Name: Évaluation de la phagocytose microgliale des débris de myéline in vitro sous stimulation magnétique répétée (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-17T13:20:00.000+00:00
Duration: 8 min 34 s
Description: Découvrez l'évaluation de la phagocytose microgliale des débris de myéline in vitro sous stimulation magnétique répétée. Cette méthode permet d'étudier les effets neuroprotecteurs et la réparation neuronale.

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<li>Qin, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Repetitive+transcranial+magnetic+stimulation+ameliorates+cognitive+deficits+in+mice+with+radiation-induced+brain+injury+by+attenuating+microglial+pyroptosis+and+promoting+neurogenesis+via+BDNF+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Comm+Signal%22%5BJournal%5D)">Repetitive transcranial magnetic stimulation ameliorates cognitive deficits in mice with radiation-induced brain injury by attenuating microglial pyroptosis and promoting neurogenesis via BDNF pathway.</a> Cell Comm Signal. 22 (1), 216(2024).</li>
<li>Qian, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microglia+and+astrocytes+responses+contribute+to+alleviating+inflammatory+damage+by+repetitive+transcranial+magnetic+stimulation+in+rats+with+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Neurochem+Res%22%5BJournal%5D)">Microglia and astrocytes responses contribute to alleviating inflammatory damage by repetitive transcranial magnetic stimulation in rats with traumatic brain injury.</a> Neurochem Res. 49 (9), 2636-2651 (2024).</li>
<li>Luo, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Repetitive+transcranial+magnetic+stimulation+improves+neurological+function+and+promotes+the+anti-inflammatory+polarization+of+microglia+in+ischemic+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Repetitive transcranial magnetic stimulation improves neurological function and promotes the anti-inflammatory polarization of microglia in ischemic rats.</a> Front Cell Neurosci. 16, 878345(2022).</li>
<li>Jannati, A., Oberman, L. M., Rotenberg, A., Pascual-Leone, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+the+mechanisms+of+brain+plasticity+by+transcranial+magnetic+stimulation%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropsychopharmacol%22%5BJournal%5D)">Assessing the mechanisms of brain plasticity by transcranial magnetic stimulation.</a> Neuropsychopharmacol. 48 (1), 191-208 (2023).</li>
<li>Luo, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intermittent+theta-burst+stimulation+improves+motor+function+by+inhibiting+neuronal+pyroptosis+and+regulating+microglial+polarization+via+TLR4%2FNF%CE%BAB%2FNLRP3+signaling+pathway+in+cerebral+ischemic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neuroinflammat%22%5BJournal%5D)">Intermittent theta-burst stimulation improves motor function by inhibiting neuronal pyroptosis and regulating microglial polarization via TLR4/NFκB/NLRP3 signaling pathway in cerebral ischemic mice.</a> J Neuroinflammat. 19 (1), 141(2022).</li>
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<li>Norton, W. T., Poduslo, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myelination+in+rat+brain%3A+Method+of+myelin+isolation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurochem%22%5BJournal%5D)">Myelination in rat brain: Method of myelin isolation.</a> J Neurochem. 21 (4), 749-757 (1973).</li>
<li>Gordon, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phagocytosis%3A+An+immunobiologic+process%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">Phagocytosis: An immunobiologic process.</a> Immunity. 44 (3), 463-475 (2016).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Milieu de montage anti-décoloration avec DAPI</td><td>Beyotime, Chine</td><td>P0131</td><td></td></tr><tr><td>BCA</td><td>Kit ThermoFisher Scientific, Amérique</td><td>23227</td><td></td></tr><tr><td>Bv-2 cellule</td><td>ATCC</td><td>CBP60922</td><td></td></tr><tr><td>Culture cellulaire 12 puits</td><td>Plaques Biofil, Chine</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Culture cellulaire 24 puits</td><td>Biofil, Chine</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Balayage laser confocal Microscope</td><td>Zeiss, Allemagne</td><td>800</td><td></td></tr><tr><td>Incubateur à température constante</td><td>ThermoFisher Scientific, Amérique</td><td></td><td></td></tr><tr><td>CFSE</td><td>MedChemExpress, Amérique</td><td>HY-158820</td><td></td></tr><tr><td>DMEM-Culture medium</td><td>KeyGen, Chine</td><td>KGL1202-500</td><td></td></tr><tr><td>FBS</td><td>Gibco, Amérique</td><td>16250078</td><td></td></tr><tr><td>Iba1</td><td>Abcam, Amérique</td><td>ab48004</td><td></td></tr><tr><td>Appareil de stimulation magnétique</td><td>Yiruide, Chine</td><td>CCY-IA</td><td></td></tr><tr><td>Bobine de stimulation magnétique</td><td>Yiruide, Chine</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldéhyde</td><td>BioSharp, Chine</td><td></td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>KeyGen, Chine</td><td>KGL2210-500</td><td></td></tr><tr><td>Pénicilline-Streptomycine</td><td>Gibco, Amérique</td><td>15140-122</td><td></td></tr><tr><td>Saccharose</td><td>MedChemExpress, Amérique</td><td>HY-B1779</td><td></td></tr><tr><td>Trypsin</td><td>KeyGen, Chine</td><td>KGL2107-100</td><td></td></tr><tr><td>Ultracentrifugeuse</td><td>Beckman, Amérique</td><td>L-100XP</td><td></td></tr></tbody></table>

Évaluation de la phagocytose microgliale des débris de myéline in vitro sous stimulation magnétique répétée

Assessing Microglial Phagocytosis of Myelin Debris in vitro Under Repeated Magnetic Stimulation

Dans cette étude, nous avons d’abord nourri des cellules microgliales BV-2 in vitro en extrayant des débris de myéline dérivés du cerveau et en utilisant une stimulation magnétique répétitive pour améliorer leur capacité phagocytaire. Par la suite, des cellules microgliales BV-2 ont été cultivées et soumises à une intervention LPS avant la stimulation magnétique, émulant ainsi l’état in vivo de la microglie sous une validation neurologique rigoureuse. Par la suite, une intervention rMS a été appliquée a...

