Name: Étude de la mort cellulaire programmée induite par les nanoparticules de cuivre chez les bactéries (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-05-16T13:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 22 s
Description: Découvrez l'efficacité bactéricide des nanoparticules de cuivre contre trois pathogènes bactériens cliniques. Cette méthode explore la génération d'espèces réactives de l'oxygène et les voies de mort cellulaire programmée impliquées.

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<ol><li>Anees Ahmad, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bactericidal+activity+of+silver+nanoparticles%3A+A+mechanistic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Mater+Sci+Energy+Technol%22%5BJournal%5D)">Bactericidal activity of silver nanoparticles: A mechanistic review.</a> Mater Sci Energy Technol. 3, 756-769 (2020).</li>
<li>Zhang, Y., Shareena Dasari, T. P., Deng, H., Yu, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antimicrobial+activity+of+gold+nanoparticles+and+ionic+gold%5BTitle%5D)+AND+%22J+Environ+Sci+Health+C+Environ+Carcinog+Ecotoxicol+Rev%22%5BJournal%5D)">Antimicrobial activity of gold nanoparticles and ionic gold.</a> J Environ Sci Health C Environ Carcinog Ecotoxicol Rev. 33 (3), 286-327 (2015).</li>
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<li>Ma, X., Zhou, S., Xu, X., Du, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Copper-containing+nanoparticles%3A+Mechanism+of+antimicrobial+effect+and+application+in+dentistry-a+narrative+review%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Surg%22%5BJournal%5D)">Copper-containing nanoparticles: Mechanism of antimicrobial effect and application in dentistry-a narrative review.</a> Front Surg. 9, 905892(2022).</li>
<li>Draviana, H. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Size+and+charge+effects+of+metal+nanoclusters+on+antibacterial+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nanobiotechnology%22%5BJournal%5D)">Size and charge effects of metal nanoclusters on antibacterial mechanisms.</a> J Nanobiotechnology. 21 (1), 428(2023).</li>
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<li>Macomber, L., Imlay, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+iron-sulfur+clusters+of+dehydratases+are+primary+intracellular+targets+of+copper+toxicity%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">The iron-sulfur clusters of dehydratases are primary intracellular targets of copper toxicity.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 106 (20), 8344-8349 (2009).</li>
<li>Ramos-Zúñiga, J., Bruna, N., Pérez-Donoso, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toxicity+mechanisms+of+copper+nanoparticles+and+copper+surfaces+on+bacterial+cells+and+viruses%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Toxicity mechanisms of copper nanoparticles and copper surfaces on bacterial cells and viruses.</a> Int J Mol Sci. 24 (13), ijms241310503(2023).</li>
<li>Ihara, M., Shichijo, K., Takeshita, S., Kudo, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wortmannin%2C+a+specific+inhibitor+of+phosphatidylinositol-3-kinase%2C+induces+accumulation+of+DNA+double-strand+breaks%5BTitle%5D)+AND+%22J+Radiat+Res%22%5BJournal%5D)">Wortmannin, a specific inhibitor of phosphatidylinositol-3-kinase, induces accumulation of DNA double-strand breaks.</a> J Radiat Res. 61 (2), 171-176 (2020).</li>
<li>Yang, Y. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+and+interpretation+of+current+autophagy+inhibitors+and+activators%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Pharmacol+Sin%22%5BJournal%5D)">Application and interpretation of current autophagy inhibitors and activators.</a> Acta Pharmacol Sin. 34 (5), 625-635 (2013).</li>
<li>Li, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+caspase+inhibitor+Z-VAD-FMK+alleviates+endotoxic+shock+via+inducing+macrophages+necroptosis+and+promoting+MDSCs-mediated+inhibition+of+macrophages+activation%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">The caspase inhibitor Z-VAD-FMK alleviates endotoxic shock via inducing macrophages necroptosis and promoting MDSCs-mediated inhibition of macrophages activation.</a> Front Immunol. 10, 1824(2019).</li>
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<li>Greene, N. P., Koronakis, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bacterial+metal+resistance%3A+Coping+with+copper+without+cooperativity%5BTitle%5D)+AND+%22mBio%22%5BJournal%5D)">Bacterial metal resistance: Coping with copper without cooperativity.</a> mBio. 12 (3), e0065321(2021).</li>
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</ol>

