Name: Isolement de populations de cellules myéloïdes et épithéliales vivantes à partir du poumon de souris (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-01-31T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 2 s
Description: Découvrez l'isolement de populations de cellules myéloïdes et épithéliales vivantes à partir du poumon de souris. Cette méthode permet d'étudier les mécanismes de réparation pulmonaire après infection virale.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>Isolement de cellules immunitaires et non immunitaires à partir de poumons de souris pour la cytométrie en flux

<ol><li>Wanner, A., Salathé, M., O'Riordan, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mucociliary+clearance+in+the+airways%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Crit+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Mucociliary clearance in the airways.</a> Am J Respir Crit Care Med. 154 (6), 1868-1902 (1996).</li>
<li>Mason, R. J., Williams, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Type+II+alveolar+cell.+Defender+of+the+alveolus%5BTitle%5D)+AND+%22Am+Rev+Respir+Dis%22%5BJournal%5D)">Type II alveolar cell. Defender of the alveolus.</a> Am Rev Respir Dis. 115 (1), 81-91 (1977).</li>
<li>Fehrenbach, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alveolar+epithelial+type+II+cell%3A+defender+of+the+alveolus+revisited%5BTitle%5D)+AND+%22Respir+Res%22%5BJournal%5D)">Alveolar epithelial type II cell: defender of the alveolus revisited.</a> Respir Res. 2 (1), 33-46 (2001).</li>
<li>Basil, M. C., Alysandratos, K. -D., Kotton, D. N., Morrisey, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lung+repair+and+regeneration%3A+Advanced+models+and+insights+into+human+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Lung repair and regeneration: Advanced models and insights into human disease.</a> Cell Stem Cell. 31 (4), 439-454 (2024).</li>
<li>Hussell, T., Bell, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alveolar+macrophages%3A+plasticity+in+a+tissue-specific+context%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Immunol%22%5BJournal%5D)">Alveolar macrophages: plasticity in a tissue-specific context.</a> Nat Rev Immunol. 14 (2), 81-93 (2014).</li>
<li>Gschwend, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alveolar+macrophages+rely+on+GM-CSF+from+alveolar+epithelial+type+2+cells+before+and+after+birth%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Alveolar macrophages rely on GM-CSF from alveolar epithelial type 2 cells before and after birth.</a> J Exp Med. 218 (1), e20210745(2021).</li>
<li>Gillich, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Capillary+cell-type+specialization+in+the+alveolus%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Capillary cell-type specialization in the alveolus.</a> Nature. 586 (7831), 785-789 (2020).</li>
<li>Schyns, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-classical+tissue+monocytes+and+two+functionally+distinct+populations+of+interstitial+macrophages+populate+the+mouse+lung%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Non-classical tissue monocytes and two functionally distinct populations of interstitial macrophages populate the mouse lung.</a> Nat Commun. 10 (1), 3964(2019).</li>
<li>Chakarov, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two+distinct+interstitial+macrophage+populations+coexist+across+tissues+in+specific+subtissular+niches%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Two distinct interstitial macrophage populations coexist across tissues in specific subtissular niches.</a> Science. 363 (6432), eaat3773(2019).</li>
<li>Tsukui, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Collagen-producing+lung+cell+atlas+identifies+multiple+subsets+with+distinct+localization+and+relevance+to+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Collagen-producing lung cell atlas identifies multiple subsets with distinct localization and relevance to fibrosis.</a> Nat Commun. 11 (1), 1920(1920).</li>
