Name: Optimisation de l’administration de vésicules extracellulaires à l’aide d’un échafaudage bio-imprimé en 3D pour la gestion des plaies chroniques (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-02-28T14:20:00.000+00:00
Duration: 9 min 17 s
Description: Découvrez la fabrication d'échafaudages bio-imprimés en 3D pour la gestion des plaies chroniques. Ce protocole utilise des vésicules extracellulaires et un design cœur-gaine pour améliorer la cicatrisation.

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</ol>

<table><tbody><tr><td>23 G Buse conique de précision violette</td><td>Cellink</td><td>KT0000002000</td><td>Pour fournir une extrusion précise des bio-encres avec un minimum d’obstruction</td></tr><tr><td>Alginate lyase (AlgLyase)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A1603-100MG</td><td>L’algyase est une enzyme qui dégrade l’alginate.</td></tr><tr><td>Filtre ultra-centrifuge Amicon, 30 kDa MWCO</td><td>Merck</td><td>UFC9030</td><td>Utilisé pour laver les EV marqués PKH-26</td></tr><tr><td>Kit de dosage BCA</td><td>Thermo Scientific</td><td>10678484</td><td>Pour déterminer la concentration en protéines/EV</td></tr><tr><td>Système de bio-impression</td><td>Regemat</td><td>V1</td><td>Pour fabriquer l’échafaudage core-gaine</td></tr><tr><td>Albumine sérique bovine (BSA)</td><td>sigma-aldrich</td><td>05470-5G</td><td>Pour arrêter la réaction PKH 26&nbsp ;</td></tr><tr><td>Chlorure</td><td>de calcium Sigma Aldrich</td><td>C3306-100G</td><td>Pour réticuler et stabiliser les bio-encres en ingénierie tissulaire</td></tr><tr><td>Centrifugeuse</td><td>Sigma</td><td>2-16P</td><td>Utilisée pour l’isolement des VE</td></tr><tr><td>Centrifugeuse 5810 R</td><td>Eppendorf</td><td>22625101</td><td>Utilisée pour la culture cellulaire</td></tr><tr><td>Classe II Armoire de sécurité biologique</td><td>Telstar</td><td>Bio II Advance</td><td>Culture cellulaire</td></tr><tr><td>CryoCube&nbsp ; Série F570 - Congélateur ULT</td><td>Eppendorf</td><td>F571240035</td><td>Pour stocker les VE</td></tr><tr><td></td><td>microscope fluorescent OLYMPUS&nbsp ;</td><td>IX73P1F</td><td>Utilisé pour vérifier la présence résiduelle de PKH-26 dans le filtrat</td></tr><tr><td>Gentamicine (50 mg/mL)</td><td>Thermofisher</td><td>15750</td><td>Antibiotique pour milieux de culture cellulaire</td></tr><tr><td>GlutaMAX-I CTS, (100X), liquide</td><td>Thermofisher</td><td>A12860</td><td>Complément de milieu de culture cellulaire</td></tr><tr><td>HCl</td><td>Sigma Aldrich</td><td>7647-01-0</td><td>Préparation du tampon&nbsp ;</td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Carl Roth</td><td>Art. Non&nbsp ; 6763.3</td><td>Préparation de la mémoire tampon</td></tr><tr><td>Carboxyméthylcellulose à haute viscosité (CMCh)</td><td>BDH</td><td>27929 4T</td><td>CMCh est un dérivé de cellulose soluble dans l’eau.</td></tr><tr><td>Incubateur</td><td>Nouveau-Brunswick</td><td>&nbsp ; NB-170R</td><td>Culture cellulaire</td></tr><tr><td>Imagerie Invivo</td><td>PerkinElmer</td><td>IVIS Lumina XRMS Série III&nbsp ;</td><td>Pour suivre la sortie des VE, in vivo</td></tr><tr><td>Agitateur magnétique</td><td>SalvisLAB</td><td>MC35</td><td>Pour la préparation des bioencres</td></tr><tr><td>miRCURY Kits d’exosomes pour l’isolement des exosomes</td><td>Qiagen</td><td>76743</td><td>Evs isolation</td></tr><tr><td>NaOh</td><td>Daejung</td><td>1310-73-2</td><td>Préparation du tampon&nbsp ;</td></tr><tr><td>solution saline tamponnée au phosphate (PBS)</td><td>Thermo Scientific</td><td>J61196. AP</td><td>Culture cellulaire</td></tr><tr><td>PKH 26</td><td>MCE</td><td>154214-55-8</td><td>Colorant fluorescent rouge pour l’étiquetage des EV</td></tr><tr><td>Alginate de sodium (Alg)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A0682-100G</td><td>Polysaccharide naturel dérivé d’algues brunes.</td></tr><tr><td>Chlorure de sodium (NaCl)</td><td>Carl Roth</td><td>Art-Nr-P029.1</td><td>Préparation du tampon&nbsp ;</td></tr><tr><td>StemPro BM Cellules souches mésenchymateuses</td><td>Thermofisher</td><td>A1382901</td><td>Cellules souches mésenchymateuses</td></tr><tr><td>StemPro MSC SFM XenoFree</td><td>Thermofisher</td><td>A1067501</td><td>Milieu de culture cellulaire</td></tr><tr><td>Trypsine 0,25 %</td><td>Thermofisher</td><td>25050014</td><td>Dissociation cellulaire</td></tr><tr><td>Vortex-Mixer</td><td>Daihan Scientific</td><td>VM-10</td><td>Utilisé pour mélanger le tampon de précipitation avec le milieu conditionné</td></tr></tbody></table>

