Name: Modèle d’injection mini-invasive de citerne magna pour les études de métastases leptoméningées chez la souris (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-05-23T14:25:00.000+00:00
Duration: 7 min 14 s
Description: Découvrez une méthode d'injection mini-invasive par ponction percutanée dans la citerne magna pour induire des métastases leptoméningées chez la souris. Cette approche réduit significativement le traumatisme et la charge tumorale extracérébrale.

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<ol><li>Wilcox, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leptomeningeal+metastases+from+solid+tumors%3A+A+Society+for+Neuro-Oncology+and+American+Society+of+Clinical+Oncology+consensus+review+on+clinical+management+and+future+directions%5BTitle%5D)+AND+%22Neuro+Oncol%22%5BJournal%5D)">Leptomeningeal metastases from solid tumors: A Society for Neuro-Oncology and American Society of Clinical Oncology consensus review on clinical management and future directions.</a> Neuro Oncol. 26 (10), 1781-1804 (2024).</li>
<li>Wasserstrom, W. R., Glass, J. P., Posner, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnosis+and+treatment+of+leptomeningeal+metastases+from+solid+tumors%3A+experience+with+90+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer%22%5BJournal%5D)">Diagnosis and treatment of leptomeningeal metastases from solid tumors: experience with 90 patients.</a> Cancer. 49 (4), 759-772 (1982).</li>
<li>Remsik, J., Boire, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+path+to+leptomeningeal+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cancer%22%5BJournal%5D)">The path to leptomeningeal metastasis.</a> Nat Rev Cancer. 24 (7), 448-460 (2024).</li>
<li>Kokkoris, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leptomeningeal+carcinomatosis.+How+does+cancer+reach+the+pia-arachnoid%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer%22%5BJournal%5D)">Leptomeningeal carcinomatosis. How does cancer reach the pia-arachnoid.</a> Cancer. 51 (1), 154-160 (1983).</li>
<li>Remsik, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leptomeningeal+metastatic+cells+adopt+two+phenotypic+states%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Rep%22%5BJournal%5D)">Leptomeningeal metastatic cells adopt two phenotypic states.</a> Cancer Rep. 5 (4), e1236(2022).</li>
<li>Chi, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+cells+deploy+lipocalin-2+to+collect+limiting+iron+in+leptomeningeal+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Cancer cells deploy lipocalin-2 to collect limiting iron in leptomeningeal metastasis.</a> Science. 369 (6501), 276-282 (2020).</li>
<li>Yin, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+molecular+graded+prognostic+assessment+%28molGPA%29+model+specific+for+estimating+survival+in+lung+cancer+patients+with+leptomeningeal+metastases%5BTitle%5D)+AND+%22Lung+Cancer%22%5BJournal%5D)">A molecular graded prognostic assessment (molGPA) model specific for estimating survival in lung cancer patients with leptomeningeal metastases.</a> Lung Cancer. 131, 134-138 (2019).</li>
<li>Li, Y. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leptomeningeal+Metastases+in+Patients+with+NSCLC+with+EGFR+Mutations%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thorac+Oncol%22%5BJournal%5D)">Leptomeningeal Metastases in Patients with NSCLC with EGFR Mutations.</a> J Thorac Oncol. 11 (11), 1962-1969 (2016).</li>
<li>Li, Y. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unique+genetic+profiles+from+cerebrospinal+fluid+cell-free+DNA+in+leptomeningeal+metastases+of+EGFR-mutant+non-small-cell+lung+cancer%3A+a+new+medium+of+liquid+biopsy%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Oncol%22%5BJournal%5D)">Unique genetic profiles from cerebrospinal fluid cell-free DNA in leptomeningeal metastases of EGFR-mutant non-small-cell lung cancer: a new medium of liquid biopsy.</a> Ann Oncol. 29 (4), 945-952 (2018).</li>
<li>Posner, J. B., Chernik, N. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intracranial+metastases+from+systemic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Neurol%22%5BJournal%5D)">Intracranial metastases from systemic cancer.</a> Adv Neurol. 19, 579-592 (1978).</li>