<li>Aegerter, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influenza-induced+monocyte-derived+alveolar+macrophages+confer+prolonged+antibacterial+protection%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Immunol%22%5BJournal%5D)">Influenza-induced monocyte-derived alveolar macrophages confer prolonged antibacterial protection.</a> Nat Immunol. 21 (2), 145-157 (2020).</li>
<li>Johansson, C., Kirsebom, F. C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophils+in+respiratory+viral+infections%5BTitle%5D)+AND+%22Mucosal+Immunol%22%5BJournal%5D)">Neutrophils in respiratory viral infections.</a> Mucosal Immunol. 14 (4), 815-827 (2021).</li>
<li>Li, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monocyte-derived+alveolar+macrophages+autonomously+determine+severe+outcome+of+respiratory+viral+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Immunol%22%5BJournal%5D)">Monocyte-derived alveolar macrophages autonomously determine severe outcome of respiratory viral infection.</a> Sci Immunol. 7 (71), eabj5761(2022).</li>
<li>Moll, H. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+transplantation+of+syngeneic+lung+adenocarcinoma+cells+to+study+PD-L1+expression%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Orthotopic transplantation of syngeneic lung adenocarcinoma cells to study PD-L1 expression.</a> J Vis Exp. (143), e58101(2019).</li>
<li>Warshamana, G. S., Corti, M., Brody, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TNF-%CE%B1%2C+PDGF%2C+TGF-%CE%B21+expression+by+primary+mouse+bronchiolar-alveolar+epithelial+and+mesenchymal+cells%3A+TNF-%CE%B1+induces+TGF-%CE%B21%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Mol+Pathol%22%5BJournal%5D)">TNF-α, PDGF, TGF-β1 expression by primary mouse bronchiolar-alveolar epithelial and mesenchymal cells: TNF-α induces TGF-β1.</a> Exp Mol Pathol. 71 (1), 13-33 (2001).</li>
<li>Corti, M., Brody, A. R., Harrison, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+primary+culture+of+murine+alveolar+type+II+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Cell+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Isolation and primary culture of murine alveolar type II cells.</a> Am J Respir Cell Mol Biol. 14 (3), 309-315 (1996).</li>
<li>Quantius, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influenza+virus+infects+epithelial+stem%2Fprogenitor+cells+of+the+distal+lung%3A+Impact+on+Fgfr2b-driven+epithelial+repair%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathog%22%5BJournal%5D)">Influenza virus infects epithelial stem/progenitor cells of the distal lung: Impact on Fgfr2b-driven epithelial repair.</a> PLoS Pathog. 12 (5), e1005544(2016).</li>
<li>Wu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcardiac+perfusion+of+the+mouse+for+brain+tissue+dissection+and+fixation%5BTitle%5D)+AND+%22BIO+Protoc%22%5BJournal%5D)">Transcardiac perfusion of the mouse for brain tissue dissection and fixation.</a> BIO Protoc. 11 (8), e3988(2021).</li>
<li>Morton, J., Snider, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guidelines+for+collection+and+processing+of+lungs+from+aged+mice+for+histological+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Pathobiol+Aging+Age+Relat+Dis%22%5BJournal%5D)">Guidelines for collection and processing of lungs from aged mice for histological studies.</a> Pathobiol Aging Age Relat Dis. 7 (1), 1313676(2017).</li>
<li>Bijgaart, R. J. E., van den Kong, N., Maynard, C., Plaks, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ex+vivo+live+imaging+of+lung+metastasis+and+their+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Ex vivo live imaging of lung metastasis and their microenvironment.</a> J Vis Exp. (108), e53741(2016).</li>
<li>Shi, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+purification+of+immune+cells+from+the+liver%5BTitle%5D)+AND+%22Int+Immunopharmacol%22%5BJournal%5D)">Isolation and purification of immune cells from the liver.</a> Int Immunopharmacol. 85, 106632(2020).</li>
