Name: Modèle 2.5D pour la caractérisation mécanique ex vivo de l’angiogenèse germinative dans les tissus vivants (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-02-28T13:10:00.000+00:00
Duration: 10 min
Description: Découvrez la microscopie de force de traction pour caractériser la mécanique cellulaire lors de l'angiogenèse germinative dans un modèle 2.5D ex vivo utilisant des artères carotidiennes porcines. Cette méthode avance la médecine régénérative.

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<meta charset="utf8"></head><body>Modèle 2.5D polyvalent pour l’analyse de la germination cellulaire dans les artères porcines

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<li>Kapoor, A., Chen, C. G., Iozzo, R. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simplified+aortic+ring+assay%3A+A+useful+ex+vivo+method+to+assess+biochemical+and+functional+parameters+of+angiogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Matrix+Biol+Plus%22%5BJournal%5D)">A simplified aortic ring assay: A useful ex vivo method to assess biochemical and functional parameters of angiogenesis.</a> Matrix Biol Plus. 6-7, 100025(2020).</li>
<li>Stiffey-Wilusz, J., Boice, J. A., Ronan, J., Fletcher, A. M., Anderson, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+ex+vivo+angiogenesis+assay+utilizing+commercial+porcine+carotid+artery%3A+Modification+of+the+rat+aortic+ring+assay%5BTitle%5D)+AND+%22Angiogenesis%22%5BJournal%5D)">An ex vivo angiogenesis assay utilizing commercial porcine carotid artery: Modification of the rat aortic ring assay.</a> Angiogenesis. 4 (1), 3-9 (2001).</li>
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</ol>

