Name: Évaluation du dépôt de fer dans le cerveau de souris 5xFAD par coloration Perls/DAB (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-05-23T12:45:00.000+00:00
Duration: 7 min 32 s
Description: Découvrez la coloration Perls/DAB pour évaluer le dépôt de fer dans le cerveau de souris 5xFAD modèle Alzheimer. Cette méthode histochimique permet une détection sensible et spécifique du fer dans l'hippocampe et le cortex.

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<ol><li>Karlawish, J., Jack, C. R., Rocca, W. A., Snyder, H. M., Carrillo, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alzheimer%27s+disease%3A+The+next+frontier-special+report+2017%5BTitle%5D)+AND+%22Alzheimer%27s+Dement%22%5BJournal%5D)">Alzheimer's disease: The next frontier-special report 2017.</a> Alzheimer's Dement. 13 (4), 374-380 (2017).</li>
<li>Praticò, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oxidative+stress+hypothesis+in+Alzheimer%27s+disease%3A+A+reappraisal%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Pharmacol+Sci%22%5BJournal%5D)">Oxidative stress hypothesis in Alzheimer's disease: A reappraisal.</a> Trends in Pharmacol Sci. 29 (12), 609-615 (2008).</li>
<li>Sayre, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+situ+oxidative+catalysis+by+neurofibrillary+tangles+and+senile+plaques+in+alzheimer%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurochem%22%5BJournal%5D)">In situ oxidative catalysis by neurofibrillary tangles and senile plaques in alzheimer's disease.</a> J. Neurochem. 74 (1), 270-279 (2001).</li>
<li>Urrutia, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflammation+alters+the+expression+of+dmt1%2C+fpn1+and+hepcidin%2C+and+it+causes+iron+accumulation+in+central+nervous+system+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurochem%22%5BJournal%5D)">Inflammation alters the expression of dmt1, fpn1 and hepcidin, and it causes iron accumulation in central nervous system cells.</a> J. Neurochem. 126 (4), 541-549 (2013).</li>
<li>Hardy, J., Selkoe, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+amyloid+hypothesis+of+Alzheimer%27s+disease%3A+Progress+and+problems+on+the+road+to+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">The amyloid hypothesis of Alzheimer's disease: Progress and problems on the road to therapeutics.</a> Science. 297 (5580), 353-356 (2002).</li>
<li>Scheltens, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alzheimer%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Alzheimer's disease.</a> Lancet. 397 (10284), 1577-1590 (2021).</li>
<li>Ficiarà, E., Munir, Z., Boschi, S., Caligiuri, M. E., Guiot, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alteration+of+iron+concentration+in+alzheimer%27s+disease+as+a+possible+diagnostic+biomarker+unveiling+ferroptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Alteration of iron concentration in alzheimer's disease as a possible diagnostic biomarker unveiling ferroptosis.</a> Int J Mol Sci. 22 (9), 4479(2021).</li>
<li>Yang, W. S., Stockwell, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ferroptosis%3A+Death+by+lipid+peroxidation%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Ferroptosis: Death by lipid peroxidation.</a> Trends in Cell Biol. 26 (3), 165-176 (2016).</li>
<li>Lane, D. J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Iron+and+Alzheimer%27s+disease%3A+An+update+on+emerging+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22J+Alzheimers+Dis%22%5BJournal%5D)">Iron and Alzheimer's disease: An update on emerging mechanisms.</a> J Alzheimers Dis. 64 (s1), S379-S395 (2018).</li>
<li>Meadowcroft, M. D., Connor, J. R., Smith, M. B., Yang, Q. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mri+and+histological+analysis+of+beta-amyloid+plaques+in+both+human+Alzheimer%27s+disease+and+app%2Fps1+transgenic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Magn+Reson+Imaging%22%5BJournal%5D)">Mri and histological analysis of beta-amyloid plaques in both human Alzheimer's disease and app/ps1 transgenic mice.</a> J Magn Reson Imaging. 29 (5), 997-1007 (2009).</li>
<li>Winterbourn, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toxicity+of+iron+and+hydrogen+peroxide%3A+The+Fenton+reaction%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol+Lett%22%5BJournal%5D)">Toxicity of iron and hydrogen peroxide: The Fenton reaction.</a> Toxicol Lett. 82-83, 969-974 (1995).</li>
<li>Silvestri, L., Camaschella, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+potential+pathogenetic+role+of+iron+in+Alzheimer%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">A potential pathogenetic role of iron in Alzheimer's disease.</a> J Cell Mol Med. 12 (5a), 1548-1550 (2008).</li>
<li>Gamblin, T. C., King, M. E., Kuret, J., Berry, R. W., Binder, L. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oxidative+regulation+of+fatty+acid-induced+tau+polymerization%5BTitle%5D)+AND+%22Biochemistry%22%5BJournal%5D)">Oxidative regulation of fatty acid-induced tau polymerization.</a> Biochemistry. 39 (46), 14203-14210 (2000).</li>
<li>Meguro, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonheme-iron+histochemistry+for+light+and+electron+microscopy%3A+A+historical%2C+theoretical+and+technical+review%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Histol+Cytol%22%5BJournal%5D)">Nonheme-iron histochemistry for light and electron microscopy: A historical, theoretical and technical review.</a> Arch Histol Cytol. 70 (1), 1-19 (2007).</li>