Microglia, the resident phagocytes of the central nervous system (CNS), play a pivotal role in maintaining CNS integrity and homeostasis by removing ...

assessing-microglial-phagocytosis-myelin-debris-vitro-under-repeated

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Les microglies sont les macrophages résidents qui fournissent la première ligne de défense et de la surveillance immunitaire du système nerveux central. Les microARN sont des molécules régulatrices qui jouent un rôle important dans de nombreux processus physiologiques, y compris l'activation et la différenciation des macrophages. Dans cet article, nous décrivons la méthode de mesure des microARN dans la microglie.

Détection des microARN dans la microglie par PCR en temps réel dans le SNC normal et pendant neuroinflammation

Cette vidéo présente un protocole d’extraction de cellules microgliales à partir de lésions démyélinisantes dans le cerveau de souris à l’aide du tri cellulaire magnétique. Le protocole consiste à disséquer le tissu cérébral lésé contenant des cellules microgliales, à traiter le tissu avec des enzymes spécifiques pour obtenir une suspension unicellulaire et à utiliser des billes magnétiques spécifiques des récepteurs microgliaux pour isoler les cellules microgliales.

Isolement de la microglie à partir de lésions démyélinisantes du cerveau de souris à l’aide du tri cellulaire activé par magnétoscopie

Les microglies sont les cellules immunitaires résidentes du système nerveux central (SNC) avec une grande capacité à phagocyter ou engloutir matériau dans leur environnement extracellulaire. Ici, un test largement applicable, fiable et hautement quantitative pour la visualisation et la mesure de l'engloutissement de la microglie médiation de composants synaptiques est décrite.

Un enlisement test: Un protocole pour évaluer les interactions entre les neurones du système nerveux central et les phagocytes

phagocytose microgliale est essentiel pour le maintien de l'homéostasie tissulaire et la fonction phagocytaire insuffisante a été impliquée dans la pathologie. Cependant, l' évaluation de la fonction microglies in vivo est techniquement difficile. Nous avons mis au point une technique simple mais robuste pour surveiller et quantifier le potentiel phagocytaire de la microglie dans un cadre physiologique précisément.

Évaluation Retinal microglial phagocytaire Fonction<em&gt; In Vivo</em&gt; L&#39;utilisation d&#39;un test basé sur la cytométrie de flux

Nous présentons ici un protocole pour isoler microglies de souriceaux post - natal (jour 1) pour l' expérimentation in vitro. Cette méthode d'isolement improvisée génère à la fois un rendement et une pureté élevés, un avantage significatif par rapport aux méthodes de remplacement qui permet une expérimentation à large gamme pour les besoins de l'élucidation de la biologie de la microglie.

Rapide et raffiné CD11b Isolation magnétique de primaire microglies avec pureté améliorée et polyvalence

Nous présentons des méthodes pour évaluer la capacité phagocytaire des primaires macrophages dérivés de la moelle osseuse murines utilisant des débris de la myéline fluorescent étiquetés et coloration de gouttelettes de lipides intracellulaires.

In Vitro Phagocytose des débris de la myéline par les Macrophages dérivés de la moelle osseuse

Les maladies neurodégénératives sont associées à des fonctions microgliales dérégulées. Cet article décrit un test in vitro de phagocytose des cellules de neuroblastome par les macrophages iPSC. Les lectures de microscopie quantitative sont décrites à la fois pour l’imagerie time-lapse sur cellules vivantes et l’imagerie à haut contenu à cellules fixes.

Essai d’imagerie quantitative in vitro pour la phagocytose des cellules mortes du neuroblastome par iPSC-Macrophages

Les cultures primaires de microglies sont couramment utilisées pour évaluer de nouvelles molécules anti-inflammatoires. Le présent protocole décrit une méthode reproductible et pertinente pour isoler magnétiquement la microglie des nouveau-nés.

Isolement magnétique de cellules microgliales de souris nouveau-née pour des cultures de cellules primaires

Nous présentons ici un protocole pour isoler et purifier la microglie primaire dans des modèles animaux de maladies démyélinisantes, en utilisant le tri cellulaire activé magnétiquement en colonne.

Isolement de la microglie primaire de souris par tri cellulaire activé magnétiquement dans des modèles animaux de démyélinisation

Nous présentons ici deux protocoles pour quantifier l’engloutissement microglial des synapses vGLUT1-positives et des synaptosomes bruts marqués en rouge pHRodo à l’aide de la cytométrie en flux.

Quantification de l’engloutissement microglial du matériel synaptique à l’aide de la cytométrie en flux

Nous décrivons un protocole permettant d’isoler les cellules microgliales de l’hypothalamus de souris (ou de petites structures cérébrales équivalentes) en utilisant le tri cellulaire activé magnétiquement (MACS), dans un délai relativement court. La microglie hypothalamique triée par MACS peut être utilisée pour l’analyse ex vivo et peut être utilisée pour effectuer des essais in vitro .

Isolement de la microglie hypothalamique à partir du cerveau d’une souris adulte fraîchement perfusée par tri cellulaire activé par magnétisme  

Découvrez l'évaluation de la phagocytose microgliale des débris de myéline in vitro sous stimulation magnétique répétée. Cette méthode permet d'étudier les effets neuroprotecteurs et la réparation neuronale.

Évaluation de la phagocytose microgliale des débris de myéline in vitro sous stimulation magnétique répétée

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