<table><tbody><tr><td>2 % bis-acrylamide</td><td></td><td>Bio-Rad</td><td>1610143</td></tr><tr><td>2-mercaptoéthanol</td><td></td><td>Merck Life Science</td><td>60-24-2</td></tr><tr><td>3-(Trimethoxysilyl)propyl méthacrylate</td><td>Bind-Silane</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>440159-100ML</td></tr><tr><td>40 % acrylamide</td><td></td><td>Bio-Rad</td><td>1610140</td></tr><tr><td>Aboslute éthanol (pour analyse)</td><td></td><td>VWR International</td><td>1.00983.1000</td></tr><tr><td>Éthanol absolu (industriel)</td><td></td><td>VWR International</td><td>83813.41</td></tr><tr><td>Acide acétique, glacial 100 %</td><td></td><td>Merck</td><td>1000562500</td></tr><tr><td>Persulfate d’ammonium</td><td>APS</td><td>Bio-Rad</td><td>7727-54-0</td></tr><tr><td>anticorps (primaire) - calponine</td><td></td><td>ABCAM</td><td>AB46794</td></tr><tr><td>anticorps (primaire) - CD31</td><td></td><td>Serotec</td><td>MCA1746</td></tr><tr><td>anticorps (primaire) - &alpha ;-action musculaire lisse</td><td>&alpha ;SMA</td><td>Dako</td><td>M0851</td></tr><tr><td>anticorps (secondaire) - chèvre-anti-souris-IgG1 Alexa 488</td><td></td><td>Sondes moléculaires</td><td>A21121</td></tr><tr><td>anticorps (secondaire) - chèvre-anti-souris-IgG2a Alexa 555</td><td></td><td>Sondes moléculaires</td><td>A21137</td></tr><tr><td>anticorps (secondaire) - chèvre-anti-lapin-IgG Alexa 555</td><td></td><td>Sondes moléculaires</td><td>A21428</td></tr><tr><td>Autoclave</td><td></td><td>Astell</td><td></td></tr><tr><td>Chlorure de calcium dihydraté</td><td>CaCl2</td><td>Calbiochem</td><td>208291-250GM</td></tr><tr><td>Collagène de type I, queue</td><td></td> de rat <td>Corning</td><td>354236</td></tr><tr><td>Collagène de type IV, placenta</td><td></td> humain <td>Merck Life Science</td><td>C5533-5MG</td></tr><tr><td>Milieu de croissance des cellules endothéliales Milieu</td><td>ECG</td><td>Promocell</td><td>C-22111</td></tr><tr><td>Pince à épiler à bout rond revêtue d’expoxy</td> Pince <td>à épiler fine</td><td>Rubis Pinzette</td><td>E78144-2A</td></tr><tr><td>Marqueur fluorescent, rouge</td><td></td> foncé <td>Invitrogen</td><td>F8807</td></tr><tr><td>Lamelles en verre, & Oslash ; 13 mm, #1</td><td></td><td>Epredia</td><td>CB00130RA120MNZ0</td></tr><tr><td>Lamelles en verre, & Oslash ; 13 mm, #1.5</td><td></td><td>Epredia</td><td>CB00120RAC20MNZ0</td></tr><tr><td>Chlorhydrate d’acide, 25 %</td> <td>HCl</td><td>Merck</td><td>1.100316.1000</td></tr><tr><td>Tampon Krebs-Henseleit</td><td>Microscope Sigma-Aldrich</td><td>K3753</td>, logiciel Leica Application Suite X, version 3.5.7.23225 Microscope Leica Microsystems, microscope épifluorescent Leica DMi8 Leica Microsystems <td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Microscope, Nikon Ti2 Eclipse</td><td></td> Microscope <td>Nikon</td><td></td></tr><tr><td>, NIS-Elements AR software</td><td></td><td>Nikon</td><td></td></tr><tr><td>N,N,N',N'-tétraméthyléthane-1,2-diamine</td><td>TEMED</td><td>Merck Life Science</td><td>110-18-9</td></tr><tr><td>Bouteille</td><td></td> Nalgene <td>Thermo Scientific</td><td>2187-0016</td></tr><tr><td>Aiguille, 21Gx1"</td><td></td><td>Henke Sass Wolf</td><td>HK4710008025</td></tr><tr><td>Sérum normal de chèvre</td><td></td><td>Gibco</td><td>10098792</td></tr><tr><td>Chlorhydrate</td><td></td> de papavérine <td>Sigma</td><td>61-25-6</td></tr><tr><td>Pénicilline/Streptomyocine (10 000 U/mL)</td><td>P/S</td><td>Gibco</td><td>15140163</td></tr><tr><td>Boîte de Pétri, grande (145x20mm)</td><td></td><td>Greiner Bio-one</td><td>639160</td></tr><tr><td>Boîte de Pétri, petite (60x15mm)</td><td></td><td>Greiner Bio-one</td><td>628160</td></tr><tr><td>Saline tamponnée au phosphate</td><td>PBS</td><td>Sigma</td><td>P4417</td></tr><tr><td>Pluronic F-127</td><td></td><td>Merck Life Science</td><td>P2443-250G</td></tr><tr><td>Aiguille de ponction, pointe</td><td></td> fermée <td>pointue inconnue</td><td></td></tr><tr><td>Scalpel, n° 4</td><td></td><td>Swann-Morton</td><td></td></tr><tr><td>Hydrogénocarbonate de sodium</td><td>NaHCO3</td><td>VWR International</td><td>144-55-8</td></tr><tr><td>sulfosuccinimidyl 6-(4'-azido-2'-nitrophenylamino)hexanoate</td><td>Sulfo-SANPAH</td><td>Thermo Scientific</td><td>22589</td></tr><tr><td>Lame chirurgicale, n° 20</td><td></td><td>Swann-Morton</td><td></td></tr><tr><td>Drap</td><td></td> chirurgical <td>Foliodrape</td><td>2775001</td></tr><tr><td>Pince à épiler</td><td></td><td>chirurgicale Lettix</td><td>400024</td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td></td><td>Merck</td><td>9036-19-5</td></tr><tr><td>Lampe UV</td><td></td><td>Analytik Jena</td><td>95-0042-13&nbsp ;</td></tr><tr><td>plaque de puits, 96 puits, fond</td><td></td> F <td>Greiner Bio-one</td><td>655180</td></tr><tr><td>plaque de puits, fond de verre 12 puits</td><td></td><td>MatTek</td><td>P12G-0-14-F</td></tr></tbody></table>

modèle 2.5d pour la caractérisation mécanique ex vivo de l’angiogenèse germinative dans les tissus vivants

2.5D Model for Ex Vivo Mechanical Characterization of Sprouting Angiogenesis in Living Tissue

Modèle 2.5D pour la caractérisation mécanique ex vivo de l’angiogenèse germinative dans les tissus vivants

Sprouting angiogenesis is the formation of new blood vessels from pre-existing vasculature and is of great importance for physiological such as tissue ...

