Name: In vivo Application du marquage de proximité basé sur TurboID chez Drosophila melanogaster (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-13T13:15:00.000+00:00
Duration: 9 min 59 s
Description: Découvrez le marquage de proximité TurboID pour étudier les interactions protéiques de zucchini dans les cellules germinales de Drosophila melanogaster. Cette méthode permet d'identifier de nouveaux partenaires impliqués dans le repliement protéique et le trafic membranaire.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Kim, D. I., Roux, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Filling+the+void%3A+Proximity-based+labeling+of+proteins+in+living+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Trend+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Filling the void: Proximity-based labeling of proteins in living cells.</a> Trend Cell Biol. 26 (11), 804-817 (2016).</li>
<li>Mair, A., Xu, S. L., Branon, T. C., Ting, A. Y., Bergmann, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proximity+labeling+of+protein+complexes+and+cell-type-specific+organellar+proteomes+in+Arabidopsis+enabled+by+turboid%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Proximity labeling of protein complexes and cell-type-specific organellar proteomes in Arabidopsis enabled by turboid.</a> eLife. 8, e47864(2019).</li>
<li>Qi, Y., Katagiri, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Purification+of+low-abundance+Arabidopsis+plasma-membrane+protein+complexes+and+identification+of+candidate+components%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+J%22%5BJournal%5D)">Purification of low-abundance Arabidopsis plasma-membrane protein complexes and identification of candidate components.</a> Plant J. 57 (5), 932-944 (2009).</li>
<li>Branon, T. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+proximity+labeling+in+living+cells+and+organisms+with+turboid%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Efficient proximity labeling in living cells and organisms with turboid.</a> Nat Biotechnol. 36 (9), 880-887 (2018).</li>
<li>Rhee, H. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proteomic+mapping+of+mitochondria+in+living+cells+via+spatially+restricted+enzymatic+tagging%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Proteomic mapping of mitochondria in living cells via spatially restricted enzymatic tagging.</a> Science. 339 (6125), 1328-1331 (2013).</li>
<li>Roux, K. J., Kim, D. I., Raida, M., Burke, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+promiscuous+biotin+ligase+fusion+protein+identifies+proximal+and+interacting+proteins+in+mammalian+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">A promiscuous biotin ligase fusion protein identifies proximal and interacting proteins in mammalian cells.</a> J Cell Biol. 196 (6), 801-810 (2012).</li>
<li>Quantitative Proteomics. , 
 <a target="_blank" href="https://case.edu/medicine/nutrition/centers-and-collaborations/case-center-proteomics-and-bioinformatics/proteomics-and-small-molecule-mass-spectrometry-core/quantitative-proteomics">https://case.edu/medicine/nutrition/centers-and-collaborations/case-center-proteomics-and-bioinformatics/proteomics-and-small-molecule-mass-spectrometry-core/quantitative-proteomics</a> (2025).</li>
<li>Udeshi, N. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antibodies+to+biotin+enable+large-scale+detection+of+biotinylation+sites+on+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Meth%22%5BJournal%5D)">Antibodies to biotin enable large-scale detection of biotinylation sites on proteins.</a> Nat Meth. 14 (12), 1167-1170 (2017).</li>
<li>Ummethum, H., Hamperl, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proximity+labeling+techniques+to+study+chromatin%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Genet%22%5BJournal%5D)">Proximity labeling techniques to study chromatin.</a> Front Genet. 11, 450(2020).</li>
