Name: Administration d’anesthésiques volatils à des larves de poisson-zèbre pour l’observation comportementale (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-06T13:30:00.000+00:00
Duration: 4 min 55 s
Description: Découvrez une méthode accessible pour administrer des anesthésiques volatils à des larves de Danio rerio dans une chambre étanche. Ce protocole permet d'étudier la pharmacologie anesthésique et ses effets sur le comportement sans équipement coûteux.

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<ol><li>Wasilczuk, A. Z., Maier, K. L., Kelz, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mouse+as+a+model+organism+for+assessing+anesthetic+sensitivity%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Enzymol%22%5BJournal%5D)">The mouse as a model organism for assessing anesthetic sensitivity.</a> Methods Enzymol. 602, 211-228 (2018).</li>
<li>Shortal, B. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+validation+of+brain+target-controlled+infusion+of+propofol+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Development and validation of brain target-controlled infusion of propofol in mice.</a> PLoS One. 13, 1-14 (2018).</li>
<li>Halbach, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Yolk+sac+of+zebrafish+embryos+as+backpack+for+chemicals%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Sci+Technol%22%5BJournal%5D)">Yolk sac of zebrafish embryos as backpack for chemicals.</a> Environ Sci Technol. 54 (16), 10159-10169 (2020).</li>
<li>Bedell, V. M., Meng, Q. C., Pack, M. A., Eckenhoff, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+vertebrate+model+to+reveal+neural+substrates+underlying+the+transitions+between+conscious+and+unconscious+states%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">A vertebrate model to reveal neural substrates underlying the transitions between conscious and unconscious states.</a> Sci Rep. 10, 1-10 (2020).</li>
<li>Stetter, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isoflurane+anesthesia+in+amphibians%3A+Comparison+of+five+application+methods%5BTitle%5D)+AND+%22In+American+Association+of+Zoo+Veterinarians%22%5BJournal%5D)">Isoflurane anesthesia in amphibians: Comparison of five application methods.</a> In American Association of Zoo Veterinarians. , Puerto Vallarta, Mexico. 255-257 (1996).</li>
<li>Woll, K. A., Eckenhoff, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-throughput+screening+to+identify+anesthetic+ligands+using+Xenopus+laevis+tadpoles%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Enzymol%22%5BJournal%5D)">High-throughput screening to identify anesthetic ligands using Xenopus laevis tadpoles.</a> Methods Enzymol. 602, 177-187 (2018).</li>
<li>Meyer, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zur+Theorie+der+Alkoholnarkose%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Exp+Pathol+Pharmakol%22%5BJournal%5D)">Zur Theorie der Alkoholnarkose.</a> Arch Exp Pathol Pharmakol. 46, 338-346 (1901).</li>
<li>Downes, H., Courogen, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contrasting+effects+of+anesthetics+in+tadpole+bioassays%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacol+Exp+Ther%22%5BJournal%5D)">Contrasting effects of anesthetics in tadpole bioassays.</a> J Pharmacol Exp Ther. 278, 284-296 (1996).</li>
<li>Kalueff, A. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Towards+a+comprehensive+catalog+of+zebrafish+behavior+1.0+and+beyond%5BTitle%5D)+AND+%22Zebrafish%22%5BJournal%5D)">Towards a comprehensive catalog of zebrafish behavior 1.0 and beyond.</a> Zebrafish. 10, 70-86 (2013).</li>
<li>Abramova, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+pregnanolone+glutamate+and+its+metabolites+on+GABAA+and+NMDA+receptors+and+zebrafish+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Chem+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Effects of pregnanolone glutamate and its metabolites on GABAA and NMDA receptors and zebrafish behavior.</a> ACS Chem Neurosci. 14, 1870-1883 (2023).</li>
<li>Germann, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+behavioral+effects+of+GABAergic+low-and+high-efficacy+neuroactive+steroids+in+the+zebrafish+larvae+assay%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Chem+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Comparison of behavioral effects of GABAergic low-and high-efficacy neuroactive steroids in the zebrafish larvae assay.</a> ACS Chem Neurosci. 15, 909-915 (2024).</li>
<li>Hoyt, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photomotor+responses+in+zebrafish+and+electrophysiology+reveal+varying+interactions+of+anesthetics+targeting+distinct+sites+on+gamma-aminobutyric+acid+type+A+receptors%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesiology%22%5BJournal%5D)">Photomotor responses in zebrafish and electrophysiology reveal varying interactions of anesthetics targeting distinct sites on gamma-aminobutyric acid type A receptors.</a> Anesthesiology. 137, 568(2022).</li>
