Name: Prélèvement de liquide de lavage nasal murin sans contamination sanguine (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-11T15:10:00.000+00:00
Duration: 5 min 12 s
Description: Apprenez une méthode de prélèvement de liquide de lavage nasal murin sans contamination sanguine. Cette technique améliore la détection des pathogènes respiratoires et l'analyse immunologique.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Cortegano, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-dependent+nasal+immune+responses+in+non-hospitalized+bronchiolitis+children%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Age-dependent nasal immune responses in non-hospitalized bronchiolitis children.</a> Front Immunol. 13, 1011607(2022).</li>
<li>Yao, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Control+of+pathogenic+effector+T-cell+activities+in+situ+by+PD-L1+expression+on+respiratory+inflammatory+dendritic+cells+during+respiratory+syncytial+virus+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Mucosal+Immunol%22%5BJournal%5D)">Control of pathogenic effector T-cell activities in situ by PD-L1 expression on respiratory inflammatory dendritic cells during respiratory syncytial virus infection.</a> Mucosal Immunol. 8 (4), 746-759 (2015).</li>
<li>Gould, V. M. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nasal+IgA+provides+protection+against+human+influenza+challenge+in+volunteers+with+low+serum+influenza+antibody+titre%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Nasal IgA provides protection against human influenza challenge in volunteers with low serum influenza antibody titre.</a> Front Microbiol. 8, 900(2017).</li>
<li>Casado, B., Pannell, L. K., Viglio, S., Iadarola, P., Baraniuk, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+the+sinusitis+nasal+lavage+fluid+proteome+using+capillary+liquid+chromatography+interfaced+to+electrospray+ionization-quadrupole+time+of+flight-tandem+mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Electrophoresis%22%5BJournal%5D)">Analysis of the sinusitis nasal lavage fluid proteome using capillary liquid chromatography interfaced to electrospray ionization-quadrupole time of flight-tandem mass spectrometry.</a> Electrophoresis. 25 (8), 1386-1393 (2004).</li>
<li>Hull, J., Skinner, W., Robertson, C., Phelan, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elemental+content+of+airway+surface+liquid+from+infants+with+cystic+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Crit+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Elemental content of airway surface liquid from infants with cystic fibrosis.</a> Am J Respir Crit Care Med. 157 (1), 10-14 (1998).</li>
<li>Roponen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflammatory+mediators+in+nasal+lavage%2C+induced+sputum+and+serum+of+employees+with+rheumatic+and+respiratory+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Respir+J%22%5BJournal%5D)">Inflammatory mediators in nasal lavage, induced sputum and serum of employees with rheumatic and respiratory disorders.</a> Eur Respir J. 18 (3), 542-548 (2001).</li>
<li>Santos Galvão, C. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflammatory+mediators+in+nasal+lavage+among+school-age+children+from+urban+and+rural+areas+in+S%C3%A3o+Paulo%2C+Brazil%5BTitle%5D)+AND+%22S%C3%A3o+Paulo+Med+J%22%5BJournal%5D)">Inflammatory mediators in nasal lavage among school-age children from urban and rural areas in São Paulo, Brazil.</a> São Paulo Med J. 122 (5), 204(2004).</li>
<li>Winkler, E. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SARS-CoV-2+causes+lung+infection+without+severe+disease+in+human+ACE2+knock-in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Virol%22%5BJournal%5D)">SARS-CoV-2 causes lung infection without severe disease in human ACE2 knock-in mice.</a> J Virol. 96 (1), e01511-e01521 (2022).</li>
<li>Kieran, T. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exploring+associations+between+viral+titer+measurements+and+disease+outcomes+in+ferrets+inoculated+with+125+contemporary+influenza+A+viruses%5BTitle%5D)+AND+%22J+Virol%22%5BJournal%5D)">Exploring associations between viral titer measurements and disease outcomes in ferrets inoculated with 125 contemporary influenza A viruses.</a> J Virol. 98 (2), e01661-e01723 (2024).</li>