<li>Han, S., Li, J., Ting, A. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proximity+labeling%3A+Spatially+resolved+proteomic+mapping+for+neurobiology%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Proximity labeling: Spatially resolved proteomic mapping for neurobiology.</a> Curr Opin Neurobiol. 50, 17-23 (2018).</li>
<li>Nishimasu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+and+function+of+zucchini+endoribonuclease+in+pirna+biogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Structure and function of zucchini endoribonuclease in pirna biogenesis.</a> Nature. 491 (7423), 284-287 (2012).</li>
<li>Zamudio, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DNA+methylation+restrains+transposons+from+adopting+a+chromatin+signature+permissive+for+meiotic+recombination%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Dev%22%5BJournal%5D)">DNA methylation restrains transposons from adopting a chromatin signature permissive for meiotic recombination.</a> Genes Dev. 29 (12), 1256-1270 (2015).</li>
<li>Cha, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Therapeutic+modulation+of+gsto+activity+rescues+fus-associated+neurotoxicity+via+deglutathionylation+in+als+disease+models%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Cell%22%5BJournal%5D)">Therapeutic modulation of gsto activity rescues fus-associated neurotoxicity via deglutathionylation in als disease models.</a> Dev Cell. 57 (6), 783-798.e8 (2022).</li>
<li>Pulver, S. R., Berni, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+fundamentals+of+flying%3A+Simple+and+inexpensive+strategies+for+employing+Drosophila+genetics+in+neuroscience+teaching+laboratories%5BTitle%5D)+AND+%22J+Undergrad+Neurosci+Educ%22%5BJournal%5D)">The fundamentals of flying: Simple and inexpensive strategies for employing Drosophila genetics in neuroscience teaching laboratories.</a> J Undergrad Neurosci Educ. 11 (1), A139-A148 (2012).</li>
<li>Feizy, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+identification+of+Drosophila+rhodopsin+interaction+partners+by+biotin+proximity+labeling%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">In vivo identification of Drosophila rhodopsin interaction partners by biotin proximity labeling.</a> Sci Rep. 14 (1), 1986(1986).</li>
<li>Zhang, B., Zhang, Y., Liu, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Highly+effective+proximate+labeling+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22G3%22%5BJournal%5D)">Highly effective proximate labeling in Drosophila.</a> G3. 11 (5), jkab077(2021).</li>
<li>Hudson, A. M., Cooley, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+for+studying+oogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Methods%22%5BJournal%5D)">Methods for studying oogenesis.</a> Methods. 68 (1), 207-217 (2014).</li>
<li>Waring, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morphogenesis+of+the+eggshells+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Int+Rev+Cytol%22%5BJournal%5D)">Morphogenesis of the eggshells in Drosophila.</a> Int Rev Cytol. 198, 67-108 (2000).</li>
<li>Weil, T. T., Parton, R. M., Davis, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparing+individual+drosophila+egg+chambers+for+live+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Preparing individual drosophila egg chambers for live imaging.</a> J Vis Exp. (60), e3679(2012).</li>
<li>Nguyen, T. T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+profiling+of+the+zucchini+proximal+proteome+in+the+Drosophila+ovary%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">In vivo profiling of the zucchini proximal proteome in the Drosophila ovary.</a> Development. 150 (4), dev201220(2023).</li>
<li>Ahmadi, S., Winter, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+poly%28ethylene+glycol%29+and+poly%28ethylene+glycol%29-based+detergents+using+peptide+search+engines%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">Identification of poly(ethylene glycol) and poly(ethylene glycol)-based detergents using peptide search engines.</a> Anal Chem. 90 (11), 6594-6600 (2018).</li>