<li>Li, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+the+locomotor+activities+of+zebrafish+larvae+under+the+influence+of+various+neuroactive+drugs%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+Trans+Med%22%5BJournal%5D)">Characterization of the locomotor activities of zebrafish larvae under the influence of various neuroactive drugs.</a> Annals Trans Med. 6, 173(2018).</li>
<li>McCarroll, M. N., Gendelev, L., Kinser, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+behavioural+profiling+identifies+GABA+and+serotonin+receptor+ligands+related+to+sedation+and+paradoxical+excitation%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Zebrafish behavioural profiling identifies GABA and serotonin receptor ligands related to sedation and paradoxical excitation.</a> Nat Commun. 10, 4078(2019).</li>
<li>Plasencia, D. M., Rodgers, L. H., Knighton, A. R., Eckenhoff, R. G., White, E. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antagonism+of+propofol+anesthesia+by+alkyl-fluorobenzene+derivatives%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Antagonism of propofol anesthesia by alkyl-fluorobenzene derivatives.</a> Sci Rep. 14, 15943(2024).</li>
<li>Dash, S. N., Lipika, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Flight+for+fish+in+drug+discovery%3A+A+review+of+zebrafish-based+screening+of+molecules%5BTitle%5D)+AND+%22Biology+Lett%22%5BJournal%5D)">Flight for fish in drug discovery: A review of zebrafish-based screening of molecules.</a> Biology Lett. 19, 20220541(2023).</li>
<li>Nelson, J. C., Michael, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+behavior+as+a+gateway+to+nervous+system+assembly+and+plasticity%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Zebrafish behavior as a gateway to nervous system assembly and plasticity.</a> Development. 149, 177998(2022).</li>
<li>Zhang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sevoflurane+postconditioning+ameliorates+cerebral+hypoxia%2Freoxygenation+injury+in+zebrafish+involving+the+Akt%2FGSK-3%CE%B2+pathway+activation+and+the+microtubule-associated+protein+2+promotion%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Pharmacother%22%5BJournal%5D)">Sevoflurane postconditioning ameliorates cerebral hypoxia/reoxygenation injury in zebrafish involving the Akt/GSK-3β pathway activation and the microtubule-associated protein 2 promotion.</a> Biomed Pharmacother. 175, 116693(2024).</li>
<li>Abdallah, S. J., Thomas, B. S., Jonz, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aquatic+surface+respiration+and+swimming+behaviour+in+adult+and+developing+zebrafish+exposed+to+hypoxia%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Biol%22%5BJournal%5D)">Aquatic surface respiration and swimming behaviour in adult and developing zebrafish exposed to hypoxia.</a> J Exp Biol. 218, 1777-1786 (2015).</li>
<li>Targ, A. G., Yasuda, N., Eger, E. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Solubility+of+I-653%2C+sevoflurane%2C+isoflurane%2C+and+halothane+in+plastics+and+rubber+composing+a+conventional+anesthetic+circuit%5BTitle%5D)+AND+%22Anesth+Analg%22%5BJournal%5D)">Solubility of I-653, sevoflurane, isoflurane, and halothane in plastics and rubber composing a conventional anesthetic circuit.</a> Anesth Analg. 69, 218-225 (1989).</li>
<li>Yang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drug-selective+Anesthetic+insensitivity+of+zebrafish+lacking+%CE%B3-aminobutyric+acid+Type+A+receptor+%CE%B23+subunits%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesiology%22%5BJournal%5D)">Drug-selective Anesthetic insensitivity of zebrafish lacking γ-aminobutyric acid Type A receptor β3 subunits.</a> Anesthesiology. 131, 1276-1291 (2019).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Microplaques en verre à 96 puits</td><td>Zinsser Amérique du Nord</td><td>3600500</td><td>« Ces microplaques de verre sont fabriquées à partir de verre borosilicate spécial de haute pureté et résistant à la température, et les surfaces sont polies à l’acide. Les plaques sont rectangulaires dans l’empreinte standard des microplaques SBS (85 x 127 mm). Ces microplaques de réacteur en verre sont conçues principalement pour être utilisées dans des applications chimiques et résistent à des températures allant jusqu’à 530&deg ; C. Ils peuvent être autoclavés. Ils sont usinés à partir d’une feuille de verre homogène et présentent une géométrie et une forme uniformes pour fournir des températures constantes d’un puits à l’autre (à moins de 0,2 degré C typiquement).</td></tr><tr><td>Flacons transparents de 2,0 ml, grande ouverture, filetage de 9 mm.