Name: Cellules de crête neurale crânienne : protocole de différenciation in vitro tridimensionnelle pour le dosage multiplexé (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-02-14T14:40:00.000+00:00
Duration: 8 min 55 s
Description: Apprenez la différenciation des cellules de crête neurale crânienne à partir de cellules souches embryonnaires de souris en 3D. Ce protocole réduit la variabilité des neurosphères et permet des dosages multiplexés pour étudier le développement.

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<ol><li>Rothstein, M., Bhattacharya, D., Simoes-Costa, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+molecular+basis+of+neural+crest+axial+identity%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">The molecular basis of neural crest axial identity.</a> Dev Biol. 444, S170-S180 (2018).</li>
<li>Smeriglio, P., Zalc, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cranial+neural+crest+cells+contribution+to+craniofacial+bone+development+and+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Osteoporos+Rep%22%5BJournal%5D)">Cranial neural crest cells contribution to craniofacial bone development and regeneration.</a> Curr Osteoporos Rep. 21 (5), 624-630 (2023).</li>
<li>Zalc, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reactivation+of+the+pluripotency+program+precedes+formation+of+the+cranial+neural+crest%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Reactivation of the pluripotency program precedes formation of the cranial neural crest.</a> Science. 371 (6529), eabb4776(2021).</li>
<li>Perera, S. N., Kerosuo, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On+the+road+again%3A+Establishment+and+maintenance+of+stemness+in+the+neural+crest+from+embryo+to+adulthood%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">On the road again: Establishment and maintenance of stemness in the neural crest from embryo to adulthood.</a> Stem Cells. 39 (1), 7-25 (2021).</li>
<li>Nguyen, B. H., Ishii, M., Maxson, R. E., Wang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Culturing+and+manipulation+of+O9-1+neural+crest+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Culturing and manipulation of O9-1 neural crest cells.</a> J Vis Exp. (140), e58346(2018).</li>
<li>Ishii, M., Arias, A. C., Liu, L., Chen, Y. B., Bronner, M. E., Maxson, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+stable+cranial+neural+crest+cell+line+from+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+Dev%22%5BJournal%5D)">A stable cranial neural crest cell line from mouse.</a> Stem Cells Dev. 21 (17), 3069-3080 (2012).</li>
<li>Rada-Iglesias, A., Bajpai, R., Prescott, S., Brugmann, S. A., Swigut, T., Wysocka, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epigenomic+annotation+of+enhancers+predicts+transcriptional+regulators+of+human+neural+crest%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Epigenomic annotation of enhancers predicts transcriptional regulators of human neural crest.</a> Cell Stem Cell. 11 (5), 633-648 (2012).</li>
<li>Cederquist, G. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Specification+of+positional+identity+in+forebrain+organoids%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Specification of positional identity in forebrain organoids.</a> Nat Biotechnol. 37 (4), 436-444 (2011).</li>
<li>Rada-Iglesias, A., Bajpai, R., Swigut, T., Brugmann, S. A., Flynn, R. A., Wysocka, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+unique+chromatin+signature+uncovers+early+developmental+enhancers+in+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A unique chromatin signature uncovers early developmental enhancers in humans.</a> Nature. 470 (7333), 279-283 (2011).</li>
<li>Prescott, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhancer+divergence+and+cis-regulatory+evolution+in+the+human+and+chimp+neural+crest%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Enhancer divergence and cis-regulatory evolution in the human and chimp neural crest.</a> Cell. 163 (1), 68-83 (2015).</li>
<li>Chaddah, R., Arntfield, M., Runciman, S., Clarke, L., van der Kooy, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clonal+neural+stem+cells+from+human+embryonic+stem+cell+colonies%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Clonal neural stem cells from human embryonic stem cell colonies.</a> J Neurosci. 32 (23), 7771-7781 (2012).</li>
<li>Bajpai, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CHD7+cooperates+with+PBAF+to+control+multipotent+neural+crest+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">CHD7 cooperates with PBAF to control multipotent neural crest formation.</a> Nature. 463 (7283), 958-962 (2010).</li>
<li>Sipahi, R., Zupanc, G. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stochastic+cellular+automata+model+of+neurosphere+growth%3A+Roles+of+proliferative+potential%2C+contact+inhibition%2C+cell+death%2C+and+phagocytosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Theor+Biol%22%5BJournal%5D)">Stochastic cellular automata model of neurosphere growth: Roles of proliferative potential, contact inhibition, cell death, and phagocytosis.</a> J Theor Biol. 445, 151-165 (2018).</li>
