Name: Visualisation peropératoire de l’injection sous-rétinienne et du décollement de la rétine chez le rat (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-03-07T13:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 16 s
Description: Découvrez une technique de chirurgie oculaire pour l'injection sous-rétinienne chez le rat avec visualisation peropératoire. Cette méthode améliore la reproductibilité et la sécurité des études sur le décollement de la rétine.

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<ol><li>Guymer, R. H., Campbell, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Age-related macular degeneration.</a> Lancet. 401 (10386), 1459-1472 (2023).</li>
<li>Hartong, D. T., Berson, E. L., Dryja, T. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinitis+pigmentosa%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Retinitis pigmentosa.</a> Lancet. 368 (9549), 1795-1809 (2006).</li>
<li>Cheung, N., Mitchell, P., Wong, T. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diabetic+retinopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Diabetic retinopathy.</a> Lancet. 376 (9735), 124-136 (2010).</li>
<li>Murakami, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photoreceptor+cell+death+and+rescue+in+retinal+detachment+and+degenerations%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Retin+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Photoreceptor cell death and rescue in retinal detachment and degenerations.</a> Prog Retin Eye Res. 37, 114-140 (2013).</li>
<li>Russell, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficacy+and+safety+of+voretigene+neparvovec+%28AAV2-hRPE65v2%29+in+patients+with+RPE65-mediated+inherited+retinal+dystrophy%3A+A+randomised%2C+controlled%2C+open-label%2C+phase+3+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Efficacy and safety of voretigene neparvovec (AAV2-hRPE65v2) in patients with RPE65-mediated inherited retinal dystrophy: A randomised, controlled, open-label, phase 3 trial.</a> Lancet. 390, 849-860 (2017).</li>
<li>Gagliardi, G., Ben M'Barek, K., Goureau, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photoreceptor+cell+replacement+in+macular+degeneration+and+retinitis+pigmentosa%3A+A+pluripotent+stem+cell-based+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Retin+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Photoreceptor cell replacement in macular degeneration and retinitis pigmentosa: A pluripotent stem cell-based approach.</a> Prog Retin Eye Res. 71, 1-25 (2019).</li>
<li>Zeng, R., Zhang, Y., Shi, F., Kong, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+experimental+mouse+model+of+retinal+detachment%3A+Complete+functional+and+histologic+recovery+of+the+retina%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">A novel experimental mouse model of retinal detachment: Complete functional and histologic recovery of the retina.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 53, 1685-1695 (2012).</li>
<li>Matsumoto, H., Miller, J. W., Vavvas, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinal+detachment+model+in+rodents+by+subretinal+injection+of+sodium+hyaluronate%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Retinal detachment model in rodents by subretinal injection of sodium hyaluronate.</a> J Vis Exp. 79, e50660(2013).</li>
<li>Timmers, A. M., Zhang, H., Squitieri, A., Gonzalez-Pola, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subretinal+injections+in+rodent+eyes%3A+Effects+on+electrophysiology+and+histology+of+rat+retina%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Vis%22%5BJournal%5D)">Subretinal injections in rodent eyes: Effects on electrophysiology and histology of rat retina.</a> Mol Vis. 7, 131-137 (2001).</li>
<li>Benner, J. D., Hay, A., Landers, M. B., Hjelmeland, L. M., Morse, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibrinolytic-assisted+removal+of+experimental+subretinal+hemorrhage+within+7+days+reduces+outer+retinal+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Fibrinolytic-assisted removal of experimental subretinal hemorrhage within 7 days reduces outer retinal degeneration.</a> Ophthalmology. 101, 672-681 (1994).</li>