<li>Peden, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+nasal+lavage+for+objective+measurement+of+irritant-induced+nasal+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Regul+Toxicol+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">The use of nasal lavage for objective measurement of irritant-induced nasal inflammation.</a> Regul Toxicol Pharmacol. 24 (1 II), 68-75 (1996).</li>
<li>Rusznak, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+pollution-induced+allergy+and+asthma%5BTitle%5D)+AND+%22Rev+Fr+Allergol+Immunol+Clin%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of pollution-induced allergy and asthma.</a> Rev Fr Allergol Immunol Clin. 38 (7 Suppl. 1), 397-402 (1998).</li>
<li>Laumbach, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nasal+effects+of+a+mixture+of+volatile+organic+compounds+and+their+ozone+oxidation+products%5BTitle%5D)+AND+%22J+Occup+Environ+Med%22%5BJournal%5D)">Nasal effects of a mixture of volatile organic compounds and their ozone oxidation products.</a> J Occup Environ Med. 47 (11), 1182-1189 (2005).</li>
<li>Kawai, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+potential+of+neuraminidase+as+an+antigen+for+nasal+vaccines+to+increase+cross-protection+against+influenza+viruses%5BTitle%5D)+AND+%22J+Virol%22%5BJournal%5D)">The potential of neuraminidase as an antigen for nasal vaccines to increase cross-protection against influenza viruses.</a> J Virol. 95 (20), 1180-1201 (2021).</li>
<li>Cho, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spontaneous+eosinophilic+nasal+inflammation+in+a+genetically-mutant+mouse%3A+Comparative+study+with+an+allergic+inflammation+model%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Spontaneous eosinophilic nasal inflammation in a genetically-mutant mouse: Comparative study with an allergic inflammation model.</a> PLoS One. 7 (4), e35114(2012).</li>
<li>Puchta, A., Verschoor, C. P., Thurn, T., Bowdish, D. M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+inflammatory+responses+during+intranasal+colonization+with+Streptococcus+pneumoniae%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Characterization of inflammatory responses during intranasal colonization with Streptococcus pneumoniae.</a> J Vis Exp. (83), e50490(2014).</li>
<li>Ghafouri, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+proteomics+of+nasal+fluid+in+seasonal+allergic+rhinitis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Proteome+Res%22%5BJournal%5D)">Comparative proteomics of nasal fluid in seasonal allergic rhinitis.</a> J Proteome Res. 5 (2), 330-338 (2006).</li>
<li>Lindahl, M., Ståhlbom, B., Svartz, J., Tagesson, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protein+patterns+of+human+nasal+and+bronchoalveolar+lavage+fluids+analyzed+with+two-dimensional+gel+electrophoresis%5BTitle%5D)+AND+%22Electrophoresis%22%5BJournal%5D)">Protein patterns of human nasal and bronchoalveolar lavage fluids analyzed with two-dimensional gel electrophoresis.</a> Electrophoresis. 19 (18), 3222-3229 (1998).</li>
<li>Lindahl, M., Ståhlbom, B., Tagesson, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+a+new+potential+airway+irritation+marker%2C+palate+lung+nasal+epithelial+clone+protein%2C+in+human+nasal+lavage+fluid+with+two-dimensional+electrophoresis+and+matrix-assisted+laser+desorption%2Fionization-time+of+flight%5BTitle%5D)+AND+%22Electrophoresis%22%5BJournal%5D)">Identification of a new potential airway irritation marker, palate lung nasal epithelial clone protein, in human nasal lavage fluid with two-dimensional electrophoresis and matrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight.</a> Electrophoresis. 22 (9), 1795-1800 (2001).</li>
<li>Schoenebeck, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+preparation+of+nasal+lavage+fluid+%28NLF%29+as+a+noninvasive+sample+for+proteomic+biomarker+discovery%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim+Biophys+Acta+Proteins+Proteomics%22%5BJournal%5D)">Improved preparation of nasal lavage fluid (NLF) as a noninvasive sample for proteomic biomarker discovery.</a> Biochim Biophys Acta Proteins Proteomics. 1854 (7), 741-745 (2015).</li>
<li>National Research Council (US) Committee for the Update of the Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Guide+for+the+care+and+use+of+laboratory+animals%22">Guide for the care and use of laboratory animals</a>. , (2011).</li>