<li>Zada, A., Khan, I., Zhang, M., Cheng, Y., Hu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Airid-based+proximity+labeling+for+protein-protein+interaction+in+plants%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Airid-based proximity labeling for protein-protein interaction in plants.</a> J Vis Exp. (187), e64428(2022).</li>
<li>Fang, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lowering+sample+requirements+to+study+tyrosine+kinase+signaling+using+phosphoproteomics+with+the+tmt+calibrator+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Proteomics%22%5BJournal%5D)">Lowering sample requirements to study tyrosine kinase signaling using phosphoproteomics with the tmt calibrator approach.</a> Proteomics. 20 (24), 2000116(2020).</li>
<li>Park, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((One-stage+tip+method+for+tmt-based+proteomic+analysis+of+a+minimal+amount+of+cells%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Omega%22%5BJournal%5D)">One-stage tip method for tmt-based proteomic analysis of a minimal amount of cells.</a> ACS Omega. 8 (22), 19741-19751 (2023).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Turboid-based+proximity+labeling+for+in+planta+identification+of+protein-protein+interaction+networks%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Turboid-based proximity labeling for in planta identification of protein-protein interaction networks.</a> J Vis Exp. (159), e60728(2020).</li>
<li>Trinkle-Mulcahy, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+advances+in+proximity-based+labeling+methods+for+interactome+mapping%5BTitle%5D)+AND+%22F1000Res%22%5BJournal%5D)">Recent advances in proximity-based labeling methods for interactome mapping.</a> F1000Res. 8, Faculty Rev-135 F1000(2019).</li>
<li>Wei, X. F., Li, S., Hu, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+turboid-based+proximity+labelling+approach+for+identifying+the+DNA-binding+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">A turboid-based proximity labelling approach for identifying the DNA-binding proteins.</a> STAR Protoc. 4 (1), 102139(2023).</li>
<li>Bosch, J. A., Chen, C. L., Perrimon, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proximity-dependent+labeling+methods+for+proteomic+profiling+in+living+cells%3A+An+update%5BTitle%5D)+AND+%22WIREs+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Proximity-dependent labeling methods for proteomic profiling in living cells: An update.</a> WIREs Dev Biol. 10 (1), e392(2021).</li>
<li>Rayaprolu, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+type-specific+biotin+labeling+in+vivo+resolves+regional+neuronal+and+astrocyte+proteomic+differences+in+mouse+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Cell type-specific biotin labeling in vivo resolves regional neuronal and astrocyte proteomic differences in mouse brain.</a> Nat Commun. 13, 2927(2022).</li>
<li>Uckun, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+profiling+of+the+alk+proximitome+in+the+developing+Drosophila+brain%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">In vivo profiling of the alk proximitome in the developing Drosophila brain.</a> J Mol Biol. 433 (23), 167282(2021).</li>
<li>Xiong, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+proteomic+mapping+through+gfp-directed+proximity-dependent+biotin+labelling+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">In vivo proteomic mapping through gfp-directed proximity-dependent biotin labelling in zebrafish.</a> Elife. 10, e64631(2021).</li>
<li>Holzer, E., Rumpf-Kienzl, C., Falk, S., Dammermann, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+modified+turboid+approach+identifies+tissue-specific+centriolar+components+in+C.+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Genet%22%5BJournal%5D)">A modified turboid approach identifies tissue-specific centriolar components in C. elegans.</a> PLoS Genet. 18 (4), e1010150(2022).</li>