<li>Secondi, R., Kong, J., Blonska, A. M., Staurenghi, G., Sparrow, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fundus+autofluorescence+findings+in+a+mouse+model+of+retinal+detachment%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Fundus autofluorescence findings in a mouse model of retinal detachment.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 53, 5190-5197 (2012).</li>
<li>Becker, S., Wang, H., Stoddard, G. J., Hartnett, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+subretinal+injection+on+retinal+structure+and+function+in+a+rat+oxygen-induced+retinopathy+model%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Vis%22%5BJournal%5D)">Effect of subretinal injection on retinal structure and function in a rat oxygen-induced retinopathy model.</a> Mol Vis. 23, 832-843 (2017).</li>
<li>Sene, A., Apte, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflammation-induced+photoreceptor+cell+death%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Exp+Med+Biol%22%5BJournal%5D)">Inflammation-induced photoreceptor cell death.</a> Adv Exp Med Biol. 1074, 203-208 (2018).</li>
<li>Zhang, Z. Y., Sun, Y. J., Song, J. Y., Fan, B., Li, G. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+models+and+examination+methods+of+retinal+detachment%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res+Bull%22%5BJournal%5D)">Experimental models and examination methods of retinal detachment.</a> Brain Res Bull. 169, 51-62 (2021).</li>
<li>Machemer, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+retinal+detachment+in+the+owl+monkey.+IV.+The+reattached+retina%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Experimental retinal detachment in the owl monkey. IV. The reattached retina.</a> Am J Ophthalmol. 66, 1075-1091 (1968).</li>
<li>Dentel, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adaptive+optics+flood+illumination+ophthalmoscopy+in+nonhuman+primates%3A+Findings+in+normal+and+short-term+induced+detached+retinae%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmol+Sci%22%5BJournal%5D)">Adaptive optics flood illumination ophthalmoscopy in nonhuman primates: Findings in normal and short-term induced detached retinae.</a> Ophthalmol Sci. 3 (4), 100316(2023).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Atipemazole (Antidorm 4.27mg/mL)</td><td>Axience SAS, Pantin, France</td><td>/</td><td>Awakening</td></tr><tr><td>Chloramphénicol-rétinol (Ophtalon 10mg/g)</td><td>TVM, Lempdes, France</td><td>FR/V/3787889 6/1989</td><td>Soins postopératoires</td></tr><tr><td>Couvertures Mini 8mm</td><td>World Precision Instruments, Sarasota, FL</td><td>/</td><td>https://www.wpiinc.com/var-1040-cover-slips-pkg-100.html?srsltid=AfmBOoraZfMhuUuY_7rQbM5YKfqM2VR1PT0L-UHQ5uQUdjaeZuogbKP1&utm_source=chatgpt.com</td></tr><tr><td>Hydroxypropylméthylcellulose</td><td>FCI S.A.S., Paris, France</td><td>/</td><td>Administration sous-rétinienne visqueuse</td></tr><tr><td>de kétamine (Ketamidor 100 mg/mL)</td><td>Axience SAS, Pantin, France</td><td>/</td><td>Anesthésie générale</td></tr><tr><td>Lumera 700</td><td>Carl Zeiss, Oberkochen, Allemagne</td><td>https://www.zeiss.com/meditec/en/products/surgical-microscopes/ophthalmic-microscopes/opmi-lumera-700.html?utm_source=chatgpt.com</td><td>Microscope ophtalmique</td></tr><tr><td>Medetomidine (Domitor 0,85 mg/mL)</td><td>Vetoquinol S.A., Paris, France</td><td>https://www.vetoquinol.com/en</td><td>Anesthésie générale</td></tr><tr><td>Micro-injecteur Micro 4</td><td>World Precision Instruments, Sarasota, FL</td><td>SYS-MICRO4</td><td>Injection</td></tr><tr><td>Oxybuprocaïne 1,6 mg/0,4 mL</td><td>de th&eacü ; a, Clermont-Ferrand, France</td><td>https://www.laboratoires-thea.com/en/chlorhydrate-doxybuprocaine-thea?utm_source=chatgpt.com</td><td>Anesthésie locale</td></tr><tr><td>PBS</td><td>Life Technologies Europe B.V., Bleiswijk, Pays-Bas</td><td>14190-094</td> Seringue <td>d’administration sous-rétinienne aqueuse</td></tr><tr><td>(10 ou 20 &micro ; L)</td><td>Hamilton, Reno, NV</td><td>80300</td><td></td></tr><tr><td>Injection Gel lacrymal (Lubrithal)</td><td>Dechron, Shrewsbury, Royaume-Uni</td><td>https://www.dechra.ca/our-products/ca/companion-animal/dog/non-prescription/lubrithal?utm_source=chatgpt.com</td><td>Protection de la cornée</td></tr><tr><td>Tropicamide (Mydriaticum 1 mg/mL)</td><td>Th&eacute ; a, Clermont-Ferrand, France</td><td>/</td><td>Dilatation de la pupille</td></tr></tbody></table>