<li>Roustan, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluating+methods+of+mouse+euthanasia+on+the+oocyte+quality%3A+Cervical+dislocation+versus+isoflurane+inhalation%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">Evaluating methods of mouse euthanasia on the oocyte quality: Cervical dislocation versus isoflurane inhalation.</a> Lab Anim. 46 (2), 167-169 (2012).</li>
<li>Park, A. M., Tsunoda, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Forensic+luminol+reaction+for+detecting+fecal+occult+blood+in+experimental+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechniques%22%5BJournal%5D)">Forensic luminol reaction for detecting fecal occult blood in experimental mice.</a> Biotechniques. 65 (4), 227-230 (2018).</li>
<li>Gao, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+nasal+wash+RNA-Seq+reveals+distinct+cell-specific+innate+immune+responses+in+influenza+versus+SARS-CoV-2%5BTitle%5D)+AND+%22JCI+Insight%22%5BJournal%5D)">Human nasal wash RNA-Seq reveals distinct cell-specific innate immune responses in influenza versus SARS-CoV-2.</a> JCI Insight. 6 (22), e152288(2021).</li>
<li>Kirkeby, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunoglobulins+in+nasal+secretions+of+healthy+humans%3A+Structural+integrity+of+secretory+immunoglobulin+A1+%28IgA1%29+and+occurrence+of+neutralizing+antibodies+to+IgA1+proteases+of+nasal+bacteria%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Diagn+Lab+Immunol%22%5BJournal%5D)">Immunoglobulins in nasal secretions of healthy humans: Structural integrity of secretory immunoglobulin A1 (IgA1) and occurrence of neutralizing antibodies to IgA1 proteases of nasal bacteria.</a> Clin Diagn Lab Immunol. 7 (1), 31-39 (2000).</li>
<li>Webb, J. L., Creamer, J. I., Quickenden, T. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparison+of+the+presumptive+luminol+test+for+blood+with+four+non-chemiluminescent+forensic+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Luminescence%22%5BJournal%5D)">A comparison of the presumptive luminol test for blood with four non-chemiluminescent forensic techniques.</a> Luminescence. 21 (4), 214-220 (2006).</li>
<li>Ahmad, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exploring+the+role+of+platelets+in+virus-induced+inflammatory+demyelinating+disease+and+myocarditis%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Exploring the role of platelets in virus-induced inflammatory demyelinating disease and myocarditis.</a> Int J Mol Sci. 25 (6), 3460(2024).</li>
<li>Olsson, T., Bergström, K., Thore, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+sensitive+method+for+determination+of+serum+hemoglobin+based+on+iso-luminol+chemiluminescence%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Chim+Acta%22%5BJournal%5D)">A sensitive method for determination of serum hemoglobin based on iso-luminol chemiluminescence.</a> Clin Chim Acta. 122 (2), 125-133 (1982).</li>
<li>Van der Meer, W., Dinnissen, J. M. B., de Keijzer, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+the+Sysmex+XT-2000i%2C+a+new+automated+haematology+analyser%5BTitle%5D)+AND+%22Sysmex%22%5BJournal%5D)">Evaluation of the Sysmex XT-2000i, a new automated haematology analyser.</a> Sysmex. (2002), Available at: https://www.sysmex.co.jp/en/products_solutions/library/journal/vol12_no2/summary03.html (2002).</li>
<li>Oshiro, I., Takenaka, T., Maeda, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+method+for+hemoglobin+determination+by+using+sodium+lauryl+sulfate+%28SLS%29%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Biochem%22%5BJournal%5D)">New method for hemoglobin determination by using sodium lauryl sulfate (SLS).</a> Clin Biochem. 15 (2), 83-88 (1982).</li>
<li>Hamaguchi, Y., Oshiro, I., Maeda, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+study+on+reaction+mechanism+of+sodium+lauryl+sulfate-hemoglobin+%28SLS-Hb%29%2C+Part+1%5BTitle%5D)+AND+%22Rinsho+Byori%22%5BJournal%5D)">A study on reaction mechanism of sodium lauryl sulfate-hemoglobin (SLS-Hb), Part 1.</a> Rinsho Byori. 40 (6), 649-654 (1992).</li>
<li>McGee, D. W., McMurray, D. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+protein+malnutrition+on+the+IgA+immune+response+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Immunology%22%5BJournal%5D)">The effect of protein malnutrition on the IgA immune response in mice.</a> Immunology. 63 (1), 25(1988).</li>