<li>Lehéricy, S., Roze, E., Goizet, C., Mochel, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mri+of+neurodegeneration+with+brain+iron+accumulation%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Neurol%22%5BJournal%5D)">Mri of neurodegeneration with brain iron accumulation.</a> Curr Opin Neurol. 33 (4), 462-473 (2020).</li>
<li>Nabuurs, R. J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-field+MRI+of+single+histological+slices+using+an+inductively+coupled%2C+self-resonant+microcoil%3A+Application+to+ex+vivo+samples+of+patients+with+Alzheimer%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22NMR+Biomed%22%5BJournal%5D)">High-field MRI of single histological slices using an inductively coupled, self-resonant microcoil: Application to ex vivo samples of patients with Alzheimer's disease.</a> NMR Biomed. 24 (4), 351-357 (2010).</li>
<li>Perl, D. P., Good, P. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+techniques+for+determining+cellular+iron+distribution+in+brain+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Neurol%22%5BJournal%5D)">Comparative techniques for determining cellular iron distribution in brain tissues.</a> Ann Neurol. 32 (S1), S76-S81 (1992).</li>
<li>Riemer, J., Hoepken, H. H., Czerwinska, H., Robinson, S. R., Dringen, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Colorimetric+ferrozine-based+assay+for+the+quantitation+of+iron+in+cultured+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Biochem%22%5BJournal%5D)">Colorimetric ferrozine-based assay for the quantitation of iron in cultured cells.</a> Anal Biochem. 331 (2), 370-375 (2004).</li>
<li>Luterotti, S., Kordić, T., Dodig, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+determination+of+iron+and+copper+in+children%27s+sera+by+FAAS%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Pharm%22%5BJournal%5D)">Simultaneous determination of iron and copper in children's sera by FAAS.</a> Acta Pharm. 61 (1), 93-102 (2011).</li>
<li>Hill, J. M., Switzer, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+regional+distribution+and+cellular+localization+of+iron+in+the+rat+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">The regional distribution and cellular localization of iron in the rat brain.</a> Neuroscience. 11 (3), 595-603 (1984).</li>
<li>Meguro, R., Asano, Y., Iwatsuki, H., Shoumura, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perfusion-perls+and+-turnbull+methods+supplemented+by+dab+intensification+for+nonheme+iron+histochemistry%3A+Demonstration+of+the+superior+sensitivity+of+the+methods+in+the+liver%2C+spleen%2C+and+stomach+of+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Histochem+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Perfusion-perls and -turnbull methods supplemented by dab intensification for nonheme iron histochemistry: Demonstration of the superior sensitivity of the methods in the liver, spleen, and stomach of the rat.</a> Histochem Cell Biol. 120 (1), 73-82 (2003).</li>
<li>Liu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((S-nitrosylation+of+divalent+metal+transporter+1+enhances+iron+uptake+to+mediate+loss+of+dopaminergic+neurons+and+motoric+deficit%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">S-nitrosylation of divalent metal transporter 1 enhances iron uptake to mediate loss of dopaminergic neurons and motoric deficit.</a> J Neurosci. 38 (39), 8364-8377 (2018).</li>
<li>Guillemot, J., Canuel, M., Essalmani, R., Prat, A., Seidah, N. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Implication+of+the+proprotein+convertases+in+iron+homeostasis%3A+Proprotein+convertase+7+sheds+human+transferrin+receptor+1+and+furin+activates+hepcidin%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Implication of the proprotein convertases in iron homeostasis: Proprotein convertase 7 sheds human transferrin receptor 1 and furin activates hepcidin.</a> Hepatology. 57 (6), 2514-2524 (2013).</li>
<li>Li, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ferritin+light+chain+interacts+with+pen-2+and+affects+%CE%B3-secretase+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Lett%22%5BJournal%5D)">Ferritin light chain interacts with pen-2 and affects γ-secretase activity.</a> Neurosci Lett. 548, 90-94 (2013).</li>
<li>Jin Jung, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oxidative+stress+induces+inactivation+of+protein+phosphatase+2a%2C+promoting+proinflammatory+nf-%CE%BAb+in+aged+rat+kidney%5BTitle%5D)+AND+%22Free+Radic+Biol+Med%22%5BJournal%5D)">Oxidative stress induces inactivation of protein phosphatase 2a, promoting proinflammatory nf-κb in aged rat kidney.</a> Free Radic Biol Med. 61, 206-217 (2013).</li>
<li>Connor, J. R., Menzies, S. L., Martin, S. M. S., Mufson, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+distribution+of+transferrin%2C+ferritin%2C+and+iron+in+normal+and+aged+human+brains%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Res%22%5BJournal%5D)">Cellular distribution of transferrin, ferritin, and iron in normal and aged human brains.</a> J Neurosci Res. 27 (4), 595-611 (2004).</li>
</ol>