visualisation peropératoire de l’injection sous-rétinienne et du décollement de la rétine chez le rat

Intraoperative Visualization of Subretinal Injection and Retinal Detachment in Rats

Le succès d’une injection sous-rétinienne repose sur une administration précise et exclusive dans l’espace sous-rétinien (c’est-à-dire entre les photorécepteurs et les couches de l’EPR) par le biais de la rétinotomie, évitant ainsi l’hémorragie sous-rétinienne, car le sang est toxique pour les photorécepteurs et les cellules de l’EPR. La réussite de l’accouchement est confirmée par la visualisation peropératoire (Figure 2L), la photographie du fond d’œil postopératoire immédiate et la tomographie par cohérence optique (OCT). La photographie du fond d’œil exclut la possibilité d’une hémorragie sous-rétinienne, tandis que les B-scans OCT confirment le décollement de la rétine (DR) avec un liquide sous-rétinien clair (Figure 1 et Figure 3). De plus, la photographie du fond d’œil peut identifier le contact du cristallin ou les cataractes induites qui peuvent passer inaperçues pendant la procédure (Figure 3C, D). La photographie et les tomodensitogrammes permettent d’estimer la taille de la zone détachée ou de la bulle (figure 1B-E).
Plusieurs facteurs influencent la taille de la bulle : (1) Emplacement du site d’injection : plus le site d’injection est éloigné du disque optique, plus la zone détachée est petite ; (2) Volume injecté : Un volume d’injection de 20 à 25 μL peut détacher environ la moitié de la rétine chez le rat ; (3) Qualité de la rétine détachée : Dans les modèles de dégénérescence rétinienne (par exemple, P23H, RCS), le décollement peut être difficile en raison de la résistance accrue entre les photorécepteurs et les cellules RPE causée par des processus dégénératifs, tels que la gliose et l’accumulation de matériel sous-rétinien. Dans de tels cas, les décollements de rétine induits sont généralement plats et les tomodensitogrammes sont cruciaux pour délimiter clairement la zone détachée.
Une hémorragie intravitréenne mineure peut survenir au point d’injection, car les microvaisseaux rétiniens ne peuvent pas toujours être complètement évités (Figure 3E). Cependant, ces hémorragies ne s’étendent généralement pas dans l’espace sous-rétinien.
En cas de détachement insuffisant, le problème doit être reconnu en peropératoire, nécessitant une réinjection immédiate par la rétinotomie préformée. Au cours d’une séance expérimentale avec 20 rats, deux chirurgiens (un expérimenté et un débutant) ont effectué la méthode étape par étape. Le chirurgien expérimenté a réussi dans 9 procédures sur 10, tandis que le débutant a réussi dans 6 procédures sur 10.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67483/67483fig1.jpg"> 
Figure 1 : Vue d’ensemble du processus et des résultats. (A) Représentation schématique du processus d’injection sous-rétinienne dans un œil de rat, montrant le volume significatif du cristallin. (B, C) Photographie du fond d’œil immédiatement après l’injection (B) et 6 jours après l’injection (C). Les pointes de flèche indiquent le site d’injection. La zone de décollement de la rétine est délimitée par une ligne pointillée. (D, E) La tomographie par cohérence optique B-scans est immédiatement après l’injection (D) et 6 jours après l’injection (E). ON : nerf optique. Grossissement : 1x. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67483/67483fig1large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version plus grande de cette figure.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67483/67483fig2.jpg"> 
Figure 2 : Étapes du protocole d’injection sous-rétinienne. Le protocole est démontré chez un rat Long Evans âgé de 8 semaines sous anesthésie générale. Pour une description détaillée de chaque étape, reportez-vous à la vidéo ou à la section « Protocole » dans le texte. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67483/67483fig2large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67483/67483fig3.jpg"> 
Figure 3 : Exemples de divers résultats de photographie du fond d’œil postopératoire. (A) Aspect postopératoire normal avec une dispersion mineure des pigments au site d’injection (flèche). (B) Aspect postopératoire normal avec une petite bulle d’air intravitréen au site d’injection. Ces petites bulles d’air proviennent de la seringue et sont inoffensives, même dans l’espace sous-rétinien. (C, D) Toucher du cristallin entraînant une opacification mineure (C) ou significative (D) du cristallin (cataracte). (E, F) Saignement intravitréen mineur (E) ou plus étendu (F) localisé près du site d’injection, sans propagation dans l’espace sous-rétinien. (G) Saignement au point d’injection se propageant principalement dans l’espace sous-rétinien. Dans ce cas, la rétinotomie a causé une lésion d’un vaisseau sanguin rétinien. (H) Hémorragie intravitréenne étendue résultant d’une pénétration sclérale. Grossissement : 1x. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67483/67483fig3large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version plus grande de cette figure.</a>

Visualisation peropératoire de l’injection sous-rétinienne et du décollement de la rétine chez le rat

Subretinal injection, the delivery of a solution between the photoreceptors and the retinal pigment epithelium (RPE), creates a subretinal space where ...

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Medicine

Médecine

Source : Park, S. W., et al. Approche limbique-injection sous-rétinienne de vecteurs viraux pour la thérapie génique chez l’épithélium pigmentaire rétinien de souris. J. Vis. Exp. (2015)La vidéo décrit la méthode d’injection sous-rétinienne de vecteurs viraux dans l’épithélium pigmentaire rétinien (EPR) dans un modèle murin. Il détaille la procédure, de l’anesthésie et de la préparation oculaire à l’administration précise du vecteur lentiviral, assurant l’intégration et l’expression des gènes...

