Modèle murin de dissection aortique thoracique induite par perfusion orale de β-aminopropionitrile et d’angiotensine II par voie sous-cutanée

Cette étude établit un modèle murin de dissection de l’aorte thoracique, TAD, par induction de BAPN et d’angiotensine II, fournissant une procédure détaillée qui offre un outil précieux pour explorer la pathogenèse de la TAD ou les approches thérapeutiques. L’association BAPN-angiotensine II fournit une méthode pour établir des modèles murins de TAD, qui atteignent un taux d’incidence TAD élevé, et reproduisent des caractéristiques physiopathologiques qui ressemblent à celles observées dans le TAD humain. À l’avenir, notre équipe de recherche intégrera des recherches cliniques et fondamentales pour illustrer la pathogenèse cardiovasculaire, en privilégiant la découverte de nouvelles stratégies thérapeutiques grâce à des connaissances mécanistes et à l’innovation translationnelle.

[Présentateur] Pesez chaque souris et notez le poids corporel maximal pour calculer la masse d’angiotensine II requise pour l’expérience. Utilisez le modèle de calcul pour déterminer la masse d’angiotensine II pour chaque souris en fonction du poids corporel maximal. Calculez ensuite la masse totale d’angiotensine II nécessaire pour préparer 130 microlitres de solution d’angiotensine II par souris. Utilisez le modèle fourni pour déterminer le volume de remplissage de la solution d’angiotensine II et de la solution saline nécessaire à l’expérience. Pesez la quantité calculée d’angiotensine II dans un microtube stérile à l’aide d’une balance analytique. Ajoutez le volume calculé de solution saline normale dans le microtube. À l’aide d’un mélangeur vortex, dissolvez soigneusement la poudre jusqu’à ce qu’il ne reste plus de particules visibles. Pesez chaque pompe osmotique, y compris le corps de la pompe et le modérateur de débit, à l’aide d’une balance analytique. Fixez un tube de remplissage à une seringue stérile de 1 millilitre fraîchement ouverte et aspirez soigneusement la solution d’angiotensine II préparée. Tenez le tube de remplissage en position ascendante et retirez les bulles d’air de la seringue. Insérez doucement l’extrémité du tube de remplissage dans l’ouverture supérieure de la pompe osmotique jusqu’à ce que le tube ne puisse plus être inséré. Tenez la pompe à la verticale et appuyez lentement sur le piston de la seringue jusqu’à ce que la solution d’angiotensine II apparaisse à la sortie. Ensuite, arrêtez-vous et retirez soigneusement le tube de remplissage. Ensuite, insérez le modérateur de débit dans l’ouverture de la pompe avec précaution et lentement jusqu’à ce qu’il ne reste plus d’espace entre le modérateur et le haut de la pompe. Pesez la pompe chargée à l’aide de la balance analytique et notez la valeur. Placez les pompes remplies dans une solution saline stérile à 37 degrés Celsius, avec la tête du modérateur vers le haut, pendant au moins six heures avant l’implantation. Placez la souris en position couchée sur la surface chirurgicale. À l’aide d’un scalpel, faites soigneusement une incision transversale de 1 centimètre dans la peau. Utilisez une paire de pinces incurvées pour saisir le bord incisif et une autre paire de pinces pour disséquer brutalement le tissu sous-cutané, créant ainsi une poche pour la pompe osmotique. Insérez la pompe remplie dans la poche avec la tête du modérateur de débit pointant vers l’extrémité caudale de la souris. Alignez soigneusement les bords incisifs et fermez la peau, à l’aide de sutures non résorbables 6-0. Cette figure illustre l’incidence de la dissection et de la rupture de l’aorte dans tous les groupes expérimentaux. La dissection aortique s’est produite chez 100 % des souris du groupe BAPN plus angiotensine II, 35 % ayant présenté une rupture, dépassant l’incidence de 55 % ou 60 % observée dans le groupe BAPN ou BAPN plus solution saline, tandis qu’aucune dissection ou rupture n’est survenue chez les témoins. La morphologie aortique macroscopique a montré une déformation progressive dans les groupes BAPN, BAPN plus sérum physiologique et BAPN plus angiotensine II par rapport aux aortes chez les témoins. Les diamètres maximaux de l’aorte thoracique étaient significativement plus élevés dans tous les groupes traités par BAPN par rapport aux témoins, sans différences significatives entre les groupes traités. La coloration à l’hématoxyline et à l’éosine a révélé des parois aortiques minces et uniformes chez les témoins, tandis que tous les groupes traités au BAPN présentaient un épaississement et une infiltration inflammatoire. La coloration à l’élastine Van Gieson a montré des fibres élastiques intactes chez les témoins et une fragmentation progressive des fibres avec formation de fausses lumières dans tous les groupes traités au BAPN.