotal intra-abdominal. Appuyez sur le sac scrotal pour vous assurer que les testicules dépassent et saisissez-les doucement. Utilisez des pinces pour retenir la graisse viscérale, puis coupez soigneusement les testicules loin des viscères. Pesez les testicules avant de les stocker dans la solution Bois pour une analyse histopathologique. Chez les rats femelles, saisissez délicatement l’utérus. Identifiez les ovaires aux extrémités des deux cornes utérines et coupez-les du tissu adipeux viscéral environnant. Pesez les ovaires après l’excision. Ensuite, saisissez le foie avec une pince, en vous assurant qu’il ne se casse pas. Utilisez une pince pour saisir le processus xiphoïde et coupez complètement le diaphragme avec des ciseaux. Utilisez des ciseaux pour séparer le foie du diaphragme. Soulevez le processus xiphoïde avec des pinces et extrayez le foie de la cavité abdominale. Après l’excision, pesez le foie et conservez-le de manière appropriée. À l’aide de ciseaux, coupez perpendiculairement le long du cou de l’animal. Enlevez la peau et la musculature pour exposer la trachée, où se trouve la glande thyroïde. Coupez doucement les extrémités de la trachée pour enlever la glande thyroïde. Après avoir retiré le testicule, saisissez l’épididyme, qui est attaché au bord postérieur du testicule et est contenu dans le scrotum. Pour recueillir le sperme, nettoyez la queue de l’épididyme droit en enlevant la graisse et le tissu conjonctif à l’aide de ciseaux. Séparez la queue de la partie restante et placez-la dans une boîte de Pétri contenant un millilitre de DMEM. Coupez la queue avec des ciseaux et utilisez une pipette pour faire couler doucement le contenu et faciliter la libération. Maintenant, transférez le liquide collecté dans un tube de 15 millilitres et ajustez le volume à 10 millilitres avec du DMEM pour obtenir un facteur de dilution de un à 10. Pipeter le contenu pour homogénéiser et créer une suspension. Après avoir secoué doucement, prélever 10 microlitres de suspension pour charger la chambre Neubauer.