Name: In vivo Imagerie calcique d’ensembles neuronaux dans des réseaux de neurones sensoriels primaires dans des ganglions du trijumeau intacts (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-08-01T13:20:00.000+00:00
Duration: 7 min 55 s
Description: Découvrez l'imagerie calcique in vivo GCaMP pour étudier l'activation neuronale dans les ganglions du trijumeau intacts de souris. Cette méthode permet de visualiser plus de 3 000 neurones simultanément et d'analyser leurs réponses aux stimuli mécaniques et thermiques en temps réel.

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<table><tbody><tr><td>Injection d’anased (xylazine)</td><td>Covetrus, Akorn</td><td>33197</td><td></td></tr><tr><td>Flurar 5x/0.25 M27 obejctive</td><td>Cal Zeiss</td><td>420130-9900-000</td><td></td></tr><tr><td>Applicateurs à pointe de coton</td><td>Mckesson</td><td>Référence 24-106-1S</td><td></td></tr><tr><td>Hémostat incurvé</td><td>Outils scientifiques fins</td><td>13007-12</td><td></td></tr><tr><td>Régulateur de température DC</td><td>FHC</td><td>40-90-8D</td><td></td></tr><tr><td>Coussin chauffant de contrôleur de température DC</td><td>FHC</td><td>40-90-2-05</td><td></td></tr><tr><td>Pince à revêtement céramique Dumont</td><td>Outils scientifiques fins</td><td>11252-50</td><td></td></tr><tr><td>Régulateur de température FHC DC</td><td>FHC</td><td>40-90-8D</td><td></td></tr><tr><td>Fluriso (isoflurane)</td><td>MWI Santé animale, Groupe Piramal</td><td>501017</td><td></td></tr><tr><td>Friedman-Pearson Rongeurs</td><td>Outils scientifiques fins</td><td>16221-14</td><td></td></tr><tr><td>GelFoam</td><td>Pfizer</td><td>09-0353-01</td><td></td></tr><tr><td>ImageJ</td><td>Instituts nationaux de la santé</td><td>ij153</td><td></td></tr><tr><td>Ketaset (kétamine)</td><td>Zoetis</td><td>Réf. KET-00002R2</td><td></td></tr><tr><td>Modèle 923-B Support de tête d’anesthésie à gaz de souris (souris adulte)</td><td>Kopf Instruments</td><td>923-B</td><td></td></tr><tr><td>Ruban de scène vert luminescent</td><td>JSITON/ Amazonie</td><td>B803YW8ZWL</td><td></td></tr><tr><td>Système de pièce à main de laboratoire électrique compact M35</td><td>Buffalo Dental Manufacturing Co., Inc.</td><td>M35</td><td></td></tr><tr><td>Matrx VIP 3000 Vaporisateur Isoflurane</td><td>Milieu de gamme</td><td>91305430</td><td></td></tr><tr><td>Micro ciseaux de dissection</td><td>Roboz</td><td>RS-5882</td><td></td></tr><tr><td>Micro dissection de ciseaux à ressort</td><td>Outils scientifiques fins</td><td>15023-10</td><td></td></tr><tr><td>Micro dissection de ciseaux à ressort</td><td>Roboz</td><td>RS-5677</td><td></td></tr><tr><td>Mini sonde à thermistance rectale</td><td>FHC</td><td>40-90-5D-02</td><td></td></tr><tr><td>Utilisation des ciseaux</td><td>Roboz</td><td>RS-6812</td><td></td></tr><tr><td>Pirt-GCaMP3 C57/BL/6J souris</td><td>Université Johns Hopkins</td><td>N/A</td><td>Les deux sexes peuvent être imagés aussi bien. Les souris doivent être âgées d’au moins 8 semaines en raison d’une expression faible ou intermittente du promoteur Pirt chez les souris plus jeunes.</td></tr><tr><td>Chlorure de potassium</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP366-500</td><td></td></tr><tr><td>Cadre stéréotaxique</td><td>Kopf Modèle 923-B</td><td>923-B</td><td></td></tr><tr><td>Masque stérotaxique (actif) pour souris < 30g avec tubes</td><td>RWD Sciences de la vie</td><td>68663</td><td></td></tr><tr><td>Fraise conique TNT (31P)</td><td>Buffalo Dental Manufacturing Co., Inc.</td><td>31P-OR</td><td></td></tr><tr><td>Souris td-Tomato C57BL/6J</td><td>Laboratoire Jackson</td><td>7909</td><td></td></tr><tr><td>Plaque supérieure, 6 po x 10 po</td><td>Newport</td><td>290-TP</td><td></td></tr><tr><td>Pipette de transfert, 3 ml</td><td>Cole Parmer</td><td>UX-06226-23</td><td></td></tr><tr><td>Souris TrpV1-Cre C57BL/6J</td><td>Laboratoire Jackson</td><td>17769</td><td></td></tr><tr><td>Microscope confocal Zeiss LSM 800</td><td>Cal Zeiss</td><td>LSM800</td><td></td></tr><tr><td>Logiciel Zeiss Zen 2.6 Blue Edition</td><td>Cal Zeiss</td><td>Zen (Édition Bleue) 2.6</td><td></td></tr></tbody></table>

in vivo imagerie calcique d’ensembles neuronaux dans des réseaux de neurones sensoriels primaires dans des ganglions du trijumeau intacts

In Vivo Calcium Imaging of Neuronal Ensembles in Networks of Primary Sensory Neurons in Intact Trigeminal Ganglia

Imagerie d’un grand nombre de neurones et de branches spécifiques du trijumeau par balayage confocal du ganglion trijumeau Pirt-GCaMP Après une exposition chirurgicale à la TG chez des souris Pirt-GCaMP3, la microscopie confocale permet d’imager simultanément plus de &gt;3 000 neurones (Figure 4). Cela offre le puissant avantage d’observer simultanément des milliers de neurones TG dans leur contexte physiologique normal. Les transitoires spontanés Ca2+ peuvent ...