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Biology

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Les progéniteurs endothéliaux dérivés de cellules souches pluripotentes induites (iPS-EP) ont le potentiel de révolutionner les traitements des maladies cardiovasculaires et de permettre la création de modèles de maladies cardiovasculaires plus fidèles. Ici, l'encapsulation des iPSC-EPs dans les microenvironnements tridimensionnels (3D) de collagène et une analyse quantitative du potentiel vasculogenic de ces cellules sont décrites.

Un modèle 3D in vitro et un pipeline computationnel pour quantifier le potentiel vasculogénique des progéniteurs endothéliaux dérivés de l'iPSC

Cette méthode décrit la culture des cellules endothéliales dérivées de l'iPSC comme 40 microvaisseaux 3D perfusés dans une plate-forme microfluidique normalisée. Cette plate-forme permet l'étude de la germination angiogénique à gradient en 3D, y compris l'anastomose et la stabilisation des germes angiogéniques d'une manière évolutive et à haut débit.

Test standardisé et évolutif pour étudier perfused 3D Angiogenic Sprouting of iPSC-derived Endothelial Cells In Vitro

Ici, nous fournissons une puce microfluidique et un système microfluidique de circulation automatiquement contrôlé et très efficace qui récapitule le microenvironnement initial de la néovascularisation, permettant aux cellules endothéliales (CE) d'être stimulées simultanément par un stress de cisaillement luminal élevé, un niveau physiologique de flux transendothelial et diverses distributions simultanées du facteur de croissance endothéliale vasculaire (VEGF).

Modèle microfluidique pour imiter l&apos;événement initial de la néovascularisation

Ce test utilise des cellules souches embryonnaires de souris différenciées en corps embryoïdes cultivés dans un gel de collagène 3D pour analyser les processus biologiques qui contrôlent la germination de l’angiogenèse in vitro. La technique peut être appliquée pour tester des médicaments, modéliser des maladies et étudier des gènes spécifiques dans le contexte de délétions mortelles pour les embryons.

In vitro Essai tridimensionnel de germination de l’angiogenèse à l’aide de cellules souches embryonnaires de souris pour la modélisation de maladies vasculaires et l’analyse de médicaments

Cette étude présente le test de migration bidimensionnel (2D) et le test de germination de sphéroïdes tridimensionnel (3D), ainsi que leurs méthodes d’analyse respectives en aval, y compris l’extraction d’ARN et l’immunocytochimie, comme des tests appropriés pour étudier l’angiogenèse in vitro.

Étude de l’angiogenèse aux niveaux fonctionnel et moléculaire en exploitant le test de migration des plaies par égratignures et le test de germination des sphéroïdes

Christopher Hughes CW décrit l'utilité de son système de culture pour étudier l'angiogenèse in vitro. Il explique l'importance des fibroblastes qui sécrètent une critique, encore non identifiés, facteur soluble qui permettent aux cellules endothéliales pour former des vaisseaux dans la culture de cette branche, la forme correcte lumens, et subissent anastomose.

Christopher Hughes: un modèle in vitro pour l&#39;étude de l&#39;angiogenèse (Interview)

Un nouveau système in vitro pour charger simultanément quatre tendons dans la culture est décrite.

Ex vivo Chargement mécanique du tendon

Utiliser Micro-Electro-Mechanical Systems (MEMS) pour développer des outils diagnostiques

La rigidité de la matrice extracellulaire influence fortement les comportements multiples de cellules adhérentes. Matrice de rigidité varie spatialement à travers un tissu, et subit des modifications dans les diverses maladies. Ici, nous développons des méthodes pour caractériser les variations spatiales de la rigidité dans le tissu pulmonaire normal de la souris et fibrotiques utilisant la microscopie à force atomique microindentation.

Micro-Mécanique de caractérisation du tissu pulmonaire par microscopie à force atomique

Ici, nous présentons un protocole basé sur la détection immunohistologique de la protéine c-FOS, une technique classique utilisée pour l’identification de populations neuronales impliquées dans des réponses physiologiques spécifiques in vivo et ex vivo.

La protéine c-FOS détection immunohistologique: Un outil utile comme marqueur des voies centrales impliquées dans les réponses physiologiques spécifiques<em&gt; In Vivo</em&gt; et<em&gt; Ex Vivo</em

Découvrez la microscopie de force de traction pour caractériser la mécanique cellulaire lors de l'angiogenèse germinative dans un modèle 2.5D ex vivo utilisant des artères carotidiennes porcines. Cette méthode avance la médecine régénérative.

Modèle 2.5D pour la caractérisation mécanique ex vivo de l’angiogenèse germinative dans les tissus vivants

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