Name: Un test TCID50, rationalisé, sans marqueur, sans marqueur, à la dose infectieuse de culture tissulaire de 50 %, utilisant l’impédance pour la quantification automatisée des titres viraux (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-01-09T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 1 s
Description: Découvrez un test TCID50 rationalisé sans marqueur utilisant l'impédance pour la quantification automatisée des titres viraux. Cette méthode permet un suivi en temps réel des effets cytopathogènes avec une grande précision.

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<ol><li>Smither, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+the+plaque+assay+and+50%25+tissue+culture+infectious+dose+assay+as+methods+for+measuring+filovirus+infectivity%5BTitle%5D)+AND+%22J+Virol+Methods%22%5BJournal%5D)">Comparison of the plaque assay and 50% tissue culture infectious dose assay as methods for measuring filovirus infectivity.</a> J Virol Methods. 193 (2), 565-571 (2013).</li>
<li>Pourianfar, H. R., Javadi, A., Grollo, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+colorimetric-based+accurate+method+for+the+determination+of+enterovirus+71+titer%5BTitle%5D)+AND+%22Indian+J+Virol%22%5BJournal%5D)">A colorimetric-based accurate method for the determination of enterovirus 71 titer.</a> Indian J Virol. 23 (3), 303-310 (2012).</li>
<li>Hochdorfer, D., Businger, R., Hotter, D., Seifried, C., Solzin, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated%2C+label-free+TCID50+assay+to+determine+the+infectious+titer+of+virus-based+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22J+Virol+Methods%22%5BJournal%5D)">Automated, label-free TCID50 assay to determine the infectious titer of virus-based therapeutics.</a> J Virol Methods. 299, 114318(2022).</li>
<li>Lei, C., Yang, J., Hu, J., Sun, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On+the+Calculation+of+TCID50+for+quantitation+of+virus+infectivity%5BTitle%5D)+AND+%22Virol+Sin%22%5BJournal%5D)">On the Calculation of TCID50 for quantitation of virus infectivity.</a> Virol Sin. 36 (1), 141-144 (2021).</li>
<li>Giaever, I., Keese, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Micromotion+of+mammalian+cells+measured+electrically%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Micromotion of mammalian cells measured electrically.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 88 (17), 7896-7900 (1991).</li>
<li>Atienza, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+and+label-free+cell-based+assays+using+the+real-time+cell+electronic+sensing+system%5BTitle%5D)+AND+%22Assay+Drug+Dev+Technol%22%5BJournal%5D)">Dynamic and label-free cell-based assays using the real-time cell electronic sensing system.</a> Assay Drug Dev Technol. 4 (5), 597-607 (2006).</li>
<li>Cheung, C. Y., Leung, C. K., Peiris, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potential+of+the+real-time+and+label-free+cell+sensor+impedance+technology+to+transform+cell-based+infectivity+assays+for+influenza+viruses%5BTitle%5D)+AND+%22Influenza+Other+Respir+Viruses%22%5BJournal%5D)">Potential of the real-time and label-free cell sensor impedance technology to transform cell-based infectivity assays for influenza viruses.</a> Influenza Other Respir Viruses. 5 (Suppl 1), 151-154 (2011).</li>
<li>Ebersohn, K., Coetzee, P., Venter, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+improved+method+for+determining+virucidal+efficacy+of+a+chemical+disinfectant+using+an+electrical+impedance+assay%5BTitle%5D)+AND+%22J+Virol+Methods%22%5BJournal%5D)">An improved method for determining virucidal efficacy of a chemical disinfectant using an electrical impedance assay.</a> J Virol Methods. 199, 25-28 (2014).</li>
<li>Goh, V. S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+three+alternative+methods+to+the+plaque+reduction+neutralizing+assay+for+measuring+neutralizing+antibodies+to+dengue+virus+serotype+2%5BTitle%5D)+AND+%22Virology+J%22%5BJournal%5D)">Evaluation of three alternative methods to the plaque reduction neutralizing assay for measuring neutralizing antibodies to dengue virus serotype 2.</a> Virology J. 21 (1), (2024).</li>
<li>Crisostomo, L., Soriano, A. M., Mendez, M., Graves, D., Pelka, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporal+dynamics+of+adenovirus+5+gene+expression+in+normal+human+cells%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+One%22%5BJournal%5D)">Temporal dynamics of adenovirus 5 gene expression in normal human cells.</a> PLOS One. 14 (1), e0211192(2019).</li>