<li>Artan, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interactome+analysis+of+Caenorhabditis+elegans+synapses+by+turboid-based+proximity+labeling%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Interactome analysis of Caenorhabditis elegans synapses by turboid-based proximity labeling.</a> J Biol Chem. 297 (3), 101094(2021).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Turboid-based+proximity+labeling+reveals+that+ubr7+is+a+regulator+of+n+nlr+immune+receptor-mediated+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Comm%22%5BJournal%5D)">Turboid-based proximity labeling reveals that ubr7 is a regulator of n nlr immune receptor-mediated immunity.</a> Nat Comm. 10 (1), 3252(2019).</li>
<li>Baumgartner, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Drosophila+zad+zinc+finger+protein+kipferl+guides+rhino+to+pirna+clusters%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">The Drosophila zad zinc finger protein kipferl guides rhino to pirna clusters.</a> eLife. 11, e80067(2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Anticorps > <forts</forts></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Anticorps secondaires anti-IgG de souris (H+L), HRP</td><td>Invitrogen</td><td>31430</td> Résistance aux IgG (H+L) anti-lapin de chèvre (H+L) de <td>qualité analytique et sensible</td></tr> à la <tr>lumière<td>Anticorps secondaire anti-IgG de lapin (H+L) hautement adsorbé de croisement, alexa fluor plus 488</td><td>Invitrogen</td><td>A32731</td> Anticorps secondaire anti-IgG (H+L) <td>de chèvre de qualité analytique</td></tr><tr><td>sensible à la lumière, HRP</td><td>Invitrogen</td><td>31460</td><td>Qualité analytique, sensible à la lumière</td></tr><tr><td>Anticorps HSP90 (lapin)</td><td>Technologie de signalisation cellulaire</td><td>4874</td><td>Anticorps polyclonal</td></tr><tr><td>Pierce Protéine de streptavidine, HRP</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>21126</td><td>Qualité analytique</td></tr><tr><td>Streptavidine, Conjugué Alexa Fluor 594</td><td>Invitrogen</td><td>S11227</td><td>Sensible à la lumière, qualité</td></tr> <tr><td>analytiqueAnticorps V5-tag (souris)</td><td>Invitrogen</td><td>R960-25</td><td>Anticorps monoclonal</td></tr><tr><td>Anticorps V5-tag (lapin) (D3H8Q)</td><td>Cell Signaling Technology</td><td>13202</td><td>Anticorps monoclonal</td></tr><tr><td>Fly Lines</td><td>Company</td><td><>Numéro de catalogue</td><td>Comments/Description</td></tr><tr><td>pUASp Tom20 V5-TurboID/ TM3</td><td>Korea Drosophila Stock Center</td><td>2373-2</td><td>Crosse</td></tr><tr><td>pUASp Zucchini V5-TurboID/Cyo</td><td>Korea Drosophila Stock Center</td><td>2188</td><td>Crosse</td></tr><tr><td>pUASP_attB_V5-TurboID-NES/Cyo</td><td>Korea Drosophila Stock Center</td><td>2635-4</td><td>Crosse</td></tr><tr><td>w[*] ; P{w[+mC]=matalpha4-GAL-VP16}V2H</td><td>Bloomington Drosophila Stock Center</td><td>7062</td><td>Fly stock</td></tr><tr><td>Equipments and Consommables</td><td>Company</td><td>Numéro de catalogue</td><td>Comments/Description</td></tr><tr><td>Balance analytique</td><td>Mettler Toledo</td><td>ME204</td><td>0,1 mg lisibilité</td></tr><tr><td>Amersham Protran 0.45 NC nitrocellulose western blot membranes (300 mm &times ; 4 m)</td><td>Cytiva</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>10600002-Axygen 1.7 mL MaxyClear Snaplock Microcentrifuge Tube</td><td>Corning</td><td>MCT-175-C</td><td>Co-polymère</td></tr><tr><td>MARQUE&nbsp ; Verre de protection (22 mm x 22 mm)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>BR470055</td><td>Verre borosilicaté</td></tr><tr><td>Pointes de pipette en vrac (10 &micro ; L)</td> <td>Vertex</td><td>4110N00</td><td></td></tr><tr><td>Pointes de pipette en vrac au propylène (1000 & micro ; L)</td><td>Vertex</td><td>4330N00</td><td></td></tr><tr><td>Pointes de pipette en vrac au propylène (200 &micro ; L)</td>Plaque