<li>Kuiper, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treatment+and+survival+of+patients+with+EGFR-mutated+non-small+cell+lung+cancer+and+leptomeningeal+metastasis%3A+A+retrospective+cohort+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Lung+Cancer%22%5BJournal%5D)">Treatment and survival of patients with EGFR-mutated non-small cell lung cancer and leptomeningeal metastasis: A retrospective cohort analysis.</a> Lung Cancer. 89 (3), 255-261 (2015).</li>
<li>Tsukada, Y., Fouad, A., Pickren, J. W., Lane, W. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Central+nervous+system+metastasis+from+breast+carcinoma.+Autopsy+study%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer%22%5BJournal%5D)">Central nervous system metastasis from breast carcinoma. Autopsy study.</a> Cancer. 52 (12), 2349-2354 (1983).</li>
<li>Singh, M., Bakhshinyan, D., Venugopal, C., Singh, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preclinical+Modeling+and+Therapeutic+Avenues+for+Cancer+Metastasis+to+the+Central+Nervous+System%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Oncol%22%5BJournal%5D)">Preclinical Modeling and Therapeutic Avenues for Cancer Metastasis to the Central Nervous System.</a> Front Oncol. 7, 220(2017).</li>
<li>Shi, M. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PROTAC+EZH2+degrader-1+overcomes+the+resistance+of+podophyllotoxin+derivatives+in+refractory+small+cell+lung+cancer+with+leptomeningeal+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Cancer%22%5BJournal%5D)">PROTAC EZH2 degrader-1 overcomes the resistance of podophyllotoxin derivatives in refractory small cell lung cancer with leptomeningeal metastasis.</a> BMC Cancer. 24 (1), 504(2024).</li>
<li>Choi, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+bioluminescence+imaging+for+leptomeningeal+dissemination+of+medulloblastoma+in+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Cancer%22%5BJournal%5D)">In vivo bioluminescence imaging for leptomeningeal dissemination of medulloblastoma in mouse models.</a> BMC Cancer. 16 (1), 723(2016).</li>
<li>Zhao, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dura+immunity+configures+leptomeningeal+metastasis+immunosuppression+for+cerebrospinal+fluid+barrier+invasion%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Cancer%22%5BJournal%5D)">Dura immunity configures leptomeningeal metastasis immunosuppression for cerebrospinal fluid barrier invasion.</a> Nat Cancer. 5 (12), 1940-1961 (2024).</li>
<li>Boire, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Complement+Component+3+Adapts+the+Cerebrospinal+Fluid+for+Leptomeningeal+Metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Complement Component 3 Adapts the Cerebrospinal Fluid for Leptomeningeal Metastasis.</a> Cell. 168 (6), 1101-1113.e13 (2017).</li>
<li>Zhang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metastasis+Initiation+Is+Coupled+with+Bone+Remodeling+through+Osteogenic+Differentiation+of+NG2%2B+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Discov%22%5BJournal%5D)">Metastasis Initiation Is Coupled with Bone Remodeling through Osteogenic Differentiation of NG2+ Cells.</a> Cancer Discov. 13 (2), 474-495 (2023).</li>
<li>Louis, K. S., Siegel, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+viability+analysis+using+trypan+blue%3A+manual+and+automated+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Cell viability analysis using trypan blue: manual and automated methods.</a> Methods Mol Biol. 740, 7-12 (2011).</li>
<li>Green, T. R. F., Ortiz, J. B., Harrison, J. L., Lifshitz, J., Rowe, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+Cryosectioning+of+Multiple+Rodent+Brains%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Simultaneous Cryosectioning of Multiple Rodent Brains.</a> J Vis Exp. (139), e58513(2018).</li>
<li>Feldman, A. T., Wolfe, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+Processing+and+Hematoxylin+and+Eosin+Staining%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Tissue Processing and Hematoxylin and Eosin Staining.</a> Methods Mol Biol. 1180, 31-43 (2014).</li>