<li>Short, K. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influenza+virus+damages+the+alveolar+barrier+by+disrupting+epithelial+cell+tight+junctions%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Respir+J%22%5BJournal%5D)">Influenza virus damages the alveolar barrier by disrupting epithelial cell tight junctions.</a> Eur Respir J. 47 (3), 954-966 (2016).</li>
<li>Laidlaw, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD4%2B+T+cell+help+guides+formation+of+CD103%2B+lung-resident+memory+CD8%2B+T+cells+during+influenza+viral+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">CD4+ T cell help guides formation of CD103+ lung-resident memory CD8+ T cells during influenza viral infection.</a> Immunity. 41 (4), 633-645 (2014).</li>
<li>D'Agostino, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+for+isolation+and+characterization+of+lung+tissue-resident+memory+T+cells+and+airway-trained+innate+immunity+after+intranasal+vaccination+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Protocol for isolation and characterization of lung tissue-resident memory T cells and airway-trained innate immunity after intranasal vaccination in mice.</a> STAR Protoc. 3 (2), 101652(2022).</li>
<li>Waal, A. M., de Hiemstra, P. S., Ottenhoff, T. H., Joosten, S. A., vander Does, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lung+epithelial+cells+interact+with+immune+cells+and+bacteria+to+shape+the+microenvironment+in+tuberculosis%5BTitle%5D)+AND+%22Thorax%22%5BJournal%5D)">Lung epithelial cells interact with immune cells and bacteria to shape the microenvironment in tuberculosis.</a> Thorax. 77 (4), 408-416 (2022).</li>
<li>Bhattacharya, J., Westphalen, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macrophage-epithelial+interactions+in+pulmonary+alveoli%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Immunopathol%22%5BJournal%5D)">Macrophage-epithelial interactions in pulmonary alveoli.</a> Semin Immunopathol. 38 (4), 461-469 (2016).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Seringue de 1 mL avec embout coulissant</td><td>VWR</td><td>BD309659</td><td></td></tr><tr><td>Tube de microcentrifugation de 1,7 mL</td><td>DOT Scientific</td><td>RN1700-GMT</td><td></td></tr><tr><td>Pipettes de 10 mL (jetables)</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-567-603</td><td></td></tr><tr><td>Seringue de 10 mL avec embout BD Luer-Lok VWR</td><td></td><td>75846-756</td><td></td></tr><tr><td>123 unités eBeads Tiges de comptage</td><td>Thermo Scientific</td><td>01-1234-42</td><td></td></tr><tr><td>Pipette 12 canaux (30-300ul)</td><td>USA Scientific&nbsp ;</td><td>7112-3300</td><td></td></tr> Aiguilles <tr><td>16 % paraformaldéhyde</td><td>VWR</td><td>100503-917</td><td></td></tr><tr><td>Aiguille 23 G avec biseau régulier</td><td>VWR</td><td>305194</td><td></td></tr><tr><td>27 G Pipettes</td><td>VWR</td><td>BD305109</td><td></td></tr><tr><td>5 mL (jetables)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>170373</td><td></td></tr><tr><td>50 mL tubes à centrifuger</td><td>Olympus&nbsp ;</td><td>28-108</td><td></td></tr><tr><td>Plaque inférieure ronde à 96 puits</td><td>Corning</td><td>3797</td><td></td></tr><tr><td>Tampon de lyse ACK</td><td>Gibco</td><td>A100492-01</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488 anti-souris CD11c</td><td>BioLegend</td><td>117311</td><td></td></tr><tr><td>Anti-F4/80 Anticorps monoclonal de rat (PE (Phycoérythrine)/Cy7)</td><td>BioLegend</td><td>123114</td><td></td></tr><tr><td>APC anti-souris CD64 (Fc&gamma ; RI)</td><td>BioLegend</td><td>139306</td><td></td></tr><tr><td>APC/Cyanine7 anti-souris CD45</td><td>BioLegend</td><td>103115</td><td></td></tr><tr><td>BD Insyte Autoguard Cathéters IV blindés</td><td>VWR</td><td>381423</td><td></td></tr><tr><td>Brilliant Violet 421 anti-souris I-A/I-E (MHC-II)</td><td>BioLegend</td><td>107632</td><td></td></tr><tr><td>Brilliant Violet 421 anti-souris/humain CD11b</td><td>BioLegend</td><td>101235</td><td></td></tr><tr><td>Brilliant Violet 605 anti-souris Ly-6C</td><td>BioLegend</td><td>128036</td><td></td></tr><tr><td>Brilliant