Procédure d’implant chirurgical et configuration de câblage pour la surveillance continue à long terme de l’EEG/ECG chez le lapin

À l’aide d’enregistrements EEG et ECG continus, l’objectif de l’étude est de surveiller simultanément l’activité électrique dans le cerveau et le cœur. Cela fournit une plate-forme pour nous permettre d’examiner la cascade multisystémique d’événements qui entourent les arythmies cardiaques, les crises d’épilepsie et, finalement, menant à la mort subite. Ce système d’enregistrement permet d’acquérir des EEG et des ECG 24 heures sur 24 et 7 jours sur 7 de plusieurs lapins non retenus au cours de divers états physiologiques et d’événements épisodiques rares.

Il facilite les enregistrements continus sans avoir besoin d’une supervision directe, est abordable, fournit des données immédiates directement au chercheur et ne nécessite pas le remplacement de piles appartenant à des tiers. Le développement d’une configuration d’enregistrement câblée sur mesure a été conçu pour faciliter la liberté de mouvement du lapin dans son environnement de logement naturel. Les fils sont enfermés pour les protéger contre les morsures.

Ainsi, le faisceau de câbles et le tunneling de toutes les électrodes sous la peau permettent des enregistrements continus pendant divers états physiologiques. Avec notre système, nous avons amassé une grande quantité de données de haute qualité qui nous permettent d’étudier la prévalence, le substrat et les déclencheurs d’une activité électrique anormale dans le cerveau et le cœur. Il nous permet également d’évaluer la concordance entre les anomalies de l’EEG et de l’ECG, qui peuvent entraîner une mort subite.

Pour commencer, procurez-vous la prise complémentaire pour l’alon de bâbord avec l’émerillon retenant neuf fils préconnectés de chaque côté. À l’aide d’une pince coupante, coupez les fils à cinq centimètres du côté du plus petit pivot et dénudez cinq millimètres de revêtement de fil sur les extrémités. Faites glisser un morceau de deux centimètres de petite gaine rétractable sur chaque fil de la prise complémentaire.

Soudez soigneusement les fils. Pour chaque fil, faites glisser la gaine thermorétractable sur les connexions soudées. À l’aide d’un pistolet thermique, rétrécissez le tube pour le fixer solidement en place.

Passez ensuite un long morceau de grande gaine thermorétractable sur le bouchon, en le faisant glisser pour couvrir toute la longueur du faisceau de fils. Du côté de l’émerillon le plus grand, dénudez cinq millimètres de revêtement de fil à l’extrémité de chaque fil à l’aide d’une pince à dénuder et faites glisser un morceau de gaine métallique de plus de 45 centimètres de long sur le faisceau de fils. Ensuite, fixez les fils du côté le plus large de l’émerillon aux fils d’électrode coupés.

Fixez une petite gaine thermorétractable sur chaque connexion et utilisez un pistolet thermique pour fixer la gaine en place. Faites maintenant glisser la gaine métallique sur les fils nouvellement connectés et pivotez. Après avoir étiré la gaine métallique, marquez l’emplacement sur la gaine en nylon pour référence.

Ensuite, glissez un morceau d’un centimètre de tube en caoutchouc de 15 millimètres de diamètre extérieur sur la gaine en nylon et le faisceau de fils. Placez un morceau de trois centimètres de grande gaine rétractable sur la gaine en caoutchouc et fixez-la. Ajoutez deux morceaux de gaine thermorétractable d’un centimètre de long sur la gaine métallique non étirée à des distances de 20 et 24 centimètres de la prise.

Pour commencer, assemblez tous les faisceaux de câbles nécessaires à la procédure. Après avoir positionné le lapin anesthésié, faites quatre petites marques à l’aide d’un marqueur de pointe stérile aux sites de placement de l’électrocardiogramme ou de l’électrode ECG prévus. Faites une incision longitudinale de 2,5 à 3,5 centimètres sur le flanc droit du lapin.