</td><td>Chemglass Sciences de la vie</td><td>Référence : CV-1150-1232</td><td>« Avec une ouverture 40 % plus grande, ces flacons sont spécialement conçus pour fonctionner dans des échantillonneurs automatiques à bras robotisé. Ils intègrent également la conception unique du flacon étagé qui centre avec précision un insert de volume limité dans le col du flacon. "</td></tr><tr><td>Ruban adhésif double face 3M 9490LE</td><td>AbbVie Inc</td><td>Réf. 24WG90</td><td>« Le ruban double face 9490LE 3M avec adhésif de laminage 3M 300LSE offre une force d’adhérence élevée sur la plupart des surfaces, y compris de nombreux plastiques à faible énergie de surface tels que le polypropylène et les peintures enduites de poudre. L’adhésif acrylique offre également une excellente adhérence aux surfaces légèrement contaminées par de l’huile généralement utilisée avec les pièces de machines. Le ruban double face 9490LE de 3M offre la caractéristique supplémentaire de l’adhésif de laminage 300MP 3M d’un côté pour offrir une excellente force d’adhérence à une variété de matériaux en mousse et en tissu (6 po x 5 vg).</td></tr><tr><td>Chambre d’observation DanioVision</td><td>Noldus</td><td>DVOC-0041</td><td>« DanioVision est un système complet, conçu pour les tests à haut débit de larves de poisson-zèbre dans des plaques multi-puits. Il comprend la chambre d’observation et le célèbre logiciel de suivi vidéo EthoVision XT.</td></tr><tr><td>Unité de contrôle de la température DanioVision</td><td>Noldus</td><td>DVTCU-0011</td><td>« L’unité de contrôle de la température DanioVision est un système à flux continu : l’eau s’écoule uniformément sous la plaque du puits à la température de votre choix. La température est la même sur toute la plaque du puits.</td></tr><tr><td>Logiciel Ethovision XT16</td><td>Noldus</td><td>NSE-EV-BASE</td><td>« EthoVision XT est le logiciel de suivi vidéo le plus largement utilisé qui suit et analyse le comportement, le mouvement et l’activité de tout animal, marque déposée par Noldus »</td></tr><tr><td>L’isoflurane</td><td>Soins intensifs Piramal</td><td>CDN # 66794-017-10</td><td>Liquide pour inhalation, un anesthésique d’inhalation non explosif ininflammable, contenant 100 mL d’isoflurane. Stocké à température ambiante contrôlée 20&ordm ; à 25&ordm ; C</td></tr><tr><td>Scotch-Weld Apprêt adhésif instantané AC79 transparent</td><td>3M</td><td>« 62-3916-0860-1 (ID du produit) C2103N (Lot) »</td><td>« L’apprêt adhésif instantané 3M Scotch-Weld AC79 est conçu pour être utilisé sur des élastomères à faible énergie de surface difficiles à coller, tels que l’EPDM, le silicone et d’autres caoutchoucs. La préparation et l’application de la surface sont simples et l’apprêt adhésif sèche rapidement pour que les travaux se déroulent rapidement.</td></tr><tr><td>Feuilles de silicone de 0,5 mm d’épaisseur</td><td>Fournisseurs variés</td><td>N/A</td><td>Des feuilles de silicone translucides ont été achetées auprès de plusieurs fournisseurs</td></tr><tr><td>Speedball Pop-in Hard Rubber Brayer avec cadre en plastique, 4 pouces"</td><td>Speedball</td><td>793728</td><td>"Le Speedball Pop-In Hard Brayer est doté d’un rouleau qui s’enclenche pour un nettoyage facile. Cadre en plastique d’une seule pièce avec rouleau amovible de 4 pouces de large. Fabriqué à partir de caoutchouc de gomme naturel pur avec une finition rectifiée. Le brayeur en caoutchouc dur mesure 4 pouces de large avec un cadre en plastique robuste et est idéal pour l’application de colle.</td></tr><tr><td>Bouchons à vis SureSTART 9 mm, applications à haut débit de niveau 2, type : Bouchon à vis AVCS PP noir, silicone blanc/PTFE rouge Septa 1,0 mm</td><td>Thermo Scientific</td><td>6ASC9ST1B</td><td>« Utilisez des bouchons à vis Thermo Scientific SureSTART de 9 mm avec des flacons à vis dotés d’une ouverture de 9 mm. Les capuchons de performance de niveau 2 sont fabriqués et testés pour garantir un faible saignement, une robustesse et une reproductibilité des résultats pour les analyses GC-MS et LC-MS de routine. Choisissez parmi des capuchons en polypropylène avec des septa tout usage en silicone/PTFE de différentes valeurs de dureté conçus pour réduire les problèmes d’aiguille de l’échantillonneur automatique. Nos bouchons AVCS intègrent la technologie Advanced Vial Closure System pour assurer une compression optimale du joint lors de la fermeture d’un flacon.</td></tr><tr><td>Ultane Sevoflurane</td><td>AbbVie Inc</td><td>NDC # 0074-4456-04</td><td>Le liquide volatil pour inhalation est emballé dans des flacons de couleur ambrée contenant 250 ml de sévoflurane. Stocké à température ambiante contrôlée 15&ordm ; à 30&ordm ; C</td></tr><tr><td>Wheaton Flacons à scintillation liquide, bouchons fixés aux flacons, verre, feuille / pulpe métallique, 24-400, 20 mL&nbsp ;</td><td>DWK Sciences de la vie</td><td>986561</td><td>Flacons à scintillation de 20 ml convertis à partir de tubes en verre borosilicaté de type I, de PET ou de PEHD. Disponible avec capuchon attaché.</td></tr></tbody></table>