de culture cellulaire au <td>propylène</td> <td>Vertex</td><td>4230N00</td></tr><tr><td>(96 puits)</td><td>Centrifugeuse en</td><td></td><td>polystyrène 300096 à fond plat</td></tr><tr><td>(avec rotor tubulaire de 1,5 à 2 ml)</td><td>Eppendorf</td><td>5424 R</td><td>Centrifugeuse réfrigérée à angle fixe</td></tr><tr><td>(avec rotor tubulaire de 5 ml)</td><td>Eppendorf</td><td>5425 R</td><td>Cuillère chimique réfrigérée à angle fixe</td></tr><tr><td></td><td>-</td><td>- </td><td></td></tr><tr><td>Système d’imagerie ChemiDoc</td> en acier inoxydable Système d’imagerie <td>Biorad</td><td>12003153</td><td>Western blot</td></tr><tr><td>CO2 coussin anti-mouches</td><td>-</td><td>-</td><td>Panneau d’anesthésie</td></tr><tr><td>CO2 et régulateur</td><td>-</td><td>-</td><td>Attention aux gaz à haute pression et aux étourdissements</td></tr><tr><td>Incubateur compact</td><td>JSR</td><td>JSGI-10T</td><td>Attention aux hautes pressions température Microscope</td></tr><tr><td>confocal à balayage laser</td><td>Zeiss</td><td>LSM 710</td><td>Attention au faisceau laser intense</td></tr><tr><td>Tube conique (15 mL)</td><td>SPL</td><td>50015</td><td>Polypropylène /Polyéthylène haute densité&nbsp ;</td></tr><tr><td>Tube conique (50 mL)</td><td>SPL</td><td>50050</td><td>Polypropylène /Polyéthylène haute densité&nbsp ;</td></tr><tr><td>Balance numérique</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td></tr><tr><td>Minuterie numérique</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td></tr><tr><td>Parabole de dissection</td><td>-</td><td>-</td>Pince #5SF <td>en silicone</td></tr><tr><td>Dumont&nbsp ;</td><td>Outils scientifiques fins</td><td>11252-00</td><td>Pointes super fines, prudence des objets pointus</td></tr><tr><td>Aimant DynaMag-2</td><td>Invitrogen</td><td>12321D</td><td>Pour tubes de microcentrifugation de 1,5 à 2 ml</td></tr><tr><td>Fisherbrand&nbsp ; Lames de microscope Superfrost Plus (25 mm x 75 mm)</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-550-15</td><td>Attention aux objets pointus</td></tr><tr><td>Bouteilles de nourriture pour mouches (avec bouchon en papier)</td><td>Hansol Tech</td><td>FFB-21010-Flacons</td><td></td></tr> <tr><td>de nourriture pour mouches (avec bouchon en coton)</td><td>Hansol Tech</td><td>FFV-11010-Focaled-ultrasonicator</td><td></td></tr> <tr><td></td><td>Covaris</td><td>M220</td><td>Attention aux ondes ultrasonores</td></tr><tr><td>Couteau à gel</td><td>Invitrogen</td><td>EI9010</td><td>Acier inoxydable avec poignée en plastique</td></tr><tr><td>Grade 3MM Papier buvard Chr (46 cm &times ; 57 cm)</td><td>Cytiva</td><td>3030-917</td><td>Papier Whatmann</td></tr><tr><td>Homogénéisateur à main et pilon en plastique</td><td>Kimble</td><td>749540-0000</td><td>Moteur sans fil</td></tr><tr><td>Bloc thermique</td><td>PCR fin</td><td>ALB6400</td><td>Attention aux</td></tr><tr><td>tissus non pelucheux</td> à haute température <td>Yuhan-Kimberly</td><td>41112</td><td>- </td></tr><tr><td>Azote liquide</td><td></td><td>--</td><td>Attention aux engelures et aux brûlures</td></tr><tr><td>Spectrophotomètre de microplaques</td><td>Agilent Technologies</td><td>Epoch</td><td>Optique basée sur un monochromateur</td></tr><tr><td>Micro-ondes</td><td></td><td>--</td><td>Attention à haute température</td></tr><tr><td>milliTUBE 1 mL AFA fibre</td><td>Covaris</td><td>PN 520135</td><td>Verre</td></tr><tr><td>Mini réservoir</td><td>de gel Thermo Fisher Scientific</td><td>A25977</td><td>Mise en garde des</td></tr><tr><td>mini gels de protéines NuPAGE Bis-tris à haute température, 4&ndash ; 12 %, 1,0 et 1,0 ; 1,5 mm, 10 puits</td><td>Invitrogen</td><td>NP0323BOX</td><td>Contient du polyacrylamide, mise en garde contre la toxicité</td></tr><tr><td>NuPAGE Bis-tris mini gels de protéines, 4 po ; 12 %, 1,0 et 1,0 ; 1,5 mm, 15 puits</td><td>Invitrogen</td><td>NP0321BOX</td><td>Contient du polyacrylamide, attention à la toxicité</td></tr><tr><td>Pinceau (&Oslash ; 1,8 mm)</td><td>Hwa