À l’aide d’hémostats, effectuez une dissection ventrale pour créer une poche sous-cutanée, en veillant à ce que la poche s’étende jusqu’aux quatre endroits marqués. À l’aide de l’extrémité sans aiguille de la suture monofilament 3-0, faites trois séries de nœuds chirurgicaux autour de la base de l’électrode ECG. Passez l’aiguille attachée à l’électrode ECG à travers la poche sous-cutanée et ressortez à l’endroit marqué correspondant.

Appliquez une traction douce pour positionner l’électrode ECG à l’endroit marqué. Relâchez la traction et palpez la zone pour vérifier que l’électrode reste en place. Pour fixer l’électrode, passez la suture et l’aiguille du monofilament 3-O à travers la peau du lapin adjacente au site de sortie de l’électrode.

Tirez la suture partiellement à travers la peau et faites un nœud chirurgical standard. À partir de l’incision sur le flanc du lapin, disséquez brusquement vers l’angle inférieur des omoplates, puis vers la base de la tête. Après avoir mis le lapin en position couchée, utilisez un marqueur de pointe stérile pour placer cinq petits points aux sites de placement de l’électroencéphalogramme ou de l’électrode EEG prévus.

Faites une petite incision transversale sur la tête mesurant 1,5 centimètres entre les faces antérieures de la base des oreilles. Franchement, disséquez caudalement et crânienne à partir de l’incision jusqu’à ce qu’une poche sous-cutanée se forme. Insérez de grandes pinces dans l’incision sur le flanc avant d’ouvrir la pince et de soulever la peau à l’endroit marqué pour le port.

Utilise un outil de biopsie à l’emporte-pièce de six millimètres pour créer un trou circulaire au site marqué. Après avoir recouvert la fiche de fil avec du plastique ou du caoutchouc, poussez le côté de la fiche de l’orifice à travers le trou fait par la biopsie à l’emporte-pièce. Ensuite, appuyez sur la peau jusqu’à la base du port pour qu’elle soit tendue.

Placez un joint en caoutchouc sur le port et poussez-le vers le bas jusqu’à ce qu’il affleure la peau. Rentrez l’excédent de fil dans la poche sous-cutanée à l’arrière et sur le flanc. Maintenant, rapprochez doucement la peau et fermez tous les sites d’incision à l’aide de simples points de suture interrompus.

Appliquez un mélange acrylique à l’extérieur du port, créant un petit dôme qui scelle le site du port à la peau. Une fois que l’acrylique s’est solidifié, placez de la gaze stérile sur le site d’incision sur le flanc et enveloppez sans serrer le lapin avec un film vétérinaire. Passez le faisceau de câbles à travers un trou situé en haut au centre de la cage du lapin.

Branchez les connecteurs DIN dans l’appareil de surveillance approprié et fixez un câble d’enrouleur en haut à l’intérieur de la cage, près du trou pour le faisceau de câbles. Étendez le fil du câble de l’enrouleur qui a une pince en plastique à l’extrémité et fixez la pince au faisceau de câbles à l’endroit situé entre les deux pièces de la gaine thermorétractable. Enfin, connectez la fiche du faisceau de câbles à la prise sur le dos du lapin et enregistrez le signal de l’appareil de surveillance.

Des signaux EEG et ECG stables ont été enregistrés chez un lapin de trois mois à l’aide d’électrodes implantées de manière chronique qui ont conservé leur positionnement sans rejet ni infection. On a observé que les données à haute résolution de la variabilité de la fréquence cardiaque et les mesures cardiaques défilaient toutes les 30 minutes. Les signaux EEG et ECG capturés pendant le toilettage ont démontré une stabilité robuste du signal malgré les mouvements du lapin, maintenant une qualité de signal élevée pour l’analyse.

L’administration de médicaments pro-convulsivants a induit des éclats thêta distincts dans les dérivations EEG occipitales, qui ont été enregistrées en même temps que les signaux ECG normaux du rythme sinusal. Des doses plus élevées de pro-convulsivant ont déclenché des convulsions, l’EEG montrant des éclats de thêta préictal, des artefacts chroniques et des signaux de période tonique ictale. L’ECG a mis en évidence des anomalies de l’onde T indiquant une hypoxie pendant la période tonique ictale, revenant à la normale pré-ictale après la crise.