administration d’anesthésiques volatils à des larves de poisson-zèbre pour l’observation comportementale

Administration of Volatile Anesthetics to Zebrafish Larvae for Behavioral Observation

Comparaison avec l’observation traditionnelle en puits ouverts Afin d’évaluer si l’étanchéité adhésive a un effet sur les mouvements spontanés, une comparaison a été faite entre les témoins dans les puits ouverts et les puits scellés. Comme le montre la figure 2A, aucune différence statistiquement significative dans le mouvement n’a été observée entre ces groupes pour la durée standard de ~30 minutes utilisée dans les expériences décrites dans cet article. Reconnaissant q...

Administration d’anesthésiques volatils à des larves de poisson-zèbre pour l’observation comportementale

This study describes a unique method for administering volatile anesthetics, such as isoflurane and sevoflurane, to larval zebrafish during behavioral ...

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Neuroscience

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Nous démontrons injection intrapéritonéale dans le poisson zèbre adulte. Nous utilisons une microseringue 10 ul Nanofil contrôlée par un contrôleur Micro4 et UltraMicroPump III. Cette manifestation comprend l'utilisation de l'eau froide comme anesthésique.

Injection intrapéritonéale en Zebrafish adultes

Source : Morsch, M.,  et al., Déclenchement du stress cellulaire et de la mort à l’aide de la microscopie confocale laser UV conventionnelle. J. Vis. Exp. (2017) &lt;p style='line-height :1.380000000000001 ;margin-bottom :0pt ;margin-top :0pt ;text-align :justify ;' dir='ltr'&gt;Dans cette vidéo, nous explorons la technique de l’ablation au laser UV de haute intensité pour cibler et étudier avec précision les neurones individuels chez le poisson-zèbre transgénique. Nous montrons comment...

