Méthode de prélèvement sanguin à travers la paroi pour minimiser les perturbations du sommeil en milieu clinique

Nous étudions comment le sommeil et les rythmes circadiens altèrent la santé cardiométabolique. En fin de compte, nous aimerions trouver des stratégies pour réduire le reste des maladies associées au sommeil et aux perturbations circadiennes. Pour étudier les choses qui changent dans le corps sur 24 heures, nous devons avoir une fenêtre sur le système pendant toute la période.

Cela peut être difficile parce que nous ne voulons pas perturber le sommeil dans les rythmes circadiens en allant dans la chambre d’un participant pendant qu’il dort pour faire un prélèvement sanguin. Pour contourner ce problème, nous utilisons un protocole de prélèvement sanguin à travers le mur. Nous comblons l’écart en utilisant une longue ligne IV que nous plaçons à travers le mur à partir de laquelle nous pouvons prélever du sang à l’extérieur de la salle des participants.

Cela nous permet de prélever des échantillons de sang avec une perturbation minimale du sommeil et des rythmes circadiens. Nos résultats permettront aux chercheurs d’accéder à des marqueurs de santé métabolique tels que le glucose et l’insuline pendant 24 heures sans perturber le sommeil, ce qui peut aider à clarifier l’influence du sommeil et des rythmes circadiens sur le risque de maladie. Pour commencer, fixez la ligne d’extension pour l’échantillonnage à travers la paroi en connectant la butée à trois voies à l’extrémité du verrou de leurre femelle de la ligne d’extension.

Après avoir brisé les joints, placez la seringue de rinçage de solution saline de 10 millilitres et la seringue d’échantillon de trois millilitres sur le robinet d’arrêt. Tournez la languette d’arrêt du robinet d’arrêt pour fermer la ligne d’extension de la seringue de trois millilitres et ouvrez-la jusqu’au rinçage salin de 10 millilitres. Poussez la solution saline à travers la ligne d’extension jusqu’à ce qu’elle atteigne la fin.

Retirez délicatement le capuchon et laissez la solution saline s’égoutter dans une tasse ou sur le tampon absorbant. Tournez la languette d’arrêt pour fermer la ligne d’extension des deux seringues, en les maintenant attachées au robinet d’arrêt. Faites passer l’extrémité bouchée de la ligne d’extension à travers le port mural dans la salle du participant, en vous assurant que le capuchon reste en place pour maintenir la stérilité.

Dans la salle du participant, nettoyez l’extrémité distale de la ligne d’extension et le côté de fixation de l’ensemble d’extension IV. À l’aide d’un tampon de préparation à l’alcool stérile, retirez le capuchon de la ligne d’extension et fixez-le à l’ensemble d’extension IV connecté au participant. Retournez maintenant à l’antichambre.

Retirez et jetez la chasse d’eau saline utilisée du robinet d’arrêt et fixez-y une chasse d’eau saline réchauffée de 10 millilitres. Tournez la languette d’arrêt pour fermer la ligne de la seringue d’échantillon et ouvrez-la jusqu’à la nouvelle chasse d’eau saline. Poussez du sérum physiologique à travers la ligne d’extension pour vérifier l’absence de fuites et confirmer que la ligne IV reste perméable.

Continuez lentement à pousser la chasse d’eau saline tout en tournant simultanément la languette d’arrêt pour sceller complètement le système. Une fois que la ligne d’extension est confirmée comme fonctionnelle, retournez dans la chambre du participant pour envelopper l’ensemble d’extension IV avec un bandage élastique auto-adhésif pour éviter de se déloger pendant le sommeil. Fixez solidement la ligne d’extension au cadre de lit.

Fixez une seringue de vidange de cinq millilitres en vous assurant que la ligne d’extension est amorcée à l’aide d’une solution saline et connectez une seringue d’échantillon de trois millilitres au robinet d’arrêt. Tournez la languette d’arrêt pour ouvrir la ligne vers la seringue de cinq millilitres. À l’aide de la seringue de cinq millilitres, collectez au moins 4,4 millilitres de déchets.

Continuez ensuite à prélever jusqu’à ce que du sang total apparaisse. Tournez maintenant la languette d’arrêt pour fermer la ligne à la seringue de déchets de cinq millilitres. Utilisez la seringue de trois millilitres pour prélever la quantité de sang souhaitée et tournez la languette pour fermer la ligne d’extension des deux seringues.

Retirez la seringue de vidange de cinq millilitres et remplacez-la par une chasse d’eau saline chaude de 10 millilitres. Tournez la languette d’arrêt pour fermer la ligne à la seringue d’échantillon de trois millilitres. L’ouvrir à la chasse d’eau saline.

Poussez jusqu’à 10 millilitres de solution saline chaude dans la ligne d’extension, en vous assurant qu’il ne reste pas de sang dans la ligne. Retirez la seringue d’échantillon remplie de sang pour un traitement ultérieur et remplacez-la par une seringue vide de trois millilitres. Tournez la languette d’arrêt pour fermer la ligne aux deux seringues.

Continuez lentement à pousser le rinçage salin tout en tournant la languette d’arrêt pour maintenir la pression dans la ligne d’extension et minimiser le reflux sanguin. Utilisez toute solution saline restante pour rincer à travers le robinet d’arrêt dans la seringue vide de trois millilitres. Retirez ensuite la seringue saline et tirez sur la seringue de trois millilitres pour extraire tout liquide restant du robinet d’arrêt.

Remplacez toutes les seringues pour vous préparer à la prochaine prise de sang. Le profil de concentration plasmatique de mélatonine sur 24 heures d’un participant a été mesuré dans des conditions de faible luminosité. Les résultats suggèrent que les niveaux de mélatonine suivent un schéma distinct d’augmentation et de baisse compatible avec un rythme circadien normal, confirmant que la méthode d’échantillonnage sanguin à travers la paroi capture avec précision les changements hormonaux pendant la nuit biologique.

Dans une étude récente, le taux de réussite de l’échantillonnage de sang à travers la paroi était de 67 %, ce qui correspond à 304 tentatives de prise de sang sur 454, les prises de sang infructueuses représentaient 33 % des tentatives, 94 % de ces échecs étant attribués à des problèmes de position tels que le participant allongé sur ou obstruant la ligne d’extension. Lors d’une prise de sang facile, les enregistrements de polysomnographie ont montré des signaux stables d’électroencéphalogramme, d’électrogramme, d’électromyogramme et d’électrocardiogramme sans signe d’éveil ou de changement de stade de sommeil. Une prise de sang difficile était associée à une perturbation de l’activité de l’électroencéphalogramme, de l’électrogramme et de l’électromyogramme, ainsi qu’à une fréquence cardiaque élevée indiquant une excitation.