<li>Mori, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+neurosphere+size+on+the+growth+rate+of+human+neural+stem%2Fprogenitor+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Res%22%5BJournal%5D)">Effect of neurosphere size on the growth rate of human neural stem/progenitor cells.</a> J Neurosci Res. 84 (8), 1682-1691 (2006).</li>
<li>Kress, C., Vandormael-Pournin, S., Baldacci, P., Cohen-Tannoudji, M., Babinet, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonpermissiveness+for+mouse+embryonic+stem+%28ES%29+cell+derivation+circumvented+by+a+single+backcross+to+129%2FSv+strain%3A+establishment+of+ES+cell+lines+bearing+the+Omd+conditional+lethal+mutation%5BTitle%5D)+AND+%22Mamm+Genome%22%5BJournal%5D)">Nonpermissiveness for mouse embryonic stem (ES) cell derivation circumvented by a single backcross to 129/Sv strain: establishment of ES cell lines bearing the Omd conditional lethal mutation.</a> Mamm Genome. 9 (12), 998-1001 (1998).</li>
<li>Simões-Costa, M., Bronner, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishing+neural+crest+identity%3A+a+gene+regulatory+recipe%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Establishing neural crest identity: a gene regulatory recipe.</a> Development. 142 (2), 242-257 (2015).</li>
<li>Memberg, S. P., Hall, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dividing+neuron+precursors+express+neuron-specific+tubulin%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Dividing neuron precursors express neuron-specific tubulin.</a> J Neurobiol. 27 (1), 26-43 (1995).</li>
<li>Kim, C. N., Shin, D., Wang, A., Nowakowski, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatiotemporal+molecular+dynamics+of+the+developing+human+thalamus%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Spatiotemporal molecular dynamics of the developing human thalamus.</a> Science. 382, eadf9941(2023).</li>
<li>Grimaldi, A., Comai, G., Mella, S., Tajbakhsh, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+bipotent+progenitors+that+give+rise+to+myogenic+and+connective+tissues+in+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22ELife%22%5BJournal%5D)">Identification of bipotent progenitors that give rise to myogenic and connective tissues in mouse.</a> ELife. 11, e70235(2022).</li>
<li>To, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+multiomic+atlas+of+human+early+skeletal+development%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A multiomic atlas of human early skeletal development.</a> Nature. 635 (8039), 657-667 (2024).</li>
<li>Bajpai, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+stages+of+rapid+and+uniform+neuralization+of+human+embryonic+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+Differ%22%5BJournal%5D)">Molecular stages of rapid and uniform neuralization of human embryonic stem cells.</a> Cell Death Differ. 16 (6), 807-825 (2009).</li>
<li>Kerosuo, L., Nie, S., Bajpai, R., Bronner, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Crestospheres%2C+Long-term+maintenance+of+multipotent%2C+premigratory+neural+crest+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Reports%22%5BJournal%5D)">Crestospheres, Long-term maintenance of multipotent, premigratory neural crest stem cells.</a> Stem Cell Reports. 5 (4), 499-507 (2015).</li>
<li>Abe, S., Yamaguchi, S., Sato, Y., Harada, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sphere-derived+multipotent+progenitor+cells+obtained+from+human+oral+mucosa+are+enriched+in+neural+crest+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Sphere-derived multipotent progenitor cells obtained from human oral mucosa are enriched in neural crest cells.</a> Stem Cells Transl Med. 5 (1), 117-128 (2016).</li>
<li>Jensen, J. B., Parmar, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strengths+and+limitations+of+the+neurosphere+culture+system%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Strengths and limitations of the neurosphere culture system.</a> Mol Neurobiol. 34 (3), 153-161 (2006).</li>
<li>Ziegler, L., Grigoryan, S., Yang, I. H., Thakor, N. V., Goldstein, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+generation+of+Schwann+cells+from+human+embryonic+stem+cell-derived+neurospheres%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Rev+Rep%22%5BJournal%5D)">Efficient generation of Schwann cells from human embryonic stem cell-derived neurospheres.</a> Stem Cell Rev Rep. 7 (2), 394-403 (2011).