La maladie d’Alzheimer (MA) est la maladie neurodégénérative la plus courante et est devenue un problème grave pour la société. La prévalence de la MA augmente considérablement avec l’âge de1, 2, 3 et 4 ans. Les principales caractéristiques pathologiques de la maladie d’Alzheimer (MA) comprennent le dépôt de plaques β-amyloïdes (Aβ) et d’enchevêtrements neurofibrillaires (NFT) dus à la phosphorylation aberrante des protéines tau. Aβ est généré par le clivage séquentiel de la protéine précurseur de l’amyloïde (APP) par les enzymes β-sécrétase et γ-sécrétase. La dérégulation de la production ou de l’élimination d’Aβ conduit à son accumulation dans le cerveau, formant des plaques amyloïdes, qui sont reconnues comme l’un des premiers marqueurs pathologiques de la MA. Ces plaques causent non seulement des dommages neuronaux directs, mais déclenchent également une cascade d’effets néfastes, notamment la neuroinflammation, le stress oxydatif et le dysfonctionnement synaptique. Collectivement, ces processus contribuent à la mort neuronale et au déclin cognitif progressif observé dans AD5. Malgré des décennies de recherche ciblant principalement les caractéristiques pathologiques de la maladie d’Alzheimer (MA), notamment le dépôt de plaques β amyloïde et l’agrégation hyperphosphorylée de la protéine tau, les percées thérapeutiques cliniquement significatives restent insaisissables, les interventions existantes démontrant une efficacité limitée pour modifier la progression de la maladie6.
Le fer est un métal important pour le maintien de la fonction cérébrale et est impliqué dans le transport de l’oxygène, la synthèse de l’ADN, la respiration mitochondriale, la synthèse de la myéline, la synthèse des neurotransmetteurs et le métabolisme. Cependant, le fer devient nocif lorsque les concentrations dépassent la capacité de séquestration cellulaire 6,7,8. Une augmentation des dépôts de fer, généralement co-localisée avec les plaques Aβ, a été observée dans les régions corticales et hippocampiques du cerveau chez les patients atteints de la MA 9,10. Grâce à la réaction de Fenton11, le fer libre intracellulaire peut générer des radicaux hydroxyles (•OH) ainsi que des espèces réactives de l’oxygène. Ces substances nocives induisent non seulement une neuroinflammation en activant les cellules gliales, mais attaquent également les biomolécules de la cellule par le biais du stress oxydatif, perturbant la fonction cellulaire normale et entraînant un dysfonctionnement synaptique 8,12. De plus, l’augmentation du fer est directement impliquée dans le développement des signes pathologiques de la MA : le fer contribue à la production de Aβ12 et augmente également le dysfonctionnement de la protéine tau, entraînant des enchevêtrements neurofibrillaires13.
Plusieurs techniques ont été développées pour évaluer la teneur en fer dans le cerveau, notamment l’imagerie par résonance magnétique (IRM), ainsi que des méthodes chimiques et histochimiques14. La quantification in vivo des taux de fer intracérébral à l’aide de l’IRM est cliniquement importante pour les patients vieillissants et atteints de neurodégénérescence15. L’IRM a l’avantage d’être non invasive et très sensible : elle permet de détecter les dépôts de fer dès les premiers stades de la maladie. En particulier, la technique d’augmentation R2 dépendante du champ (FDRI) permet de distinguer différentes formes de fer, telles que la ferritine et l’hème-fer16. Cependant, l’IRM ne peut pas détecter l’accumulation de fer au niveau cellulaire, et elle est coûteuse, elle est donc principalement utilisée dans les investigations cliniques17.
La mesure colorimétrique est une méthode chimique qui détermine la concentration d’une substance (comme le fer) en mesurant l’intensité de la couleur produite par la réaction de la substance en solution avec un agent chromogène18. Cette méthode est facile à mettre en œuvre et utilise des réactifs et des instruments peu coûteux, ce qui la rend adaptée aux laboratoires disposant de budgets limités18. Cependant, la précision et la sensibilité de cette méthode sont très limitées, car les résultats sont soumis à l’influence de facteurs environnementaux, du temps de développement des couleurs et du jugement subjectif de l’opérateur. La spectrométrie d’absorption atomique de flamme (FAAS) est une autre méthode qui peut être utilisée pour évaluer les niveaux de fer19. Dans cette méthode, une solution d’échantillon clarifiée est obtenue en brûlant le tissu d’intérêt dans un four à haute température. L’échantillon est ensuite dissous à l’aide d’acide chlorhydrique, et la concentration de fer dans la solution est déterminée par spectrométrie d’absorption atomique. Cette méthode est très sensible et convient à tous les types d’échantillons biologiques19. Cependant, le processus prend du temps et nécessite un équipement coûteux, de sorte que son utilisation est limitée.
La coloration Perls/DAB pour détecter la fonte ferrique non héminique est la méthode de détection du fer la plus couramment utilisée en raison de sa grande spécificité et de sa facilité de mise en œuvre par rapport à d’autres méthodes histochimiques14. Contrairement à l’analyse colorimétrique, la coloration de Perls est une méthode de coloration histochimique qualitative qui repose sur la réaction entre les ions fer et le ferrocyanure de potassium pour générer un précipité bleu. Il est utilisé pour visualiser au microscope la présence et la distribution du fer dans les tissus. De plus, cette méthode nous permet de distinguer les dépôts de fer dans différents types de cellules et d’observer la distribution subcellulaire des dépôts de fer, fournissant une méthode pour l’étude de20 après JC. La coloration de Perls détecte principalement la fonte ferrique non héminique et dépend de la formation du complexe du bleu de Prusse :
<img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/67501/67501eq01.jpg" style="margin: auto;">
(Bleu de Prusse)
Cependant, la coloration traditionnelle de Perls est inefficace pour détecter la localisation du fer à de faibles niveaux de fer. Lorsque la diaminobenzidine (DAB) est ajoutée, elle réagit avec l’hexacyanoferrate ferrique pour former un composé brun, augmentant ainsi la spécificité du test21.
L’objectif de ce protocole est de décrire comment évaluer la quantité et la distribution des dépôts de fer dans le cerveau d’un modèle murin de MA. Dans ce protocole, des souris transgéniques 5×FAD (C57BL/6J) âgées de 8 mois ont été utilisées comme modèle de souris MA et ont été comparées à des souris de type sauvage du même âge. Les détails des procédures de préparation du réactif chimique, de section du cerveau, d’exécution de la coloration Perls/DAB et d’analyse des images prises après la coloration sont présentés ici.