<li>Castigli, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+IgA+class+switching+in+APRIL-deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Impaired IgA class switching in APRIL-deficient mice.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 101 (11), 3903-3908 (2004).</li>
<li>Matsuo, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CCL28-deficient+mice+have+reduced+IgA+antibody-secreting+cells+and+an+altered+microbiota+in+the+colon%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">CCL28-deficient mice have reduced IgA antibody-secreting cells and an altered microbiota in the colon.</a> J Immunol. 200 (2), 800-809 (2018).</li>
<li>McDonald, K. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aging+impacts+isolated+lymphoid+follicle+development+and+function%5BTitle%5D)+AND+%22Immun+Ageing%22%5BJournal%5D)">Aging impacts isolated lymphoid follicle development and function.</a> Immun Ageing. 8 (1), 1-12 (2011).</li>
<li>Abolins, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+comparative+immunology+of+wild+and+laboratory+mice%2C+Mus+musculus+domesticus%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">The comparative immunology of wild and laboratory mice, Mus musculus domesticus.</a> Nat Commun. 8 (1), 1-13 (2017).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Aiguille de fixation animale</td><td>Natsume Seisakusho Co., Ltd., Tokyo, Japon</td><td>KN-358-A</td><td>Nous avons fixé une souris avec des aiguilles de fixation animales. Inox; longueur totale, 23 mm ; et pointe d’aiguille, 15 mm.</td></tr><tr><td>BD OptEIATM&nbsp ; Ensemble de réactifs de substrat TMB</td><td>BD Biosciences, San Diego, CA, États-Unis</td><td>555214</td><td>Nous avons ajouté 100 &mu ; L de solution de substrat TMB par puits.</td></tr><tr><td>Bell Jar</td><td>NA</td><td>NA</td><td>Nous avons utilisé un cloche pour l’anesthésie.</td></tr><tr><td>Plaques immuno-non stériles transparentes à fond plat à 96 puits&nbsp ;</td><td>ThermoFisher Scientific, Rochester, NY, États-Unis</td><td>442404</td><td>Nous avons utilisé des plaques immuno-non stériles transparentes à 96 puits à fond plat avec traitement de surface MaxiSorp pour les dosages immuno-enzymatiques.</td></tr><tr><td>Boule de coton</td><td>Sansho Co., Ltd., Tokyo, Japon</td><td>94-1951</td><td>Nous avons utilisé des boules de coton pour éviter la contamination du sang. Le diamètre des boules de coton était de 7 mm.</td></tr><tr><td>Sérum fœtal bovin</td><td>Sigma-Aldrich Co., St. Louis, MO, États-Unis</td><td>172012-500 ML</td><td>Nous avons ajouté 10 % de sérum fœtal bovin au diluant de dosage.</td></tr><tr><td>Pinces (micro-pinces pour les expériences de recherche, pointe incurvée)</td><td>Sansho Co., Ltd., Tokyo, Japon</td><td>91-1506</td><td>Nous avons utilisé des pinces pour la disection. Modèle, HSC 551-10 ; et sur toute la longueur, 105 mm.</td></tr><tr><td>Pinces (pinces à épiler de précision)</td><td>Sansho Co., Ltd., Tokyo, Japon</td><td>91-2772</td><td>Nous avons utilisé des pinces pour la disection. Modèle, HSC 607-12 ; couche sur toute la longueur, 120 mm ; et diamètre de la pointe, 0,3 mm.</td></tr><tr><td>Chèvre Anti-souris IgA-UNLB</td><td>SouthernBiotech, Birmingham, AL, États-Unis</td><td>1040-01</td><td>Nous avons enduit des plaques transparentes à fond plat immuno-non stériles à 96 puits avec 100 &mu ; L/puits (20 ng/puits) d’immunoglobuline A totale.</td></tr><tr><td>L’isoflurane&nbsp ;</td><td>Viatris Inc., Canonsburg, Pennsylvanie, États-Unis NA</td><td></td><td>Nous avons utilisé l’isoflurane pour l’anesthésie.</td></tr><tr><td>Ensemble de réactifs Luminol Rection</td><td>FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation, Osaka, Japon</td><td>124-06511</td><td>Nous avons utilisé un ensemble de réactifs de réaction au luminol pour détecter l’hémoglobine dans les échantillons NLF.</td></tr><tr><td>Microtube</td><td>Watson Co., Ltd., Tokyo, Japon</td><td>131-7155C</td><td>Nous avons utilisé des microtubes pour collecter le NLF et le BALF (microtube de 1,5 mL avec capuchon de verrouillage, fond rond, capuchon doux au toucher).</td></tr><tr><td>Eau Milli-Q</td><td>Merck KGaA, Darmstadt, Allemagne</td><td>Milli-Q Direct 8</td><td>Nous avons utilisé de l’eau MilliQ pour fabriquer une solution de luminorection supplémentaire.