<li>Shih, A. Y., Mateo, C., Drew, P. J., Tsai, P. S., Kleinfeld, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+polished+and+reinforced+thinned-skull+window+for+long-term+imaging+of+the+mouse+brain%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">A polished and reinforced thinned-skull window for long-term imaging of the mouse brain.</a> J Vis Exp. (61), e3742(2012).</li>
<li>Shih, A. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two-photon+microscopy+as+a+tool+to+study+blood+flow+and+neurovascular+coupling+in+the+rodent+brain%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Two-photon microscopy as a tool to study blood flow and neurovascular coupling in the rodent brain.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 32 (7), 1277-1309 (2012).</li>
<li>Drew, P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+optical+access+through+a+polished+and+reinforced+thinned+skull%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Chronic optical access through a polished and reinforced thinned skull.</a> Nat Methods. 7 (12), 981-984 (2010).</li>
<li>Wilcox, J. A., Li, M. J., Boire, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leptomeningeal+Metastases%3A+New+Opportunities+in+the+Modern+Era%5BTitle%5D)+AND+%22Neurotherapeutics%22%5BJournal%5D)">Leptomeningeal Metastases: New Opportunities in the Modern Era.</a> Neurotherapeutics. 19 (6), 1782-1798 (2022).</li>
<li>Zhang, C., Lowery, F. J., Yu, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intracarotid+Cancer+Cell+Injection+to+Produce+Mouse+Models+of+Brain+Metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Intracarotid Cancer Cell Injection to Produce Mouse Models of Brain Metastasis.</a> J Vis Exp. (120), e55085(2017).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Tubes Eppendorf de 1,5 ml</td><td>Biosharp</td><td>BS-15-M-S</td><td></td></tr><tr><td>Tube à centrifuger de 15 ml</td><td>LABSELECT</td><td>Réf. CT-002-15A</td><td></td></tr><tr><td>Seringue à insuline 31G x 8mm (0.3ml)</td><td>Promismed</td><td>/</td><td></td></tr><tr><td>Foret abrasif</td><td>GLOBALEBIO</td><td>GEGZ-AM1</td><td></td></tr><tr><td>Tapis chauffant pour animaux</td><td>woggee</td><td>/</td><td></td></tr><tr><td>Cryomoule</td><td>Supin</td><td>SP-AB-7 x 7 x 5</td><td></td></tr><tr><td>Crèmes dépilatoires</td><td>Ndayisaba</td><td>1.00023E+11</td><td></td></tr><tr><td>D-Luciférine</td><td>Biologie de l’or</td><td>CHANCE-1G</td><td></td></tr><tr><td>DMEM</td><td>Gibco</td><td>C11995500CP</td><td></td></tr><tr><td>FBS</td><td>Gibco</td><td>10270-106</td><td></td></tr><tr><td>Spectre IVIS</td><td>Étrier</td><td>/</td><td></td></tr><tr><td>Kétamine</td><td>Jiangsu Hengrui Pharmaceuticals Co., Ltd.</td><td>H20193336</td><td></td></tr><tr><td>Température de coupe optimale</td><td>Sakura</td><td>4583-1</td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldéhyde</td><td>SCR</td><td>80096618</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>Servicebio</td><td>G4202-500ML</td><td></td></tr><tr><td>Stylo/streptocoque amphotéricine B</td><td>Gibco</td><td>15140122</td><td></td></tr><tr><td>Rasoir</td><td>Hipidog</td><td>Référence 2103CGMJ3373-GQ22N526</td><td></td></tr><tr><td>Microscope à stéréofluorescence</td><td>Olympe</td><td>/</td><td></td></tr><tr><td>Pinces droites</td><td>Beyotime</td><td>FS019</td><td>Besoin d’être autoclavé</td></tr><tr><td>Ciseaux chirurgicaux</td><td>Beyotime</td><td>FS001</td><td>Besoin d’être autoclavé</td></tr><tr><td>Tête de fixation de souris triangulaire</td><td>Vivoscope Transcend</td><td>TVS-FDM-027</td><td></td></tr><tr><td>TRITC-dextran, MW 70000</td><td>MedChemExpress</td><td>HY-158082C</td><td></td></tr><tr><td>Solution trypsine/EDTA</td><td>Gibco</td><td>25200056</td><td></td></tr><tr><td>Microscopie à balayage laser à deux photons</td><td>Olympe</td><td>/</td><td></td></tr><tr><td>Adhésifs tissulaires Vetbond</td><td>3M</td><td>1469SB</td><td></td></tr><tr><td>Xylazine</td><td>Sigma</td><td>X1126</td><td></td></tr></tbody></table>