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0,22 &mu ; m filtres à seringue</td><td>ClearLine</td><td>146560</td><td></td></tr><tr><td>15 mL Tube conique en polypropylène haute clarté</td><td>Falcon</td><td>352096</td><td></td></tr><tr><td>200 &micro ; L ClearLine Plus Embouts Filtrants à faible Reliure</td><td>Dutscher</td><td>713263</td><td></td></tr><tr><td>40 &micro ; m filters</td><td>Falcon</td><td>352340</td><td></td></tr><tr><td>5 mL Pipette sérologique</td><td>Starstedt</td><td>86.1253.001</td><td></td></tr><tr><td>50 mL Tube conique en polypropylène haute clarté</td><td>Falcon</td><td>352070</td><td></td></tr><tr><td>Accutase</td><td>Merck-Sigma</td><td>A6964</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488 âne anti lapin IgG (H+L)</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>A21206</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 594 âne anti souris IgG (H+L)</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>A21203</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 647 âne anti chèvre IgG (H+L)</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>A31571</td><td></td></tr><tr><td>Solution antibiotique-antimycosique&nbsp ;</td><td>Merck-Sigma</td><td>A5955</td><td></td></tr><tr><td>B27 PLUS supplément</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>17504044</td><td></td></tr><tr><td>Albumine sérique bovine (BSA)</td><td>Merck-Sigma</td><td>A9418</td><td></td></tr><tr><td>Chloroforme</td><td>Carlo Erba</td><td>438601</td><td></td></tr><tr><td>Collagénase Type IV</td><td>Thermofisher Scientific, Gibco</td><td>17104019</td><td></td></tr><tr><td>Costar 6 plaques transparentes traitées TC</td> multiples<td>Corning</td><td>3516</td><td></td></tr><tr><td>Lunettes de protection, rondes</td><td>VWR</td><td>&nbsp ; 630-2113&nbsp ;</td><td></td></tr><tr><td>DMEM KnockOut</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>10829018</td><td></td></tr><tr><td>DMEM/F12+Glutamax</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>10565018</td><td></td></tr><tr><td>DMEM haute teneur en glucose</td><td>Merck-Sigma</td><td>D0822</td><td></td></tr><tr><td>DNA LoBind&nbsp ; Tubes, 2 mL</td><td>Eppendorf</td><td>30108078</td><td></td></tr><tr><td>Eau distillée sans DNase/RNase-Free</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>10977-035</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco' s Saline tamponnée au phosphate (PBS)</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>14190144</td><td></td></tr><tr><td>Eppendorf Safe-Lock Tubes, 0,5 mL</td><td>Eppendorf</td><td>30121023</td><td></td></tr><tr><td>Eppendorf Safe-Lock Tubes, 2 mL</td><td>Eppendorf</td><td>30120094</td><td></td></tr><tr><td>ESGRO mLIF Medium Supplément</td><td>Merck-Sigma</td><td>ESG1107</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol 70 %</td><td>Carlo Erba</td><td>528170</td><td></td></tr><tr><td>Fœtal Sérum bovin</td><td>Merck-Sigma</td><td>F7524</td><td></td></tr><tr><td>Fibronectine</td><td>Merck-Sigma</td><td>F085-2MG</td><td></td></tr><tr><td>Fluoromount-G</td><td>Invitrogen</td><td>00-4958-02</td><td></td></tr><tr><td>Solution de gélatine</td><td>Merck-Sigma</td><td>ES-006-B</td><td></td></tr><tr><td>GlutaMAX</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>35050061</td><td></td></tr><tr><td>Human EGF</td><td>Peprotech</td><td>AF-100-15-500UG</td><td></td></tr><tr><td>Anticorps humains FGF-basic</td><td>Peprotech</td><td>100-18B</td><td></td></tr><tr><td>Humain SOX9</td><td>R& Dsystems</td><td>AF3075</td><td></td></tr><tr><td>Insuline du pancréas bovin</td><td>Merck-Sigma</td><td>I6634</td><td></td></tr><tr><td>iScript Kit de synthèse d’ADNc</td><td>Biorad</td><td>1708891</td><td></td></tr><tr><td>Souris Anti-Humain AP-2 alpha Anticorps monoclonal, non conjugué</td><td>DSHB</td><td>3B5</td><td></td></tr><tr><td>Anticorps monoclonal anti-humain PAX7, Supplément</td><td></td><td></td> non conjugué DSHB PAX7 <td></td></tr><tr><td>N2</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>17502048</td><td></td></tr><tr><td>Milieu neurobasal</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>21103049</td><td></td></tr><tr><td>Plaque traitée pour la culture non tissulaire, 96 puits, Falcon à fond plat</td><td></td><td>351172</td><td></td></tr><tr><td>Plaque non traitée pour la culture tissulaire, 96 puits, Falcon à fond en U</td><td></td><td>351177</td><td></td></tr><tr><td>solution de paraformaldéhyde à 16 %, em grade</td><td>Microscopie électronique Sciences</td><td>15710</td><td></td></tr><tr><td>Propan-2-ol</td><td>Carlo Erba</td><td>415154</td><td></td></tr><tr><td>Purifié anti-tubuline &beta ; 3 (TUJ1) Anticorps</td><td>Biolegend</td><td>MMS-435P</td><td></td></tr><tr><td>RapiClear 1.47</td><td>Sunjin Lab</td><td>RC147001</td><td></td></tr><tr><td>RapiClear 1.52</td><td>Sunjin Lab</td><td>RC152001</td><td></td></tr><tr><td>Scotch Double Face 12.7 mm &times ; 22.8 m</td><td></td><td></td><td>Ruban double face transparent sans fibres</td></tr><tr><td>SensiFAST SYBR No-ROX Kit</td><td>Meridian Bioscience</td><td>BIO-98020</td><td></td></tr><tr><td>Scalpels chirurgicaux jetables stériles</td><td>Swann-Morton</td><td>05XX</td><td></td></tr><tr><td>Superfrost Plus Lames de microscope à adhérence</td><td>Epredia</td><td>J1800AMNZ</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>A16046. </td><td></td>Réactif AP</tr><tr><td>TRIzol</td><td>FisherScientific</td><td>15596026</td><td></td></tr><tr><td>Trypsine-EDTA (0,05 %)</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>25300054</td><td></td></tr><tr><td>Tween-20</td><td>Fisher Scientific</td><td>10113103</td><td></td></tr><tr><td>TWIST1 Rabbit mAb (IF Formulated)</td><td>Technologie de signalisation cellulaire</td><td>E7E2G</td><td></td></tr><tr><td>&beta ;-mercaptoethanol</td><td>Thermofisher Scientific</td><td></td><td></td>31350010</tr></tbody></table>