</td></tr><tr><td>Mini-Shaker PSU-2T</td><td>Biosan Ltd., Riga, Lettonie</td><td>PSU-2T</td><td>Nous avons secoué des plaques à 96 puits à l’aide du Mini-Shaler PSU-2T.</td></tr><tr><td>Souche</td><td>de souris CLEA Japan, Inc., Tokyo, Japon</td><td>NA</td><td>nous avons utilisé des souris mâles C57BL/6 âgées de 4 mois.</td></tr><tr><td>Nunc MicroWell 96 puits, traité Nunclon Delta, microplaque à fond plat</td><td>Thermo Fisher Scientific Nunc A/S . Kamstrupvej, Roskilde, Danemark</td><td>136101</td><td>Nous avons utilisé la microplaque NuncTM MicroWellTM 96 puits, Nunclon Delta-Treated, Flat-Bottom pour le test du luminol.</td></tr><tr><td>Fragment AffiniPure F(ab')2 UgG anti-souris de chèvre, F(ab')2 Spécifique (réaction croisée minimale aux protéines sériques humaines, bovines et de cheval)</td><td>Jackson ImmunoResearch Laboratories, Inc., West Grove, PA, États-Unis</td><td>115-036-072</td><td>Nous avons ajouté 100 &mu ; L de fragment de chèvre AffiniPure F(ab')2 conjugué à la peroxydase, spécifique du fragment F(ab')2, comme anticorps de détection (dilution 10 000 fois) à chaque puits.</td></tr><tr><td>Solution saline tamponnée au phosphate</td><td>Sigma-Aldrich Co., St. Louis, MO, États-Unis</td><td>D8537-500ML</td><td>Nous avons utilisé la solution saline tamponnée au phosphate de Dulbecco (modifiée sans chlorure de calcium et chlorure de magnésium, liquide, filtrée stérilement, adaptée à l’abattage cellulaire) pour la collecte de NLF et de BALF.</td></tr><tr><td>Pipette&nbsp ;</td><td>Watson Co., Ltd., Tokyo, Japon</td><td>NA</td><td>Nous avons utilisé un 200-&mu ; Pipette L pour le lavage nasal.</td></tr><tr><td>Pointe de pipette</td><td>Watson Co., Ltd., Tokyo, Japon</td><td>NA</td><td>Nous avons utilisé un 200-&mu ; L pointe de pipette multifit pour le lavage nasal.</td></tr><tr><td>Polyoxyéthylène(20) Monolaurate de sorbitan (Tween 20)</td><td>FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation, Osaka, Japon</td><td>167-11515</td><td>Nous avons ajouté 0,05 % de Tween 20 au tampon de lavage et 0,2 % de Tween 20 au diluant de dosage.</td></tr><tr><td>Anticorps IgG anti-souris de chèvre purifiée (réactivité x minimale)</td><td>BioLegend, San Diego, CA, États-Unis</td><td>405301</td><td>Nous avons enduit des plaques immuno-non stériles transparentes à fond plat à 96 puits avec 100 &mu ; L/puits (10 ng/puits) d’immunoglobuline G totale.</td></tr><tr><td>Petits ciseaux, double pointe</td><td>Sansho Co., Ltd., Tokyo, Japon</td><td>91-7005</td><td>Nous avons utilisé des ciseaux pour la dissécation. Modèle, S-4A ; et sur toute la longueur, 115 mm.</td></tr><tr><td>Acide sulfurique</td><td>Wako Pure Chemical Industries, Ltd, Tokyo, Japon</td><td>192-04755</td><td>Nous avons ajouté 50 &mu ; L de 2 N d’acide sulfurique à chaque puits pour arrêter la réaction.</td></tr><tr><td>Cathéter intraveineux Surflo&nbsp ;</td><td>Terumo Corporation, Tokyo, Japon&nbsp ;</td><td>SR-FS2032</td><td>Nous avons utilisé un cathéter intraveineux surflo et injecté du PBS dans la trachée pour le lavage broncho-alvéolaire. Cathéter, 20G ; longueur du cathéter, 32 mm ; diamètre intérieur du cathéter, 0,80 mm ; diamètre extérieur du cathéter, 1,1 mm ; et aiguille intérieure, 22G.</td></tr><tr><td>Ciseaux droits chirurgicaux</td><td>Sansho Co., Ltd., Tokyo, Japon</td><td>91-7004</td><td>Nous avons utilisé des ciseaux pour la dissécation. Modèle, S-3B ; et sur toute la longueur, 120 mm.</td></tr><tr><td>Plaque chirurgicale</td><td>Natsume Seisakusho Co., Ltd., Tokyo, Japon</td><td>KN-321-B</td><td>Nous avons utilisé une planche en liège pour la dissection. Profondeur, 20 cm ; largeur, 15 cm ; et hauteur 3 cm.</td></tr><tr><td>Lecteur de microplaques multimode hybride Synergy H1</td><td>Agilent Technologies, Inc., Santa Clara, CA, USA</td><td>NA</td><td>Nous avons mesuré l’absorbance d’échantillons à 450 nm, à l’aide du lecteur de microplaques multimode hybride Synergy H1.</td></tr><tr><td>Seringue</td><td>Terumo Corporation, Tokyo, Japon&nbsp ;</td><td>SS-01T</td><td>Nous avons utilisé une seringue de 1 mL pour prélever du sang dans le cœur.</td></tr><tr><td>Fil</td><td>&nbsp ; Niccho Kogyo Co., Ltd. Tokyo Japon</td><td>NA</td><td>Nous avons attaché un cathéter avec du fil pour assurer un bon positionnement pendant la procédure.</td></tr></tbody></table>