hong</td><td>791240-Pipetman</td><td></td></tr> <tr><td>L (P1000L)</td><td>Gilson</td><td>FA10006M</td><td>Micropipette monocanal avec éjecteur métallique</td></tr><tr><td>Pipetman L (P200L)</td><td>Gilson</td><td>FA10005M</td><td>Micropipette monocanal avec éjecteur métallique</td></tr><tr><td>Pipetman L ( P20L)</td><td>Gilson</td><td>FA10003M</td><td>Micropipette monocanal avec éjecteur métallique</td></tr><tr><td>Pipetman L (P2L)</td><td>Gilson</td><td>FA10001M</td><td>Micropipette monocanal avec éjecteur métallique</td></tr><tr><td>Alimentation Principales</td><td>sciences</td><td>MP-310</td><td>Attention à l’électricité haute tension</td></tr><tr><td>Rotateur programmable</td><td>Biosan</td><td>RS-24-Protein</td><td></td></tr> <tr><td>LoBind&nbsp ; tubes</td><td>Eppendorf</td><td></td> <td>30108302-Lame de</td></tr> <tr><td>rasoir</td><td>Dorco</td><td>304020</td><td>Acier inoxydable, prudence des objets pointus</td></tr><tr><td>Rouleau</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td></tr><tr><td>Pipette sérologique (10 mL)</td><td>SPL</td><td>91010</td> Pipette sérologique en <td>polystyrène</td></tr><tr><td>(25 mL)</td><td>SPL</td><td>91025</td> Pipette sérologique en <td>polystyrène</td></tr><tr><td>(5 mL)</td><td>SPL</td><td>91005</td> Pipette sérologique <td>en polystyrène</td></tr><tr><td>(50 mL)</td><td>SPL</td><td>91050</td> Tubes de microcentrifugation à faible rétention <td>en polystyrène</td></tr><tr><td>(1,5 mL)</td><td>Thermo Scientific</td><td>3451PK</td> Tampon éponge <td>en polypropylène</td></tr><tr><td></td><td>Invitrogen</td><td>EI9052-Stéréomicroscope</td><td></td></tr> <tr><td></td><td>Zeiss</td><td>Stemi 508-Stéréomicroscope</td><td></td></tr><tr><td>&nbsp ;</td><td>Leica</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ThermoMixer&nbsp ; C</td><td>Eppendorf</td><td>5382000015</td><td>Avec blocs de 1,5 et 5 ml</td></tr><tr><td>Pince à épiler</td><td>Aven Tools</td><td>18526</td><td>Plastique, pointes plates</td></tr><tr><td>Mélangeur vortex</td><td>Scientific Industries</td><td>SI-0236-XCell</td><td></td></tr> <tr><td>II Module Blot</td><td>Invitrogen</td><td>EI9051</td><td>Attention aux</td></tr><tr><td>températures élevées XCell&nbsp ; SureLock mini-cellule</td><td>Invitrogen</td><td>EI0001</td><td>Attention aux</td></tr> <tr><td>produits chimiques haute température<fort></fort></td><td><fort>Entreprise</fort></td><td><fort>Numéro de catalogue</fort></td><td><fort>Commentaires/Description</fort></td></tr><tr><td>Acétone</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>650501</td><td>Qualité analytique</td></tr><tr><td>Acétonitrile</td><td>Supelco</td><td>1.00029.1000</td><td>Grade LC-MS, mise en garde contre la toxicité par inhalation et les ampoules étalons d’albumine inflammables</td></tr><tr><td>(contenant de l’albumine sérique bovine (BSA) à 2 mg/mL dans une solution saline à 0,9 % et de l’azoture de sodium à 0,05 %)</td><td>Thermo Scientific</td><td>23209</td><td>Fait partie des kits de dosage des protéines Pierce BCA (Thermo Scientific, 23225)</td></tr><tr><td>Albumine, sérum bovin</td><td>Bioshop</td><td>ALB001</td><td>Bicarbonate</td></tr><tr><td>d’ammonium</td> de qualité analytique <td>Sigma-Aldrich</td><td>09830</td><td>Biotine de qualité analytique</td></tr><tr><td>&nbsp ;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>B4639</td><td>Qualité de culture cellulaire et tissulaire</td></tr><tr><td>Chlorure de calcium (CaCl2)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C5670</td><td>Qualité de culture cellulaire</td></tr><tr><td>Clarté substrat ECL occidental</td><td>Biorad</td><td>1705060</td><td>Qualité analytique</td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>MBD0015</td><td>Sensible à la lumière, qualité analytique</td></tr><tr><td>Dithiothreitol (DTT)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>R0861</td><td>Qualité analytique</td></tr><tr><td>Sérum fœtal bovin</td><td>Corning</td><td>35-015-CV</td><td>Qualité