modèle d’injection mini-invasive de citerne magna pour les études de métastases leptoméningées chez la souris

Minimally Invasive Cisterna Magna Injection Model for Leptomeningeal Metastasis Studies in Mice

La figure 1 illustre l’emplacement de la souris pour l’injection et le site de ponction en vue latérale et frontale. La figure 2 montre des images représentatives de bioluminescence in vivo d’animaux testés pour générer de la LM par différentes approches. Des cellules LLC1 marquées à la GFP-luciférase ont été injectées dans les animaux par différentes voies, suivies d’une imagerie bioluminescente. Comme le montre l...

Modèle d’injection mini-invasive de citerne magna pour les études de métastases leptoméningées chez la souris

Leptomeningeal metastasis (LM), the spread of cancer cells into the cerebrospinal fluid (CSF)-filled leptomeninges, is a rare yet devastating complication ...

Métastases leptoméningées, c’est une forme très grave et mortelle de maladie métastatique. Son environnement dépend probablement de l’interaction entre les cellules tumorales et le microenvironnement tissulaire unique. Modèles animaux, il est très essentiel d’étudier le mécanisme sous-jacent.Pour étudier les métastases leptoméningées in vivo, les chercheurs utilisent couramment des techniques telles que l’artère intra-cardiaque, intra-carotide ou l’injection directe de cellules cancéreuses dans la citerne géante ou les ventricules cérébraux. Ces approches permettent de générer des modèles murins fiables pour la recherche sur la LM. Les tentatives actuelles ont des limites notables. Par exemple, les injections intra-cardiaques produisent souvent des tumeurs en dehors de l’espace leptoméningé et peuvent entraîner des décès sans rapport avec la LM. Alors que les approches carotidiennes sont très invasives et prennent du temps. Ce protocole permet de générer rapidement des modèles LM. Il contourne la barrière hémato-encéphalique, délivre avec précision les cellules tumorales dans l’espace leptoméningé et réduit à la fois les traumatismes chirurgicaux et le temps précieux.[Instructeur]

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Source : Joshi, K., et al. Approche chirurgicale stéréotaxique pour micro-injecter le tronc cérébral caudal et la moelle épinière cervicale supérieure via la citerne grande chez la souris. J. Vis. Exp. (2022)Cette vidéo démontre l’approche stéréotaxique de la citerne magna pour une administration ciblée au tronc cérébral et à la moelle épinière supérieure. En accédant à la citerne magna remplie de liquide céphalo-rachidien, cette approche permet des injections précises dans des zones difficiles...

Approche stéréotaxique de la citerne magna pour l’administration thérapeutique dans un modèle murin

Source : Zamboni, M., et al., Induction de la modification des cellules leptoméningées par injection intracisternale. J. Vis. Exp. (2020)Cette vidéo montre la procédure d’administration d’un médicament inducteur dans la citerne magna d’une souris anesthésiée. L’injection induit sélectivement l’expression de marqueurs fluorescents dans les cellules de surface du cerveau accessibles via le liquide céphalo-rachidien, confirmée par l’imagerie par fluorescence.