cellules de crête neurale crânienne : protocole de différenciation in vitro tridimensionnelle pour le dosage multiplexé

Cranial Neural Crest Cells Three-Dimensional In Vitro Differentiation Protocol for Multiplexed Assay

Conformément au protocole, les colonies de CSEm ont été dissociées et 3000 cellules ont été ensemencées dans des plaques à 96 puits à fond en U non traitées par TC. Le jour 2, les SN agrégés ont été transférés dans des plaques à fond plat à 96 puits non traitées par TC pour leur permettre de se fixer. Une visualisation simplifiée du protocole d’agrégation NS est fournie à la figure 1A. Les NS ont été cultivés jusqu’au jour 9, puis traités pour la coloration par immunofluorescence. Les cellul...

Cellules de crête neurale crânienne : protocole de différenciation in vitro tridimensionnelle pour le dosage multiplexé

With their remarkable capacity to generate both ectodermal and mesenchymal derivatives, cranial neural crest cells (CNCC) have attracted a lot of interest ...

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Recherche

JoVE Journal

Biology

Biologie

Pour cultiver des cellules souches neurales de crête (NCSC) in vitro, un milieu spécial (NCSCM) est nécessaire. Partie essentielle de NCSCM est extrait d'embryon de poulet (PECO). Nous décrivons ici les techniques précises pour produire une quantité maximisée de qualité pure et de haute PECO, y compris des détails comme l'isolement, la macération, la centrifugation et la filtration.

Production d&#39;extrait d&#39;embryon de poulet pour la culture des neurones murins Cellules souches Crest

Isolement de la crête neurale embryonnaire à partir du tube neural facilite l'utilisation...