de culture cellulaire</td></tr><tr><td>Acide formique</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>F0507</td><td>Qualité réactif, mise en garde contre la toxicité par inhalation</td></tr><tr><td>Milieu d’insecte de Grace</td><td>Gibco</td><td>11595030</td><td>Qualité de culture cellulaire</td></tr><tr><td>Levure sèche instantanée</td><td>Non de marque</td><td>N1019</td><td>-</td></tr><tr><td>Iodoacétamide</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>I1149</td><td>Sensible à la lumière, qualité analytique</td></tr><tr><td></td><td>Méthanol Carlo Erba</td><td>41484</td><td>Qualité analytique</td></tr><tr><td>Vernis à ongles</td><td>-</td><td>-</td>Tampon d’échantillon SDS <td>Novex Tris-glycine de type transparent</td></tr><tr><td>(2X)</td><td>Invitrogen</td><td>LC2676</td><td>Tampon de</td></tr><tr><td>fonctionnement NuPAGE MOPS SDS de qualité analytique (20X)</td><td>Invitrogen</td><td>NP0001</td><td>Qualité analytique</td></tr><tr><td>PageRuler Échelle de protéines pré-colorées</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>26616</td><td>Qualité analytique</td></tr><tr><td>Fluorure de phénylméthanesulfonyle&nbsp ;</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>36978</td><td>Qualité analytique</td></tr><tr><td>Tampon phosphate salin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P4417</td><td>Qualité analytique</td></tr><tr><td>Pierce 16 % Formaldéhyde (p/v)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>28908</td><td>Qualité analytique, sensible à la lumière</td></tr><tr><td>Pierce Kits de dosage des protéines Thermo</td><td>Scientific</td><td>23225</td><td>Qualité analytique</td></tr><tr><td>Réactif A Pierce BCA (contenant du carbonate de sodium, du bicarbonate de sodium, de l’acide bicinchoninique et du tartrate de sodium dans de l’hydroxyde de sodium 0,1 M)</td><td>Thermo Scientific</td><td>23228</td><td>Fait partie des kits de dosage des protéines Pierce BCA (Thermo Scientific, 23225)</td></tr><tr><td>Réactif B de Pierce BCA (contenant 4 % de sulfate cuivrique)</td><td>Thermo Scientific</td><td>1859078</td><td>Partie des kits de dosage des protéines Pierce BCA (Thermo Scientific, 23225)</td></tr><tr><td>Acide propionique</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>402907</td><td>Grade ACS</td></tr><tr><td>Cocktail d’inhibiteur de protéase III</td><td>Calbiochem</td><td>539134</td><td>Qualité de culture cellulaire et tissulaire</td></tr><tr><td>SlowFade Gold Antifade Mountant</td><td>Invitrogen</td><td>S36936</td><td></td></tr><tr><td>Chlorure de sodium (NaCl) sensible à la lumièreBioneer</td><td></td> <td>C-9025</td><td>Qualité analytique</td></tr><tr><td>Désoxycholate de sodium</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D6750</td><td>Qualité analytique</td></tr><tr><td>Dodécylsulfate de sodium</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>71736</td><td></td></tr><tr><td>Hydroxyde de sodium (NaOH)</td><td>Biosesang</td><td>SR2018-100-00</td><td>Qualité analytique</td></tr><tr><td>Eau triplement distillée</td><td>-</td><td>-</td><td>Ultrapure (type 1)</td></tr><tr><td>Saline tamponnée au tris</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>94158</td> Tampon de transfert de tris-glycine <td>de qualité analytique</td></tr><tr><td></td><td>Koma Biotech</td><td>K0341001</td><td>Qualité analytique</td></tr><tr><td>Tris-HCl, pH 8</td><td>Bioneer</td><td>C-9006</td><td>Qualité analytique</td></tr><tr><td>Triton x-100</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>93443</td><td>Qualité moléculaire</td></tr><tr><td>Trypsine</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>20233</td><td>Qualité de culture cellulaire</td></tr><tr><td>Tween 20</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P9416</td><td>Qualité moléculaire</td></tr><tr><td>Urée</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>U5378</td><td>Moléculaire & Qualité culture cellulaire</td></tr></tbody></table>