Administration ciblée de médicament dans un modèle murin par injection de citerne magna

Dans cette vidéo, nous décrivons la procédure d’administration de cellules tumorales dérivées de l’homme dans la citerne magna du cerveau d’une souris. Le modèle murin orthotopique peut être utilisé pour étudier la propagation métastatique du cancer aux méninges crâniennes.

Injection chirurgicale de citerne magna : une méthode d’administration de cellules tumorales directement dans le système nerveux central d’un modèle murin

Nous décrivons ici un protocole pour effectuer une canulation cisterna magna (MCC), une façon mini-invasive pour livrer les traceurs, les substrats et les molécules de signalisation dans le liquide céphalo-rachidien (LCR). Combiné avec différentes modalités d’imagerie, CMc permet glymphatic système et évaluation dynamique CSF, ainsi que livraison de cerveau à l’échelle des divers composés.

Implantation de la canule dans la Magna de Cisterna de rongeurs

Nous décrivons une injection intracisternale qui emploie une aiguille pliée à la pointe qui peut être stabilisée au crâne, éliminant ainsi le risque de dommages au parenchyme sous-jacent. L’approche peut être utilisée pour la cartographie du destin génétique et les manipulations des cellules leptoméningeales et pour le suivi du mouvement des fluides phériques.

Induction de modification des cellules leptomeningeales par injection intracisterale

La modélisation intracrânienne de métastase de cerveau est compliquée par une incapacité de surveiller la taille et la réponse de tumeur au traitement avec des méthodes précises et opportunes. La méthodologie présentée couple l’injection intracrânienne de tumeur avec l’analyse de formation image de résonance magnétique, qui une fois combinée, cultive des injections précises et cohérentes, la surveillance accrue d’animal, et les mesures précises de volume de tumeur.

Modélisation des métastases cérébrales par injection intracrânienne et imagerie par résonance magnétique

Ici, nous décrivons un modèle de xénogreffe murine qui ressemble fonctionnellement à un réservoir ommaya chez les patients. Nous avons développé le Murine Ommaya pour étudier de nouvelles thérapies pour la maladie leptoméningée universellement mortelle.

Un modèle murin de xénogreffe d’Ommaya pour étudier le traitement ciblé direct de la maladie leptoméningée

Nous décrivons un modèle murin xénogreffé de métastases cérébrales du cancer du sein générées par injection veineuse de la queue d’une lignée cellulaire de cancer inflammatoire du sein amplifiée par HER2 de manière endogène.

Modélisation des métastases cérébrales par injection veineuse de cellules inflammatoires du cancer du sein

Le présent protocole décrit le développement d’un modèle murin reproductible de gliome de la moelle épinière en injectant des cellules tumorales dans l’espace intervertébral, offrant une approche plus efficace et moins invasive pour la recherche et le développement thérapeutique.

Transplantation chirurgicale de cellules tumorales dans la moelle épinière de souris

Ici, un protocole est présenté pour évaluer les vaisseaux lymphatiques méningés (MLV) de la souris, qui jouent un rôle important dans de multiples maladies neurologiques. L’objectif de ce protocole est de fournir une méthode intégrée permettant à la fois l’évaluation fonctionnelle du drainage des traceurs et la caractérisation morphologique détaillée du réseau dorsal des MLV.

Protocole intégré pour l’évaluation des lymphatiques méningées : injection de cisterna magna, imagerie des ganglions lymphatiques, dissection méningée et coloration totale

Découvrez une méthode d'injection mini-invasive par ponction percutanée dans la citerne magna pour induire des métastases leptoméningées chez la souris. Cette approche réduit significativement le traumatisme et la charge tumorale extracérébrale.

Modèle d’injection mini-invasive de citerne magna pour les études de métastases leptoméningées chez la souris

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