Injection sous-rétinienne de vecteurs viraux dans l’épithélium pigmentaire rétinien dans un modèle murin

Création décollements de rétine expérimentales avec une hauteur reproductible et durable de détachement, et sans hémorragie sous-rétinienne, est important pour l'étude de la physiopathologie des photorécepteurs perte de cellules dans la maladie de la rétine et l'évaluation des interventions thérapeutiques potentielles. Ici, nous rapportons une telle méthode en détail.

Décollement de la rétine modèle chez les rongeurs par injection sous-rétinienne de hyaluronate de sodium

Nous présentons ici un protocole accepté par la communauté en format multimédia pour l’injection sous-rétinienne d’un bolus de cellules EPR chez le rat et la souris. Cette approche peut être utilisée pour déterminer les potentiels de sauvetage, les profils d’innocuité et les capacités de survie des cellules EPR greffées lors de l’implantation dans des modèles animaux de dégénérescence rétinienne.

Exécution sous-rétinienne injections chez les rongeurs de produire des cellules de l&#39;épithélium pigmentaire rétinien Suspension

L’injection directe dans le nerf optique du rat est utile pour la recherche régénérative. Nous démontrons une technique mini-invasive d’injection directe dans un nerf optique de rat qui n’implique pas d’ouverture du crâne. Grâce à cette méthode, les complications chirurgicales sont minimisées et la récupération est plus rapide.

Technique mini-invasive pour injection dans Rat Optic Nerve

Les injections sous-rétiniennes sont la technique la plus courante pour administrer de grands agents thérapeutiques tels que des protéines et des vecteurs viraux aux photorécepteurs et à l’épithélium pigmentaire rétinien. Une méthode alternative chez la souris qui cible avec succès l’espace sous-rétinien avec des dommages collatéraux minimaux et des temps de récupération rapides est décrite ici.

Une méthode alternative et Validé Injection pour l&#39;accès à l&#39;espace sous-rétinien<i&gt; via</i&gt; Une approche transclérale Postérieur

Injection sous-rétinienne a été largement appliquée dans les études précliniques de thérapie de remplacement de cellules souches pour la dégénérescence maculaire liée à l’âge. Dans cet article visualisé, nous décrivons une technique d’injection sous-rétinienne moins risqués, reproductibles et précisément modifiés via l’approche trans-sclérale pour livrer des cellules dans les yeux de rat.

Élaboration d’un protocole raffiné pour Trans-sclérale Transplantation sous-rétinienne des cellules épithéliales humaines pigmentaire dans les yeux de Rat

Nous démontrons une nouvelle approche à l’utilisation de tomographie à cohérence optique domaine spectral haute résolution (HR-SD-OCT) pour aider l’administration d’agents de thérapie génique dans l’espace sous-rétinienne, évaluer sa couverture areal et caractériser la vitalité des photorécepteurs.

Tomographie à cohérence optique souris ultra haute résolution pour faciliter l’Injection intraoculaire dans la recherche de la thérapie génique rétinienne

Cellules épithéliales pigmentaire rétinien pouvaient constituer une thérapie cellulaire-remplacement de la forme avancée de la dégénérescence maculaire sèche liée à l’âge. Ce protocole décrit la génération d’un modèle grand aux yeux de l’atrophie géographique et la sous-rétinienne transplantation de cellules épithéliales pigmentaire rétinien dérivé de cellules souches embryonnaires humaines dans ce modèle de la maladie.

Sous-rétinienne Transplantation de cellules souches embryonnaires humaines pigmentaires rétiniennes dérivées de cellules épithéliales dans un modèle grand aux yeux de l’atrophie géographique

Ce protocole décrit une technique unique utilisant une approche transconjonctivale pour accéder au nerf optique du rat pour des injections.

Approche transconjonctivale pour l’injection dans le nerf optique du rat

Cette étude présente une méthodologie pour l’administration de produits thérapeutiques dans la rétine et les nerfs optiques du rat adulte. De plus, une méthode unique de prélèvement tissulaire est introduite pour une collecte descendante en bloc du nerf optique et de la rétine chez un rat adulte.

Administration thérapeutique oculaire et prélèvement tissulaire avancé chez le rat adulte

Découvrez une technique de chirurgie oculaire pour l'injection sous-rétinienne chez le rat avec visualisation peropératoire. Cette méthode améliore la reproductibilité et la sécurité des études sur le décollement de la rétine.

Visualisation peropératoire de l’injection sous-rétinienne et du décollement de la rétine chez le rat

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