<table><tbody><tr><td>0,1 M PBS</td><td>biosharp</td><td>BL601A</td><td>Ajouter de l’eau désionisée pour obtenir une solution</td></tr><tr><td>à 4 % de PFA.</td><td>Beyotime</td><td>P0099</td><td>Restaurer à 4 &deg ; C pour l’utilisation</td></tr><tr><td>20X solution DAB</td><td>Bioss</td><td>C-0003</td><td>Mix 10 &mu ; l solution A, 10 &mu ; l solution B et 180 &mu ; l PBS</td></tr><tr><td>Alcool</td><td>Supelco</td><td>107017</td><td></td></tr><tr><td>HCL</td><td>Sigma</td><td>7647-01-0</td><td>Ajouter de l’eau distillée à 50 ml de</td></tr><tr><td>kétamine&nbsp ;</td><td>China National Medicines</td><td>H20193336</td><td>100 mg/kg pour l’anesthésie</td></tr><tr><td>Microscope</td><td>Olympus</td><td>CX43</td><td></td></tr><tr><td>Température de coupe optimale (OCT)</td><td>Sakura Finetek</td><td>4583</td><td></td></tr><tr><td>solution de ferrocyniure de potassium</td><td>Sigma</td><td>14038-43-8</td><td>Ajouter de l’eau distillée à 50 ml</td></tr><tr><td>de saccharose</td><td>Sigma</td><td>57-50-1</td><td></td></tr><tr><td>xylazine& nbsp ;</td><td>Y-S Biotechnology</td><td>YS-(BC)-2842</td><td>15 mg/kg pour anesthésie</td></tr><tr><td>Xylenes</td><td>Sigma</td><td>1330-20-7</td><td></td></tr></tbody></table>