Ablation sélective au laser d’un seul neurone chez une larve de poisson-zèbre à l’aide d’un microscope confocal

Source : Schramm, P. et al. Imagerie in vivo du tissu cérébral entièrement actif chez les larves et les juvéniles de poisson-zèbre éveillés par ablation du crâne et de la peau. J. Vis. Exp. (2021)Cette vidéo démontre l’imagerie in vivo des neurones cérébelleux chez les larves de poisson-zèbre transgénique, qui expriment des protéines fluorescentes dans les neurones de Purkinje. Le processus consiste à anesthésier les larves, à les immobiliser dans de l’agarose et à retirer soigneusement la peau...

Imagerie in vivo du cerveau d’une larve de poisson-zèbre pour visualiser les neurones cérébelleux

Une méthode simple pour enregistrer les potentiels de champ extracellulaires dans le cerveau antérieur larvaire du poisson zèbre est décrite. La méthode fournit une...

Prosencéphale enregistrement électrophysiologique des larves dans le poisson-zèbre

Notre laboratoire a développé un système d'imagerie automatisé à haut débit roman qui est utile pour la détection de plusieurs comportements différents dans 7-day-old larves de poisson zèbre. Le système peut être utilisé pour détecter des changements subtils dans le comportement après que les larves ont été exposés à des substances toxiques de l'environnement ou des produits pharmaceutiques.

Analyses comportementales automatisés à haut débit dans les embryons de poisson zèbre

Les manipulations ciblées pour provoquer un stress dirigé ou la mort dans des cellules individuelles ont été relativement difficiles à réaliser. Ici, une approche d’ablation à résolution cellulaire unique pour stresser et tuer sélectivement des cellules individuelles dans des cultures cellulaires et des animaux vivants est décrite sur la base d’un laser UV confocal standard.

Déclenchement Stress cellulaire et la mort Utilisation conventionnelle UV Laser Microscopie confocale

Ici, nous présentons une méthode fiable, mini-invasive et rentable pour enregistrer et interpréter les électrocardiogrammes chez les poissons zèbres adultes anesthésiés vivants.

Électrocardiographie de surface in Vivo pour le poisson zèbre adulte

Cet article décrit une méthode pour monter les embryons fragiles de poisson zèbre pour la microscopie confocale de time-lapse prolongée. Cette méthode à faible coût est facile à exécuter en utilisant des plats de microscopie à fond de verre réguliers pour l'imagerie sur n'importe quel microscope inversé. Le montage est effectué en couches d'agarose à différentes concentrations.

Une méthode de montage en couches pour la microscopie confocale de temps-lapse prolongée des embryons entiers de poisson zèbre

L’ablation au laser est une technologie largement applicable pour étudier la régénération dans les systèmes biologiques. Le protocole présenté décrit l’utilisation d’un microscope confocal standard de laser-balayage pour l’ablation de laser et la formation image time-lapse suivante des cellules interuromast régénérantes dans la ligne latérale de zebrafish.

Essai confocal d’ablation et de régénération au microscope dans les cellules interuromast de Zebrafish

Nous présentons ici une méthode pour imager le cerveau embryonnaire du poisson-zèbre in vivo jusqu’aux stades larvaire et juvénile. Cette procédure micro-invasive, adaptée des approches électrophysiologiques, donne accès aux détails cellulaires et subcellulaires des neurones matures et peut être combinée avec des études optogénétiques et neuropharmacologiques pour caractériser la fonction cérébrale et l’intervention médicamenteuse.

Imagerie in vivo de tissu cérébral entièrement actif chez des larves et des juvéniles de poissons-zèbres éveillés par enlèvement du crâne et de la peau

Ici, nous présentons un protocole détaillé pour examiner l’activité neuronale dans les régions cérébrales du poisson-zèbre transgénique qui expriment des indicateurs calciques GCaMP à l’aide de la microscopie confocale.

In vivo Imagerie confocale par fluorescence de l’activité neuronale induite par la stimulation sensorielle chez des larves de poisson-zèbre partiellement restreintes

Découvrez une méthode accessible pour administrer des anesthésiques volatils à des larves de Danio rerio dans une chambre étanche. Ce protocole permet d'étudier la pharmacologie anesthésique et ses effets sur le comportement sans équipement coûteux.

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