in vivo application du marquage de proximité basé sur turboid chez drosophila melanogaster

In Vivo Application of TurboID-based Proximity Labeling in Drosophila melanogaster

Des exemples de résultats sont illustrés dans les figures 1, 2, 3 et 4 publiées précédemment par Nguyen et al.20. La figure 1 illustre la procédure expérimentale de la PL à base de TurboID dans l’ovaire de la drosophile . Tout d’abord, une construction combinant Zuc et TurboID a été générée (Zuc-V5-TurboID). ...

In vivo Application du marquage de proximité basé sur TurboID chez Drosophila melanogaster

Proximity labeling (PL) is a powerful method for mapping protein-protein interaction networks. Advances in labeling enzymes, especially TurboID, have ...

in-vivo-application-turboid-based-proximity-labeling-drosophila

Research

Recherche

JoVE Journal

Biology

Biologie

Ce protocole décrit l'utilisation de micro-injection et l'imagerie à haute résolution dans...

Techniques de microinjection pour l&#39;étude de la mitose dans les Drosophila melanogaster Embryon syncytial

Mésoscopique de fluorescence de tomographie opère au-delà des limites de la pénétration des tissus sectionnement microscopie à fluorescence. La technique est basée sur la multi-projection de l'illumination et une description de transport des photons. Nous démontrons in vivo du corps entier de visualisation 3D de la morphogenèse des ailes exprimant la GFP dans les disques...

Mésoscopique fluorescence tomographie pour In vivo L&#39;imagerie du développement Drosophile</em

Hémocytes drosophile se dispersent sur ​​l'ensemble de l'embryon en développement. Ce protocole démontre comment monter et à l'image de ces migrations à partir d'embryons avec les hémocytes marqués par fluorescence.

En direct de l&#39;imagerie Drosophila melanogaster Migrations hémocytaires embryonnaires

Ce protocole décrit une méthode fiable pour l'anesthésie et l'imagerie de...

L&#39;imagerie in vivo chez la drosophile larves Intact au sub-cellulaire Résolution

Nous présentons une technique pour l'étiquetage des neurones simples dans le système nerveux central (SNC)...

Étiquetage des cellules isolées dans le système nerveux central des<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Ce document illustre l'utilisation d'un balayage rapide microscope confocal à un comportement cellulaire de l'image directement à travers la pupe. En laissant la coque de nymphose intacte, cette méthode permet l'observation et la mesure des processus dynamiques de cellule à un stade de développement de la drosophile qui est difficile à étudier directement.

Imagerie à travers le cas de la nymphe<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Ce protocole présente une méthode efficace pour l’imagerie du neuroépithélium de l’œil nymphal vivant de la drosophile. Cette méthode compense le mouvement des tissus et la topologie inégale, améliore la visualisation des limites cellulaires grâce à l’utilisation de plusieurs protéines de jonction marquées GFP et utilise un banc d’imagerie facile à assembler.

Live-imagerie de la Drosophila Nymphe yeux

Le protocole d’ARN décrit in situ hybridation permet la détection de l’ARN dans des embryons de drosophile entiers ou tissus disséqués. À l’aide de microplaques 96 puits et amplification de signal tyramide, transcriptions peuvent être détectées à un débit, sensibilité et haute résolution et à un coût relativement faible.

Hybridation fluorescente In Situ haute résolution dans des embryons de drosophile et tissus à l’aide d’Amplification de Signal Tyramide

Ici, nous illustrons comment microscopie photoactivation localisation seule molécule peut être effectuée sur le terminal de nerf moteur d’un live de Drosophila melanogaster troisième stade larve.

In Vivo Simple-molécule suivi du terminal de nerf moteur présynaptique Drosophila

Ici, nous présentons un protocole pour la visualisation, la détection, l'analyse et le suivi du trafic endogène d'ARNm dans la chambre d'oeufs de Melasophila melanogaster vivante utilisant des balises moléculaires, la microscopie confocale de disque spinning, et l'analyse open-source logiciel.

Visualisation et suivi des ARNm endogènes dans Live Drosophila melanogaster Egg Chambers

Au début de l’embryon de drosophile , de nombreux organites sont mobiles. En principe, ils peuvent être photographiés en direct via des sondes fluorescentes spécifiques, mais la coquille d’œuf empêche l’application directe sur l’embryon. Ce protocole décrit comment introduire de telles sondes par microinjection, puis analyser le mouvement des organites en vrac via la vélocimétrie d’image de particules.

Visualisation du trafic dépendant du cytosquelette d’organites contenant des lipides dans des embryons de drosophiles

Découvrez le marquage de proximité TurboID pour étudier les interactions protéiques de zucchini dans les cellules germinales de Drosophila melanogaster. Cette méthode permet d'identifier de nouveaux partenaires impliqués dans le repliement protéique et le trafic membranaire.

In vivo Application du marquage de proximité basé sur TurboID chez Drosophila melanogaster

Explorer plus de vidéos