Name: Grossissement de globes non néoplasiques, y compris les yeux fœtaux (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-05-30T13:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 15 s
Description: Découvrez les techniques standardisées de préparation anatomique des globes oculaires non néoplasiques pour l'histopathologie. Ces méthodes améliorent la qualité des coupes et la reproductibilité des résultats diagnostiques.

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<ol><li>Torczynski, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparation+of+ocular+specimens+for+histopathologic+examination%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Preparation of ocular specimens for histopathologic examination.</a> Ophthalmology. 88 (12), 1367-1371 (1981).</li>
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<li>Albert, D., Syed, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+for+the+examination+of+specimens+from+patients+with+retinoblastoma%3A+a+basis+for+checklists%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Pathol+Lab+Med%22%5BJournal%5D)">Protocol for the examination of specimens from patients with retinoblastoma: a basis for checklists.</a> Arch Pathol Lab Med. 125 (9), 1183-1188 (2001).</li>
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<li>Lu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+progress+in+optical+clearing+of+eye+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Recent progress in optical clearing of eye tissues.</a> Exp Eye Res. 212, 108796(2021).</li>
<li>Darche, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+characterization+of+developing+and+adult+ocular+vasculature+in+mice+using+in+toto+clearing%5BTitle%5D)+AND+%22Commun+Biol%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional characterization of developing and adult ocular vasculature in mice using in toto clearing.</a> Commun Biol. 5 (1), 1135(2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Règle d’étrier</td><td>Mauser</td><td>hors marché</td><td>INOX Messchieber 0- 200 mm</td></tr><tr><td>Microscope de dissection ou microscope de chirurgie ophtalmique mis au rebut</td><td>M&ouml ; ller Wedel</td><td>hors marché</td><td></td></tr><tr><td>Forceps</td><td>Sciences fines</td><td>11203-23</td><td>SS INOX</td></tr><tr><td>HistoBond</td><td>Marienfeld, Allemagne</td><td>DIN ISO 8037-1</td><td>Lames revêtues</td></tr><tr><td>Tuyau LED pour transillumination dans une pièce sombre</td><td>Schott, Mayence</td><td>hors marché</td><td>KL150</td></tr><tr><td>Lame de microtome</td><td>Lames de microtome de plumes</td><td>N/A</td><td>Type A35</td></tr></tbody></table>