optimisation de l’administration de vésicules extracellulaires à l’aide d’un échafaudage bio-imprimé en 3d pour la gestion des plaies chroniques

Optimizing Extracellular Vesicle Delivery Using a Core-Sheath 3D-Bioprinted Scaffold for Chronic Wound Management

La libération in vivo de VE à partir des échafaudages Alg-EVs/CMCh et Alg-EVs/CMCh-AlgLyase est illustrée aux figures 1B et C. Comme prévu, l’échafaudage Alg-EVs/CMCh-AlgLyase a présenté un profil de libération plus rapide par rapport aux Alg-EVs/CMCh, en particulier aux points de temps de 2 h et 4 h. La libération de VE par les hydrogels est régie par une combinaison de mécanismes physicochimiques, notamment la diffusion, le gonflement, l’érosion et la dégradation<...

Optimisation de l’administration de vésicules extracellulaires à l’aide d’un échafaudage bio-imprimé en 3D pour la gestion des plaies chroniques

This study outlines a detailed protocol for the fabrication of core-sheath 3D-bioprinted scaffolds designed to enhance chronic wound healing. The protocol ...

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Bioengineering

Bioingénierie

Pour créer des structures hautement organisées de tissus complexes, il faut assembler plusieurs types de matériaux et de cellules en un composite intégré.  Cette conception combinatoire intègre des feuilles de cellules stratifiées spécifiques à un organe avec deux matériaux distincts d’origine biologique contenant une base de matrice fibreuse solide, et des cellules endothéliales pour améliorer la formation de nouveaux vaisseaux.

Ingénierie tissulaire: Construction d&#39;un échafaudage 3D multicellulaire pour la livraison de stratifiés feuilles cellulaires

Une bio-imprimante cartésienne a été conçue et fabriquée pour permettre le dépôt de plusieurs matériaux dans des géométries précises et reproductibles, tout en permettant le contrôle des facteurs environnementaux. À l’aide de la bio-imprimante tridimensionnelle, des constructions complexes et viables peuvent être imprimées et facilement reproduites.

Viabilité de Bioprinted cellulaires constructions Utilisation d&#39;une imprimante cartésienne Distributeur Trois

Nous fournissons un protocole généralisé basé sur une stratégie de bioprinting microfluidiques pour génie un lit vasculaire microfibreux, où un type de cellule secondaire pourrait être encore semé dans l’espace interstitiel de cette structure microfibreux pour générer des organoids et des tissus vascularisés.

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Cet article illustre la technique d’élargir une natte de nanofibres électrofilées (2D) traditionnel, de deux-dimension en échafaudage tridimensionnels (3D) par le biais de la dépressurisation du sous-critique CO2 fluide. Ces échafaudages augmentés sont en 3D, indices étroitement mimiques nanotopographic cellulaires et préserver les fonctions des molécules biologiques encapsulés dans les nanofibres.

Expansion de nanofibres Électrofilées dimension deux nattes en trois dimensions les échafaudages

Présenté ici est un simple à utiliser, core / coquille, en trois dimensions bioimpression mise en place pour la fabrication en une étape d'échafaudages creux, adapté à l'ingénierie tissulaire de structures vasculaires et autres tubulaires.

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