Violet 711 anti-souris CD45</td><td>BioLegend</td><td>103147</td><td></td></tr><tr><td>souris C57BL/6J&nbsp ;</td><td>Jackson Laboratories</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cd140a (PDGFRA) Anticorps monoclonal (APA5), PE-Cyanine7, eBioscience</td><td>Life Technologies</td><td>25-1401-82</td><td></td></tr><tr><td>CD170 (Siglec F) Anticorps monoclonal (1RNM44N), PE</td><td>Life Technologies</td><td>12170280</td><td></td></tr><tr><td>Filtres cellulaires</td><td>Corning</td><td>352350</td><td></td></tr><tr><td>Centrifugeuse</td><td>Eppenodorf</td><td>5910R</td><td></td></tr><tr><td>Désoxyribonucléase I du pancréas bovin (DNase)</td><td>Millipore Sigma</td><td>DN25-100MG</td><td>Reconstitué à 20 mg/mL dans le DPBS sous forme de solution mère stockée à -20 &deg ; C</td></tr><tr><td>Dispase</td><td>VWR</td><td>76176-668</td><td>Décongelé une fois et stocké sous forme d’aliquotes de 1 mL à -20 &deg ; C</td></tr><tr><td>Pince à dissection (Dumont #7)</td><td>Fine Science Tools</td><td>11297-00</td><td></td></tr><tr><td>Ciseaux de dissection</td><td>Fine Science Tools</td><td>14060-09</td><td></td></tr><tr><td>DPBS</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>14190250</td><td></td></tr><tr><td>eBioscience kit de fixation</td><td>Life Technologies</td><td>00-5523-00</td><td></td></tr><tr><td>EDTA</td><td>Life Technologies</td><td>AM9260G</td><td></td></tr><tr><td>Éthanol</td><td>VWR</td><td>TX89125170HU</td><td></td></tr><tr><td>FBS</td><td>GeminiBio</td><td>100-106</td><td>Décongelé une fois et inactivé thermiquement avant un stockage à long terme sous forme d’aliquotes à -20 &deg ; C</td></tr><tr><td>FITC anti-souris CD31</td><td>Anticorps BioLegend</td><td>102406</td><td></td></tr><tr><td>Gibco RPMI 1640 Moyen</td><td>Fisher Scientific</td><td>11-875-093</td><td></td></tr><tr><td>Lames de verre</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-552-3</td><td></td></tr><tr><td>réservoir gradué</td><td>USA Scientific&nbsp ;</td><td>1930-2235</td><td></td></tr><tr><td>Seau à glace</td><td>Corning</td><td>432128</td> injection d’hydrocholoride <td></td></tr><tr><td>de kétamine (100 mg/mL)</td><td>Le mélange d’euthanasie de</td><td>kétamine et de xyalazine peut être conservé à 30 mg/mL de chlorhydrate de kétamine et 4,5 mg/mL de xylazine dans un DPBS stérile jusqu’à un mois.</td><td></td></tr><tr><td>Liberase</td><td>Millipore Sigma</td><td>5401119001</td><td>reconstituée à 5 mg/mL dans le DPBS sous forme de solution mère stockée à -20 &deg ; C</td></tr><tr><td>Couvercles pour plaques à 96 puits</td><td>Fisher Scientific</td><td>07-201-731</td><td></td></tr><tr><td>Incubateur orbital Shaker</td><td>Barnstead Lab-Line</td><td>SHKE4000</td><td></td></tr><tr><td>pipette p1000</td><td>Eppenodorf</td><td>3123000063</td><td></td></tr><tr><td>p1000</td><td>tips USA Scientific&nbsp ;</td><td>1122-1830</td><td></td></tr><tr><td>p200 pipette</td><td>Eppenodorf</td><td>3123000055</td><td></td></tr><tr><td>p200 pointes</td><td>USA Scientific&nbsp ;</td><td>1110-1700</td><td></td></tr><tr><td>PE anti-souris CD326 (Ep-CAM)</td><td>BioLegend</td><td>118206</td><td></td></tr><tr><td>PerCP/Cyanine5.5 anti-souris CD104 Anticorps</td><td>BioLegend</td><td>123614</td><td></td></tr><tr><td>PerCP/Cyanine5.5 anti-souris Ly-6G</td><td>BioLegend</td><td>127616</td><td></td></tr><tr><td>Pipet-Aid&nbsp ;</td><td>Drummond</td><td>4-000-101</td><td></td></tr><tr><td>Anti-souris CD16/32 </td><td>BioLegend</td><td>101302</td><td>Appelé « Fc block » dans le texte </td></tr><tr><td>Flacon pulvérisateur</td><td>VWR</td><td>23609-182</td><td></td></tr><tr><td>Suture (Taille 2-0)</td><td>VWR</td><td>100190-026</td><td></td></tr><tr><td>Sous-tapis</td><td>VWR</td><td>56617-014</td><td></td></tr><tr><td>Xysed (xylazine 100mg/mL)</td><td>Pivetal</td><td></td><td>Voir les notes sur l’hydrocholoride de kétamine ci-dessus.</td></tr><tr><td>Zombie Aqua Kit de viabilité fixable</td><td>BioLegend</td><td>423102</td><td></td></tr></tbody></table>