Évaluation du dépôt de fer dans le cerveau de souris 5xfad par coloration perls/dab

Assessing Iron Deposition in the Brains of 5xFAD Mice by Perls'/DAB Staining

Pour étudier la distribution et l’accumulation du fer dans un modèle murin de MA, nous avons effectué une coloration Perls/DAB dans des tranches sagittales de souris 5xFAD âgées de 8 mois. Comme le montre la figure 3, des signaux de coloration Perls/DAB ont été observés chez des souris 5xFAD et de type sauvage âgées de 8 mois et chez des souris de type sauvage âgées de 2 mois. Chez les souris 5xFAD, des signaux de coloration Perls/DAB élevés ont été observés dans l’hippocampe et le cortex, e...

Évaluation du dépôt de fer dans le cerveau de souris 5xFAD par coloration Perls/DAB

Alzheimer's disease (AD), a common neurodegenerative disease, is the leading cause of dementia in the elderly. Iron deposition is closely linked to the ...

assessing-iron-deposition-brains-5xfad-mice-perls-dab

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Une des caractéristiques pathologiques de la MA est la formation de plaques amyloïdes β protéines neuritique positif. Dans ce protocole, nous décrivons deux méthodes pour détecter les plaques séniles dans le modèle de souris transgéniques AD: détection immunohistochimique utilisant la méthode ABC et DAB et détection par fluorescence en utilisant la méthode de coloration thioflavine S.

La détection de plaques séniles dans le modèle d&#39;Alzheimer La maladie de la souris

Source : Mukherjee, K., et. al. Analyse des mitochondries cérébrales à l’aide de la microscopie électronique à balayage en série Block-face. J. Vis. Exp. (2016)Cette vidéo démontre la préparation, l’imagerie et l’analyse du tissu cérébral de souris à l’aide d’un microscope électronique à balayage à face de bloc en série (SBFSEM) pour visualiser l’ultrastructure mitochondriale, permettant une cartographie précise de leur morphologie et de leur distribution spatiale dans les compartiments...

 Imagerie des mitochondries neuronales à l’aide d’un microscope électronique à balayage à face carrée en série

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Longitudinal<em&gt; In Vivo</em&gt; Imagerie du Cerebrovasculature: Pertinence pour les maladies du système nerveux central

cartographie Quantitativement métaux dans les tissus par ablation laser - plasma à couplage inductif - spectrométrie de masse (LA-ICP-MS) est une technique d'analyse sensible qui peut fournir un nouvel éclairage sur la façon dont les métaux participent aux processus fonctionnels et les maladies normales. Ici, nous décrivons un protocole pour l'imagerie quantitative des métaux dans des coupes minces de tissu neurologique de la souris.

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Quantification du transport du fer à travers le placenta de la souris in vivo à l’aide d’isotopes de fer non radioactifs

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Découvrez la coloration Perls/DAB pour évaluer le dépôt de fer dans le cerveau de souris 5xFAD modèle Alzheimer. Cette méthode histochimique permet une détection sensible et spécifique du fer dans l'hippocampe et le cortex.

Évaluation du dépôt de fer dans le cerveau de souris 5xFAD par coloration Perls/DAB

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