grossissement de globes non néoplasiques, y compris les yeux fœtaux

Grossing of Non-neoplastic Globes, Including Fetal Eyes

Après l’orientation, il devrait être possible de déterminer la latéralité des yeux adultes. Cependant, cela est souvent impossible pour les yeux fœtaux. La latéralité est importante pour confirmer que le bon œil a été enlevé et qu’il correspond au rapport. Les mesures avant le sectionnement sont documentées. En particulier, pour les yeux fœtaux, un nomogramme est utile pour exclure les anomalies de taille oculaire telles que la microphtalmie.
En fonction des antécédents du patient et de la transillumination, une section est prévue. Le globe est généralement sectionné horizontalement, ce qui nécessite une identification correcte du plan horizontal comme décrit ci-dessus. S’il y a des zones d’intérêt spécifiques (par exemple, un colobome, des lésions insoupçonnées identifiées lors de la transillumination ou des sites chirurgicaux tels qu’une trabéculectomie), la section est adaptée respectivement. Le résultat visé du sectionnement est une section PO appropriée (Figure 5 et Figure 6).
Un globe terrestre mal sectionné nuit à la corrélation clinicopathologique précise et à l’interprétation des résultats histologiques, ce qui peut avoir un impact sur le suivi des patients. Par exemple, l’un des diagnostics les plus menaçants à considérer est l’ophtalmie sympathique23 , une inflammation granulomateuse bilatérale et chronique de l’uvée pouvant conduire à la cécité de l’œil restant (œil compatissant). Cette entité doit être exclue dans tous les globes et, en particulier, dans les yeux aveugles et douloureux. Comme cela est essentiel pour préserver l’œil restant, des coupes représentatives du globe sont obligatoires pour l’évaluation, de préférence sous forme de coupes PO.
Dans le cas où une incision est faite par erreur à travers toute la cornée au lieu de sectionner la périphérie, soumettez la calotte avec la cornée et le segment antérieur et la section PO échouée. La deuxième calotte doit être retirée comme décrit ci-dessus pour que le globe s’insère dans la cassette. Notamment, les yeux phtisiques peuvent présenter une métaplasie osseuse de l’épithélium pigmentaire rétinien, ce qui rend presque impossible la section du globe. Détartrez le globe dans de l’acide nitrique à 5 % pendant 24 h, suivi d’une solution de sulfate de lithium ou de sodium à 5 % pendant 24 h, stockez-le dans l’eau du robinet pendant 24 à 48 h et essayez à nouveau de couper le globe. Répétez le détartrage jusqu’à ce que le globe puisse être sectionné. Enfin, une photodocumentation de chaque globe doit être effectuée. Ce n’est pas seulement pour des raisons médico-légales, mais aussi utile si des résultats histologiques inattendus se produisent.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67944/67944fig01.jpg"> 
Figure 1 : Organigramme pour la préparation, l’orientation et la coupe d’yeux non tumoraux énumérant les étapes pertinentes d’une approche de type liste de contrôle. Abréviation : LED = diode électroluminescente. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67944/67944fig01large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67944/67944fig02.jpg"> 
Figure 2 : Orientation. La cornée est clairement visible depuis une vue antérieure. (A) Les insertions des quatre muscles droits sont mises en évidence par des pointes de flèches. (B) Le nerf optique (astérisque) est visible depuis une vue postérieure. La longue artère ciliaire (flèche) marque le méridien horizontal. L’insertion typiquement charnue du muscle oblique inférieur (pointe de flèche) est à peu près temporale. Deux des veines du vortex sont mises en évidence par de fines flèches. (C) L’insertion tendineuse du muscle oblique supérieur (pointe de flèche) se fait de manière supérieure entre le muscle droit supérieur et le nerf optique. Une veine vortex est marquée par une fine flèche. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67944/67944fig02large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67944/67944fig03.jpg"> 
Figure 3 : Grossage. (A) Mesure du diamètre horizontal et vertical en mm (ligne pointillée). Mesure du diamètre de la cornée, et par exemple, du diamètre de la kératoplastie. (B) Mesurez le diamètre antéro-postérieur en mm (ligne rouge) et la longueur du nerf optique (ligne verte). Le nerf optique est sectionné (ligne pointillée) et soumis séparément pour un traitement ultérieur. (C) Transillumination régulière d’un globe par une lumière LED. (D) Lors de la transillumination, une ombre est observée causée par une tumeur choroïdienne (flèche). Abréviation : LED = diode électroluminescente. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67944/67944fig03large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67944/67944fig04.jpg"> 
Figure 4 : Corps étranger extraoculaire. (A) Globe avec une bande/cerclage qui l’entoure (flèche ; le nerf optique est marqué d’un astérisque). (B) Après dissection horizontale, la bande qui l’entoure est toujours attachée au globe (flèches). (C) Multiples applications de corps étrangers externes pour la chirurgie historique du décollement de la rétine composée de plaques (astérisque) et de plusieurs boucles sclérales (flèche). (D) La coupe correspondante de l’hématoxyline et de l’éosine montre l’emplacement intrascléral d’une boucle (flèche) ainsi que l’image négative d’une plaque extrasclérale (astérisque). La cornée est marquée en C et D par une flèche fine et le nerf optique par une pointe de flèche en D. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67944/67944fig04large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67944/67944fig05.jpg"> 
Figure 5 : Sectionnement. (A) Le globe est placé la cornée vers le bas (même œil que sur la figure 2) et (B) les plans de section supérieur (rouge) et inférieur (bleu) sont marqués. (C) Le plan de coupe traverse idéalement la zone périphérique de la cornée/limbe. (D) Après l’ablation de la calotte supérieure, un décollement de la rétine en forme d’entonnoir peut être observé. La section n’est proche que de la cornée périphérique (flèche), mais cela est également suffisant pour l’analyse. (E) L’ablation de la calotte inférieure (notez la cornée périphérique sur la section, flèche) donne la section du nerf pupille-optique prévue. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67944/67944fig05large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67944/67944fig06.jpg"> 
Figure 6 : Sections PO et calottes. (A) Section PO, (B) Calotte supérieure et (C) Calotte inférieure. La pars plicata du corps ciliaire est mise en évidence par des flèches en B et C. Les calories sans détails cliniquement pertinents n’ont pas besoin d’être traitées ultérieurement et sont archivées à la place. Abréviation : PO = nerf pupille-optique. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67944/67944fig06large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67944/67944fig07.jpg"> 
Figure 7 : Yeux fœtaux et microphtalmiques. (A) Œil fœtal régulier, 21 semaines de gestation et 10 mm de diamètre AP. (B) En poussant doucement avec des pinces, on découvre la longue artère ciliaire postérieure (pointes de flèches), qui indique le méridien horizontal. (C) Après la bissection, les structures intraoculaires peuvent être inspectées, y compris l’artère hyaloïde (flèche). (D) Œil microphtalique d’un adulte. La cornée est mise en évidence par une flèche. (E) Les globes ont été coupés en deux ; La longue artère ciliaire postérieure n’a pas pu être identifiée. Abréviation : AP = antériopostérieur. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67944/67944fig07large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
<img alt="Figure 8" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67944/67944fig08.jpg"> 
Figure 8 : Incision coronale. Une incision coronale est utile si l’imagerie post-mortem du fond d’œil est prévue. Lors de la transillumination, la pars plana du corps ciliaire peut être identifiée comme une structure circulaire en forme de bande. (A) À l’aide d’un scalpel, une incision circulaire est pratiquée dans la zone de la pars plana (ligne pointillée) et le segment antérieur est retiré. (B) La rétine et le nerf optique peuvent être documentés et imagés. (C) Le segment antérieur est ensuite examiné séparément. (D) Section horizontale avec segment antérieur enlevé. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67944/67944fig08large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
Figure supplémentaire S1 : Unité de microscope de dissection. Unité de travail avec un microscope de chirurgie ophtalmique mis au rebut. (A) Un tuyau LED (flèche) et l’équipement nécessaire au dégrossage et au sectionnement. Les matériaux nécessaires sont (B) une règle, une règle d’étrier, une pince et (C) des lames de microtome/rasoir. Pour la coupe de globes adultes, il est recommandé d’utiliser des lames de microtome (à droite) ; Pour les yeux fœtaux ou d’autres échantillons oculaires, des lames de rasoir (à gauche) suffisent. (D) Microscope de dissection avec une caméra connectée pour documenter l’échantillon. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67944/suppl%20figure.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour télécharger ce fichier.</a>