isolement de populations de cellules myéloïdes et épithéliales vivantes à partir du poumon de souris

Isolation of Live Myeloid and Epithelial Cell Populations from the Mouse Lung

Une digestion réussie se traduira par environ 20 à 25 millions de cellules avec une viabilité de 90 à 95 %. Si l’on ajoute environ 25 000 billes de comptage à une fraction de 8 % du poumon, les billes devraient compromettre 1 à 3 % des événements collectés. Après le gate sur les singulets, environ 90 % à 95 % des cellules doivent être négatives pour Zombie Aqua (indiquant la viabilité) (Figure 2A, Figure 3A).
Parmi les cellules CD45<s...

Isolement de populations de cellules myéloïdes et épithéliales vivantes à partir du poumon de souris

The lung is continuously exposed to pathogens and other noxious environmental stimuli, rendering it vulnerable to damage, dysfunction, and the development ...

isolation-live-myeloid-epithelial-cell-populations-from-mouse

Research

Recherche

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologie et infection

Ici, nous décrivons un protocole pour l'isolement et la culture de cellules endothéliales murines pulmonaires. Cette méthode comprend mécanicien et dissociation enzymatique du tissu pulmonaire ainsi que d'un processus de purification en 2 étapes utilisant des anticorps anti-PECAM-1 et anti-ICAM-2 anticorps conjugués à des billes magnétiques, ce qui produit une population de cellules endothéliales pures d'origine essentiellement microvasculaires.

Isolement et culture de cellules endothéliales pulmonaires des souris néonatales

Dans cet article, nous démontrons l'isolement des souris des cellules pulmonaires souches résidentes mésenchymateuses (CSM poumons), leur expansion, la caractérisation et l'analyse des propriétés immunomodulatrices.

Isolement et caractérisation de Hoechst Faible CD45 Négatifs Souris Cellules souches mésenchymateuses du poumon

Une préparation hautement purifiée de cellules de souris pulmonaires dendritiques est décrite. Un accent particulier est donné à l'isolement de sous-ensemble de cellules dendritiques conventionnelles.