<li>Wang, T. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differentiation+of+cytopathic+effects+%28CPE%29+induced+by+influenza+virus+infection+using+deep+convolutional+neural+networks+%28CNN%29%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Comput+Biol%22%5BJournal%5D)">Differentiation of cytopathic effects (CPE) induced by influenza virus infection using deep convolutional neural networks (CNN).</a> PLoS Comput Biol. 16 (5), e1007883(2020).</li>
<li>Witkowski, P. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+impedance+measurement+as+a+new+tool+for+poxvirus+titration%2C+antibody+neutralization+testing+and+evaluation+of+antiviral+substances%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Res+Commun%22%5BJournal%5D)">Cellular impedance measurement as a new tool for poxvirus titration, antibody neutralization testing and evaluation of antiviral substances.</a> Biochem Biophys Res Commun. 401 (1), 37-41 (2010).</li>
<li>Fang, Y., Ye, P., Wang, X., Xu, X., Reisen, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Real-time+monitoring+of+flavivirus+induced+cytopathogenesis+using+cell+electric+impedance+technology%5BTitle%5D)+AND+%22J+Virol+Methods%22%5BJournal%5D)">Real-time monitoring of flavivirus induced cytopathogenesis using cell electric impedance technology.</a> J Virol Methods. 173 (2), 251-258 (2011).</li>
<li>Marlina, S., Shu, M. -H., Abubakar, S., Zandi, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+real-time+cell+analysing+%28RTCA%29+method+as+a+fast+and+accurate+screen+for+the+selection+of+chikungunya+virus+replication+inhibitors%5BTitle%5D)+AND+%22Parasites+%26+Vectors%22%5BJournal%5D)">Development of a real-time cell analysing (RTCA) method as a fast and accurate screen for the selection of chikungunya virus replication inhibitors.</a> Parasites & Vectors. 8 (1), (2015).</li>
<li>Charretier, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Robust+real-time+cell+analysis+method+for+determining+viral+infectious+titers+during+development+of+a+viral+vaccine+production+process%5BTitle%5D)+AND+%22J+Virol+Methods%22%5BJournal%5D)">Robust real-time cell analysis method for determining viral infectious titers during development of a viral vaccine production process.</a> J Virol Methods. 252, 57-64 (2018).</li>
<li>Lebourgeois, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+real-time+cell+analysis+%28RTCA%29+method+as+a+fast+and+accurate+method+for+detecting+infectious+particles+of+the+adapted+strain+of+Hepatitis+A+virus%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Infect+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Development of a real-time cell analysis (RTCA) method as a fast and accurate method for detecting infectious particles of the adapted strain of Hepatitis A virus.</a> Front Cell Infect Microbiol. 8, (2018).</li>
<li>Suryadevara, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Real-time+cell+analysis%3A+A+high-throughput+approach+for+testing+SARS-CoV-2+antibody+neutralization+and+escape%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Real-time cell analysis: A high-throughput approach for testing SARS-CoV-2 antibody neutralization and escape.</a> STAR Protoc. 3 (2), 101387(2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0,05 % de trypsine 0,53 mM EDTA&nbsp ; (1x)</td><td>Corning</td><td>25-052-CI</td><td></td></tr><tr><td>12 réservoirs de réactifs du canal</td><td>VistaLab Technologies</td><td>3054-1011</td><td></td></tr><tr><td>Adénovirus-GFP</td><td>Vector Biolabs&nbsp ;</td><td>1060</td><td></td></tr><tr><td>Médium DMEM</td><td>ATCC</td><td>30-2002</td><td></td></tr><tr><td>E-Plate VIEW 96</td><td>Agilent</td><td>300601020</td><td></td></tr><tr><td>Sérum bovin fœtal</td><td>Avantor</td><td>97068-085</td><td></td></tr><tr><td>Cellule Hek293A</td><td>Thermo Fisher Scientific & nbsp ;</td><td>&nbsp ; R70507</td><td></td></tr><tr><td>Solution de pénicilline-streptycine</td><td>HyClone</td><td>SV30010</td><td></td></tr><tr><td>Solution tampon phosphate (1x)</td><td>HyClone</td><td>SH30256.01</td><td></td></tr><tr><td>Seaplaque agarose</td><td>Lonza</td><td>50101</td><td></td></tr><tr><td>Système eSight xCELLigence RTCA</td><td>Agilent</td><td>S2833AA</td><td></td></tr><tr><td>Système MP RTCA xCELLigence</td><td>Agilent</td><td>380601040</td><td></td></tr></tbody></table>