In vivo Imagerie calcique d’ensembles neuronaux dans des réseaux de neurones sensoriels primaires dans des ganglions du trijumeau intacts

Calcium imaging is an important tool for monitoring signaling mechanisms that either influx Ca2+ into the cytosol or release Ca2+ from intracellular Ca2+ ...

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Research

Recherche

JoVE Journal

Neuroscience

Neurosciences

Source : Shannonhouse, J., et al. Imagerie calcique in vivo Imagerie calcique d’ensembles neuronaux dans des réseaux de neurones sensoriels primaires dans des ganglions de la racine dorsale intacts. J. Vis. Exp. (2023). La vidéo fait la démonstration d’une technique d’imagerie calcique in vivo pour surveiller l’activité neuronale dans les ganglions de la racine dorsale (DRG) d’une souris transgénique. Les neurones DRG expriment un indicateur de calcium qui augmente l’intensité de la...

Imagerie calcique in vivo d’ensembles neuronaux dans les ganglions intacts de la racine dorsale d’une souris

Nous décrivons une procédure expérimentale pour mesurer l’activité neuronale à travers les fenêtres optiques doubles au-dessus corticies somatosensoriel primaire bilatérale (S1) en Thy1-GCaMP6s des souris transgéniques à l’aide de 2 photons (2p) microscopie in vivo.

Imagerie de l’activité neuronale dans le Cortex somatosensoriel primaire utilisant Thy1-GCaMP6s des souris transgéniques

Nous présentons ici comment exposer le ganglion géniculé d’une souris de laboratoire vivante et anesthésiée et comment utiliser l’imagerie calcique pour mesurer les réponses d’ensembles de ces neurones aux stimuli gustatifs, permettant ainsi de multiples essais avec différents stimulants. Cela permet des comparaisons approfondies de quels neurones répondent à quels tastants.

Imagerie calcique in vivo des réponses des neurones ganglionnaires géniculés de souris aux stimuli gustatifs

Ce protocole décrit l’exposition chirurgicale du ganglion radiculaire dorsal (DRG) suivi de GCaMP3 (indicateur Ca2+ codé génétiquement; Protéine fluorescente verte-calmoduline-protéine M13 3) Imagerie Ca2+ des ensembles neuronaux à l’aide de souris Pirt-GCaMP3 tout en appliquant une variété de stimuli à la patte postérieure ipsilatérale.

In vivo Imagerie calcique d’ensembles neuronaux dans des réseaux de neurones sensoriels primaires dans des ganglions radiculaires dorsaux intacts

Le présent protocole décrit l’imagerie calcique in vivo pour mesurer les réponses d’ensembles de neurones lombaires-6 DRG à des stimuli somatiques et viscéraux. Des comparaisons approfondies peuvent être faites entre les neurones répondant à différents stimuli. Ce protocole est précieux pour étudier les mécanismes de la douleur viscérale et de la stimulation somatique, comme l’acupuncture.

in vivo Imagerie calcique de la réponse des neurones des ganglions de la racine dorsale aux stimuli somatiques et viscéraux

Les indicateurs calciques codés génétiquement (GECI) permettent une analyse robuste de la signalisation des neurones sensoriels à l’échelle de la population. Ici, nous avons développé une nouvelle approche qui permet de visualiser in vivo l’activité des neurones des ganglions trijumeaux chez le rat.

In-Vivo Imagerie calcique des neurones sensoriels dans le ganglion trijumeau du rat

L'activité spontanée de développer des réseaux neuronaux peuvent être mesurées en utilisant AM-ester formes de colorants indicateurs sensibles au calcium. Modifications du calcium intracellulaire, indiquant l'activation neuronale, sont détectés comme des changements transitoires de la fluorescence indicateur avec un ou deux photons d'imagerie. Ce protocole peut être adapté pour une gamme de stade de développement qui dépendent des réseaux...

Imagerie fonctionnelle en calcium développement des réseaux corticaux

Transport rétrograde de colorant fluorescent marque une sous-population de neurones en fonction de projection anatomique. Axones marqués peuvent être ciblés...

Marquage fluorescent rétrograde Permet ciblée extracellulaire seule unité d&#39;enregistrement de neurones identifiés<em&gt; In vivo</em

Avec son petit corps, transparent et documenté neuroanatomie et une foule de techniques génétiques qui se prêtent et...

En imagerie calcique in vivo des neurones en C. elegans

Dans cet article, nous introduisons rapide micro-iontophorèse de neurotransmetteurs comme une technique pour étudier l'intégration des signaux post-synaptiques avec une grande précision spatiale et temporelle.

Rapide Micro-iontophorèse de glutamate et le GABA: un outil utile d&#39;étudier l&#39;intégration synaptique

Découvrez l'imagerie calcique in vivo GCaMP pour étudier l'activation neuronale dans les ganglions du trijumeau intacts de souris. Cette méthode permet de visualiser plus de 3 000 neurones simultanément et d'analyser leurs réponses aux stimuli mécaniques et thermiques en temps réel.

In vivo Imagerie calcique d’ensembles neuronaux dans des réseaux de neurones sensoriels primaires dans des ganglions du trijumeau intacts (Vidéo) | JoVE Journal

In vivo Imagerie calcique d’ensembles neuronaux dans des réseaux de neurones sensoriels primaires dans des ganglions du trijumeau intacts

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