L&#39;isolement des cellules de souris poumon dendritiques

Nous décrivons l'isolement rapide des primaires murins cellules alvéolaires de type II épithéliales (AECII) par flux cytométrique sélection négative. Ceux-ci montrent AECII viabilité et à la pureté et conviennent à un large éventail d'études fonctionnelles et moléculaires concernant leur rôle dans les affections respiratoires comme les maladies auto-immunes ou infectieuses.

Isolation par cytométrie en flux des cellules primaires murins épithéliales alvéolaires de type II pour les études fonctionnelles et moléculaires

Cette vidéo présente une technique in vitro pour identifier les cellules immunitaires résidant dans les poumons murins. Après avoir isolé des cellules immunitaires cibles dans du tissu pulmonaire murin, elles sont marquées en surface à l’aide d’un cocktail d’anticorps marqués au fluorophore contre des marqueurs spécifiques sur les cellules immunitaires innées et adaptatives. De plus, les monocytes, les macrophages et les cellules dendritiques sont marqués à l’aide d’un marqueur intracellulaire.

Méthode in vitro pour identifier des cellules immunitaires innées et adaptatives résidant dans des poumons murins

Ce protocole décrit une technique d'isolation pour obtenir des cellules mésenchymateuses du stroma de séjour du poumon primaires de rats, par l'utilisation d'une digestion enzymatique, séparation par gradient de densité, l'adhérence plastique et CD146 + sélection de billes magnétiques.

Isolement de CD146<sup&gt; +</sup&gt; Cellules Resident pulmonaire mésenchymateuses stromales de Rat Poumons

Ce protocole décrit l’utilisation de la cytométrie en flux pour identifier les changements dans la composition des cellules immunitaires, le profil des cytokines et le profil de chimiokine dans l’environnement pulmonaire après une occlusion transitoire de l’artère cérébrale moyenne, un modèle murin d’AVC ischémique.

Caractérisation des cellules immunitaires et des médiateurs pro-inflammatoires en milieu pulmonaire

Cet article fournit une méthodologie détaillée pour les approches de dissociation tissulaire et de fractionnement cellulaire permettant l’enrichissement de cellules épithéliales viables à partir de régions proximales et distales du poumon humain. Ici, ces approches sont appliquées pour l’analyse fonctionnelle des cellules progénitrices épithéliales pulmonaires grâce à l’utilisation de modèles de culture d’organoïdes 3D.

Isolement et enrichissement des cellules progénitrices épithéliales pulmonaires humaines pour la culture organoïde

Dans cet article, des cellules endothéliales pulmonaires primaires ont été isolées et cultivées à partir de souris néonatales.

Isolement de cellules endothéliales pulmonaires primaires de souris

Le protocole décrit ci-dessous est un moyen simple et efficace d’isoler des cellules contenant des rétinoïdes dans des populations de cellules pulmonaires très hétérogènes en utilisant l’autofluorescence rétinoïde spécifique et en utilisant le tri cellulaire activé par fluorescence.

Isolement de cellules contenant des rétinoïdes pulmonaires par tri cellulaire

Ce protocole propose une méthode basée sur la cytométrie en flux pour isoler les cellules épithéliales alvéolaires de type II (AECII) viables à partir de poumons nouveau-néonaux, juvéniles ou adultes murins (infectés ou non). Cette approche permet d’étudier en aval des études moléculaires et/ou fonctionnelles de l’AECII pour identifier leur rôle lors de l’inflammation et des infections pulmonaires.

Isolement des cellules épithéliales alvéolaires de type II provenant de poumons murinaux néonatals, juvéniles et adultes adaptés aux contextes expérimentaux infectieux

Découvrez l'isolement de populations de cellules myéloïdes et épithéliales vivantes à partir du poumon de souris. Cette méthode permet d'étudier les mécanismes de réparation pulmonaire après infection virale.

Isolement de populations de cellules myéloïdes et épithéliales vivantes à partir du poumon de souris

Explorer plus de vidéos