<table><tbody><tr><td>Acinetobacter baumannii souche Bouvet et Grimont&nbsp ;</td><td>American Type Culture Collection (ATCC), Manassas, VA, États-Unis</td><td>17978</td><td>Bactéries pour l’expérience de toxocité CuNP</td></tr><tr><td>Bio-Rad iMark Lecteur de microplaques</td><td>Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA, États-Unis</td><td>168-1130</td><td>Utilisé pour mesurer l’absorbance dans les essais de viabilité bactérienne.</td></tr><tr><td>diacétate de 2',7'-dichlorodihydrofluorescéine perméable aux cellules&nbsp ; (H2DCFDA)</td><td>Sigma-Aldrich, Saint Louis, MO, États-Unis</td><td>D6883</td><td>Utilisé pour détecter les espèces réactives de l’oxygène (ROS) dans les cellules bactériennes traitées.</td></tr><tr><td>Nanoparticules de cuivre (CuNPs) 25 nm</td><td>Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, États-Unis</td><td>774081</td><td>Utilisé pour préparer une solution mère de CuNP</td></tr><tr><td>Nanoparticules de cuivre (CuNPs) 60-80 nm</td><td>Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, États-Unis</td><td>774103 Utilisé</td><td>pour préparer une solution mère de CuNP</td></tr><tr><td>Escherichia coli (Migula) Castellani and Chalmers</td><td>American Type Culture Collection (ATCC), Manassas, VA, USA</td><td>25922</td><td>Bactérie pour l’expérience de toxocité CuNP</td></tr><tr><td>Cytomètre en flux Gallios</td><td>Beckman Coulter, Brea, CA, États-Unis</td><td></td><td>Utilisé pour l’analyse cytométrique en flux dans de multiples expériences, y compris la détection d’espèces réactives de l’oxygène.</td></tr><tr><td>LB</td><td>agar FocusBio, Miaoli, Taïwan</td><td>LBA500</td><td>Utilisé pour la culture de bactéries</td></tr><tr><td>Luria-Bertani (LB)</td><td>bouillon Becton, Dickinson and Company, Sparks, MD, USA</td><td>244620</td><td>Utilisé pour la culture</td></tr><tr><td>de bactéries Necrosulfonamide (NSA)</td><td>Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA</td><td>480073</td><td>Utilisé comme modulateur pour le prétraitement dans les études de voie de mort bactérienne.</td></tr><tr><td>PrestoBlue Réactif de viabilité cellulaire</td><td>Invitrogen, Carlsbad, CA, USA</td><td>P50200</td><td>Utilisé pour évaluer la viabilité cellulaire par fluorescence.</td></tr><tr><td>SBI-0206965 (SBI)</td><td>BioVision, Milpitas, CA, USA</td><td>9580</td><td>Utilisé comme modulateur pour le prétraitement dans les études sur la voie de mort bactérienne.</td></tr><tr><td>Dodécylsulfate de sodium (SDS)</td><td>Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA</td><td>L4509</td><td>Utilisé comme dispersant pour les nanoparticules de cuivre afin de réduire l’agrégation.</td></tr><tr><td>Staphylococcus aureus</td><td>American Type Culture Collection (ATCC), Manassas, VA, États-Unis Bioresource Collection and Research Center (BCRC), Hsinchu, Taïwan</td><td>13567</td><td>Bactéries pour l’expérience de toxocité CuNP</td></tr><tr><td>Lecteur de microplaques multimode Varioskan LUX</td><td>Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, États-Unis</td><td>VLBLATGD2</td><td>Utilisé pour mesurer la fluorescence dans les tests de viabilité cellulaire</td></tr><tr><td>Wortmannin (Wort)</td><td>Abcam, MA, USA</td><td>ab120148</td><td>Utilisé comme modulateur pour le prétraitement dans les études de voie de mort bactérienne.</td></tr><tr><td>Z-VAD-FMK (Z-VAD)</td><td>sigma-Aldrich, St. Louis, MO, États-Unis</td><td>V116</td><td>Utilisé comme modulateur pour le prétraitement dans les études de voies de mort bactérienne.</td></tr></tbody></table>

Étude de la mort cellulaire programmée induite par les nanoparticules de cuivre chez les bactéries

Studying Copper Nanoparticle-Induced Programmed Cell Death in Bacteria

Activités antimicrobiennes de CuNP de deux tailles chez trois agents pathogènes Trois agents pathogènes opportunistes (E. coli, S. aureus et A. baumannii) ont été utilisés pour tester les activités bactéricides des CuNP. Les bactéries ont été traitées avec des concentrations de 0 μg/mL, 1 μg/mL, 5 μg/mL, 10 μg/mL, 50 μg/mL et 100 μg/mL de CuNP de 20 nm ou de 60 nm, et les activités bactéricides ont été déterminées à l’aide de la concentration bactéricide minimale (MBC) dériv...

Recently, concerns over multidrug-resistant pathogens and incurable infections have increased due to the overuse and misuse of antibiotics. Nanomaterials, ...

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Dans cet article, nous décrivons une méthode utilisant multi-spectrale cytométrie de flux d'imagerie pour quantifier l'internalisation des nanoparticules ou des bactéries polyanhydride par des cellules RAW 264.7.

Analyser l&#39;internalisation cellulaire de nanoparticules et de bactéries multi-spectrale par cytométrie de flux d&#39;imagerie

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Solubilisation et Bio-conjugaison de Quantum Dots et des tests de toxicité bactériennes par la courbe de croissance et le comte Plate

Source : Zhang, Y., et al. Application de nanoparticules fluorescentes pour étudier le remodelage du système endo-lysosomal par des bactéries intracellulaires. J. Vis. Exp. (2015)Cette vidéo démontre l’utilisation de nanoparticules fluorescentes pour visualiser le remodelage endo-lysosomal dans les cellules épithéliales humaines infectées par des bactéries intracellulaires. À la suite d’une invasion bactérienne, les agents pathogènes manipulent le cytosquelette de l’hôte et le système...

Visualisation médiée par des nanoparticules du remodelage endo-lysosomal dans des cellules infectées par des bactéries

Prenons des tubes avec un support contenant un composite de nanoparticules, conçu à partir d’une combinaison de métaux de transition et de carbone.Introduire les bactéries pathogènes Gram-positives et Gram-négatives résistantes aux antibiotiques dans des tubes séparés comme échantillons d’analyse.Inclure les bactéries non traitées comme témoins négatifs et les bactéries traitées par antibiotiques comme témoins positif.Incubez les échantillons en secouant.Chez les bactéries à Gram négatif, la...

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Les populations microbiennes contiennent hétérogénéité cellulaire importante, qui peut dicter le comportement global. L'analyse de la sonde moléculaire par cytométrie en flux peut déterminer états physiologiques de cellules, mais son application varie selon les espèces. Cette étude fournit un protocole de déterminer avec précision la mortalité cellulaire dans une population de cyanobactérie, sans sous-estimer ou l'enregistrement des résultats faussement positifs.

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