Isolement et culture de cellules de crêtes neurales de tube neural embryonnaire murin

Cette vidéo illustre une technique permettant d’isoler les plis neuraux crâniens de la région du mésencéphale des embryons de poulet. Il présente un processus de dissection détaillé des plis neuraux, leur placement et leur fixation sur des lamelles recouvertes de fibronectine, suivi de l’observation de la migration des cellules de la crête neurale à partir des plis neuraux.

Isolement des plis neuraux crâniens d’un embryon de poulet pour une culture cellulaire de crête neurale

Crête neurale (NC) des cellules dérivées de cellules souches pluripotentes humaines (HPSC) ont un grand potentiel pour la modélisation du développement humain et de la maladie et des thérapies de remplacement cellulaire. Ici, une adaptation libre-alimentation de l'a largement...

Dérivation sans chargeur-de cellules progénitrices de la crête neurale souches pluripotentes humaines cellules

Dans le but de caractériser les changements dans les miARN sur les cellules souches neurales humaines différenciées (hNSCs), nous décrivons la différenciation des hNSC sur un système tridimensionnel, l’évaluation des changements dans l’expression des microARN par puce PCR miRNA, et l’analyse computationnelle pour la prédiction de la cible miARN et sa validation par double test de luciférase.

Différenciation d&#39;un Neural Stem Cell humaine ligne sur Trois Cultures dimensionnelles, les gènes Analyse des microARN et Putative cibles

Nous décrivons une technique pour l'utilisation de cellules souches embryonnaires de souris pour générer deux ou trois dimensions des corps embryoïdes. Nous expliquons alors comment induire la différenciation neuronale des cellules du corps embryoïdes par l'acide rétinoïque, et comment analyser leur état de différenciation par immunofluorescence marqueur de cellules progénitrices et immunoblotting.

L&#39;analyse des rétinoïque induite par l&#39;acide Neuro-Différenciation de cellules souches embryonnaires de souris en deux et trois dimensions corps embryoïdes

Ce protocole décrit la dissection et la culture des cellules de crête neurale crânienne des modèles de souris, principalement pour l'étude de la migration cellulaire. Nous décrivons les techniques d'imagerie en direct utilisées et l'analyse des changements de vitesse et de forme cellulaire.

Dissection, culture et analyse des cellules neurales primaires de crête neurale de la souris pour l'étude de la délamination et de la migration neurales de cellules de crête

Présenté ici est un protocole pour la génération d'une culture unicellulaire des cellules souches embryonnaires humaines et leur différenciation ultérieure en cellules progénitrices neurales. Le protocole est simple, robuste, évolutif et adapté aux applications de dépistage des médicaments et de médecine régénérative.

Différenciation neuronale efficace à l'aide de la culture monocellulaire des cellules souches embryonnaires humaines

Dans ce protocole, nous décrivons une stratégie de différenciation stable et très efficace pour la génération de neurones sympathiques postganglioniques à partir de cellules souches pluripotentes humaines. Ce modèle rendra les neurones disponibles pour l’utilisation d’études sur de multiples troubles autonomes.

Différenciation efficace des neurones sympathiques postganglioniques utilisant des cellules souches pluripotentes humaines dans des conditions de culture sans alimentation et définies chimiquement

Ici, nous avons établi une méthode peu coûteux et facile à utiliser qui dirige la différenciation rapide et efficace des cellules souches embryonnaires en neurones. Cette méthode convient à la vulgarisation entre les laboratoires et peut être un outil utile pour la recherche neurologique.

Différenciation neuronale des cellules souches embryonnaires de souris in vitro

Ce protocole polyvalent décrit l’isolement des cellules de la crête neurale prémigratoire (CCN) par l’excision des plis neuraux crâniens des embryons de poussins. Lors du placage et de l’incubation, les NCC migrateurs émergent des explants de plis neuraux, ce qui permet d’évaluer la morphologie et la migration des cellules dans un environnement 2D simplifié.

Préparation et analyse morphologique de cultures de cellules de crête neurale crânienne de poussin

Apprenez la différenciation des cellules de crête neurale crânienne à partir de cellules souches embryonnaires de souris en 3D. Ce protocole réduit la variabilité des neurosphères et permet des dosages multiplexés pour étudier le développement.

Cellules de crête neurale crânienne : protocole de différenciation in vitro tridimensionnelle pour le dosage multiplexé

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