un test tcid50, rationalisé, sans marqueur, sans marqueur, à la dose infectieuse de culture tissulaire de 50 %, utilisant l’impédance pour la quantification automatisée des titres viraux

A Streamlined, Label-Free Real-Time 50% Tissue Culture Infectious Dose (TCID50) Assay using Impedance for Automated Viral Titer Quantification

Un test TCID50, rationalisé, sans marqueur, sans marqueur, à la dose infectieuse de culture tissulaire de 50 %, utilisant l’impédance pour la quantification automatisée des titres viraux

Measuring the viral titer, the concentration of a virus in a sample, is a fundamental procedure in virology research. While essential, traditional methods ...

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Immunology and Infection

Immunologie et infection

Dans cette vidéo, nous démontrons une méthode alternative de détection et de titrage de virus en utilisant une technique de détection d'antigènes enzymatique connu sous le nom d'un dosage immuno. Ici, nous allons vous montrer comment collecter vos échantillons viraux, préparer les cellules pour les tests, et enfin le dosage immuno utilisant des dilutions en série pour déterminer le titre viral.

Le titrage de coronavirus humains en utilisant un dosage immunoperoxydase

Pour faire des lentivirus, des vecteurs d'ADN sont transfectés dans les cellules humaines 293. Après la récolte et la concentration du surnageant, le titre viral est déterminé par l'expression de fluorescence avec un cytomètre en flux.

La production de lentivirus

Cette méthode décrit l'utilisation de système d'imagerie infrarouge à base de colorants pour la détection du virus H1N1 dans broncho-alvéolaire (LBA) des souris infectées avec une sensibilité élevée. Cette méthodologie peut être effectuée dans un 96 - ou 384 puits de plaque, il faut &lt;volume de 10 ul de matériel d'essai et a le potentiel pour le dépistage simultané de plusieurs agents pathogènes.

Méthode de détection à haut débit pour les virus de la grippe

Source: Fout, G. S., Cashdollar, J. L. EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. II. Total Culturable Virus Assay. J. Vis. Exp. (2016)This video demonstrates the use of a total culturable virus assay to quantify infectious viruses in water samples. It outlines host cell inoculation, observation of cytopathic effect, and statistical quantification of infectious virus concentration.

Quantifying Infectious Viruses in Water Samples Using an In Vitro Total Culturable Virus Assay

Dans cette vidéo, nous abordons la corrélation entre le CIT50 et la multiplicité des infections virales. Les cellules infectées par le virus présentent des effets cytopathiques, provoquant leur mort et leur détachement de la microélectrode d’or, ce qui réduit l’impédance.

Dosage cellulaire basé sur l’impédance pour mesurer la multiplicité de l’infection du virus de la grippe

Cet article présente une méthode basée sur l’expression de la luciférase à haut débit pour titrer divers virus à ARN et à ADN à l’aide de manipulateurs de liquides automatisés et manuels.

Le titrage à haut débit de la luciférase-virus recombinants exprimant

Cette étude décrit un   à base d'imagerie-dosage micro-neutralisation pour analyser les relations antigéniques entre les virus. Le protocole utilise un scanner à plat et comporte quatre étapes, dont le titrage, titrage quantification, la neutralisation et la neutralisation quantification. Le test fonctionne bien avec un courant circulant de la grippe A (H1N1) pdm09, A (H3N2), et les virus B.

L&#39;optimisation d&#39;un micro-neutralisation quantitative de dosage

Il est rapporté ici un protocole pour la quantification des particules virales infectieuses en utilisant la surveillance en temps réel de l’impédance électrique des cellules infectées. Une application pratique de cette méthode est présentée en quantifiant la désintégration du virus de la grippe A sous différents paramètres physicochimiques imitant les conditions environnementales.

Surveillance de la survie du virus de la grippe à l’extérieur de l’hôte à l’aide d’une analyse cellulaire en temps réel

Ce protocole montre une approche précise et objective pour visualiser les titrages viraux à l’aide de violet cristallin, en le comparant à la microscopie optique et à la coloration immunocytochimique.

Utilisation de Crystal Violet pour améliorer la lecture visuelle basée sur les effets cytopathiques pour la tittration virale à l’aide des tests TCID50

Le présent protocole décrit la propagation du virus Zika (ZIKV) dans les cellules rénales de singes verts d’Afrique et la quantification du virus Zika à l’aide de méthodes d’immunodétection colorimétrique cellulaires dans des formats à 24 puits et 96 puits (haut débit).

Propagation des virus et quantification colorimétrique cellulaire

Ici, nous démontrons l’utilisation de l’impédance électrique cellulaire (CEI) comme méthode très simple et directe pour étudier l’infection par le virus Zika et sa réplication dans les cellules humaines en temps réel. En outre, le test CEI est utile pour l’évaluation des composés antiviraux.

Plateforme d’impédance électrique cellulaire pour évaluer les inhibiteurs du virus Zika en temps réel

Découvrez un test TCID50 rationalisé sans marqueur utilisant l'impédance pour la quantification automatisée des titres viraux. Cette méthode permet un suivi en temps réel des effets cytopathogènes avec une grande précision.

Un test TCID50, rationalisé, sans marqueur, sans marqueur, à la dose infectieuse de culture tissulaire de 50 %, utilisant l’impédance pour la quantification automatisée des titres viraux (Vidéo) | JoVE Journal

Un test TCID50, rationalisé, sans marqueur, sans marqueur, à la dose infectieuse de culture tissulaire de 50 %, utilisant l’impédance pour la quantification automatisée des titres viraux

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