Grossissement de globes non néoplasiques, y compris les yeux fœtaux

Grossing and sectioning of fetal and adult globes are critical steps in the histopathologic evaluation of ocular diseases. Proper handling of the globe is ...

Mes recherches portent sur la pathologie ophtalmique, qui comprend les corrélations pathologiques cliniques et la recherche fondamentale sur le mélanome uvéal. Jusqu’à présent, j’ai décrit plusieurs corrélations pathologiques cliniques, par exemple sur l’atrophie du nerf optique de Schnabel, ainsi que des résultats post-opératoires après réticulation cornéenne et implants sous-rétiniens. L’inspection macroscopique et la coupe d’un globe sont assez difficiles. Nos protocoles devraient aider les pathologistes à identifier les structures oculaires critiques et à sectionner correctement un globe sans tumeur.[Instructeur] Pour commencer, rassemblez tous les éléments requis pour la procédure. Tout d’abord, identifiez les quatre muscles droits dans l’échantillon du globe oculaire. Et puis identifiez le muscle oblique supérieur par son apparence de sensibilité lorsqu’il s’insère dans la sclérotique sur la surface postérotemporale du globe. Ensuite, identifiez le muscle oblique inférieur, qui s’insère temporal en dessous dans la sclérotique entre le muscle droit latéral et le nerf optique. Après avoir identifié l’artère ciliaire postérieure longue, déterminez la latéralité du globe avec précision en vous basant sur les muscles obliques supérieurs et obliques inférieurs et l’artère ciliaire postérieure longue. À l’aide d’un pied à coulisse, mesurez les diamètres antérieur, postérieur, horizontal et vertical du globe en millimètres. Examinez et décrivez toute anomalie sur la surface externe du globe, y compris les cicatrices, les sutures, les matériaux étrangers ou les déformations. Ensuite, mesurez la cornée dans ses diamètres horizontal et vertical en millimètres. Décrivez les caractéristiques de la cornée, y compris la transparence, la présence de cicatrices, les signes de kératoplastie, les sutures ou la vascularisation. Dans ce globe, il y a un staphylome antérieur en haut. Mesurez la longueur du nerf optique et notez toute anomalie, telle que des hémorragies dans les gaines. Faites une coupe transversale à travers le nerf optique si possible, et soumettez-la séparément à l’examen histologique. Maintenant, transilluminez le globe à l’aide d’un tuyau LED pour mettre en évidence les défauts de l’iris, et dans ce cas précis, le staphylome antérieur. Dans ce cas, il y a une ombre nasale. Effectuer une documentation photographique de l’ensemble du globe. À l’aide d’un stylo, marquez le méridien vertical ou le plan de section souhaité de manière à ce que la section passe près du nerf optique et de la cornée périphérique. À l’aide d’une lame microtone, sectionnez le globe le long de la ligne marquée tout en le fixant de l’autre main. Retirez le culot et vérifiez qu’il n’y a pas d’anomalies. Stocké dans du formol ou soumis à un traitement histologique. Maintenant, inspectez les structures oculaires internes, y compris la chambre antérieure, l’état du cristallin, l’iris, le corps ciliaire, la choroïde, la rétine et le nerf optique. La sclérotique est observée pour des anomalies, comme un épaississement ou une atrophie. Dans cette zone, la sclérotique est amincie correspondant au staphylome antérieur. Il n’y a pas de lentille et l’arrière de l’iris est visible directement. Le corps ciliaire a une membrane cyclique. La rétine est généralement détachée après l’énucléation. Le nerf optique atrophique peut être visualisé avec la macula. Et il y a une zone pigmentée dans la choroïde. Tenez le globe maintenant ouvert et sectionnez-le parallèlement au nerf optique, mais au-dessus. Encore une fois, viser à travers la cornée périphérique. Retirez ensuite le culot et vérifiez qu’il n’y a pas d’anomalies restantes. Stockez ou soumettez l’échantillon pour analyse histologique. Enfin, effectuez une documentation photographique de la section du nerf optique pupillaire et soumettez-la à un traitement ultérieur. De multiples applications de corps étrangers externes pour la chirurgie historique du décollement de la rétine ont été réalisées pour un échantillon composé de plaques et de plusieurs boucles sclérales. La coupe correspondante colorée à l’hématoxyline et à l’éosine a montré la localisation intrasclérale d’une buccale, ainsi que l’image négative d’une plaque sclérale supplémentaire. Le résultat visé de la section était une section appropriée du nerf optique nymphal.

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