prélèvement de liquide de lavage nasal murin sans contamination sanguine

Murine Nasal Lavage Fluid Collection without Blood Contamination

À l’aide de la méthode conventionnelle ou nouvelle, des échantillons de FLN ont été prélevés sur des souris C57BL/6 par la voie transpharyngée. Comme le montre la figure 1, les échantillons de FLN prélevés par la méthode conventionnelle étaient légèrement teintés de rose (figure 1A) ; les échantillons de FLN prélevés par la nouvelle méthode étaient clairs (figure 1B). Comme la différence semblait résulter d’une contamination sanguin...

Prélèvement de liquide de lavage nasal murin sans contamination sanguine

Upper airway samples, including nasal lavage fluid (NLF) and nasal swabs, are useful in detecting pathogens, including viruses and bacteria, which can ...

murine-nasal-lavage-fluid-collection-without-blood-contamination

Research

Recherche

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologie et infection

Source : Venuprasad, K., et al. Administration intra-trachéale d’Haemophilus influenzae dans des modèles murins pour étudier l’inflammation des voies respiratoires. J. Vis. Exp. (2016)Cette vidéo montre la collecte et le traitement d’un liquide de lavage broncho-alvéolaire d’une souris euthanasiée infectée par Haemophilus influenzae non typable pour une analyse en aval.

Prélèvement de liquide de lavage broncho-alvéolaire sur un modèle de souris infecté par Haemophilus influenzae non typable

Cette vidéo montre l’utilisation de la cytométrie en flux pour identifier et compter diverses cellules immunitaires dans le liquide de lavage broncho-alvéolaire. Initialement, les cellules immunitaires uniques sont identifiées à l’aide d’un colorant de viabilité, suivi d’une coloration différentielle des protéines marqueurs de surface, ce qui permet d’énumérer précisément chaque type de cellule.

Identification et dénombrement des cellules immunitaires dans le liquide de lavage broncho-alvéolaire par cytométrie en flux

La colonisation du nasopharynx murin avec Streptococcus pneumoniae et l’extraction ultérieure des cellules adhérentes ou recrutées sont décrites. Cette technique consiste à rincer le nasopharynx et la collecte du liquide à travers les narines et est adaptable à diverses lectures, y compris la quantification cellulaire différentielle et l’analyse de l’expression de l’ARNm in situ.

Caractérisation des réponses inflammatoires au cours de la colonisation intranasale avec Streptococcus pneumoniae

L'état de santé du poumon se reflète dans le type et le nombre de cellules immunitaires présentes dans les bronchioles du poumon. Nous décrivons une technique de lavage broncho-alvéolaire qui permet l'isolement et l'étude de cellules non adhérentes et des facteurs solubles des voies respiratoires inférieures des souris.

Lavage bronchoalvéaire des poumons murins pour analyser l&#39;infiltration cellulaire inflammatoire

Ce protocole décrit une technique non invasive pour l’échantillonnage des liquides de muqueuse intacte les voies aériennes supérieures. Il peut être utilisé pour effectuer la quantification des niveaux de in vivo des médiateurs de protéines, tels que les cytokines et chimiokines, chez les sujets de tous âges.

Échantillonnage non invasive de muqueuse liquide pour la Quantification des niveaux d’immunitaire-médiateur In Vivo des voies respiratoires supérieures

Ce manuscrit décrit l’utilisation de techniques d’absorption nasal et bronchique, spécifiquement à l’aide de matrices d’absorption synthétiques (SAM) pour goûter le liquide de la muqueuse (MLF) des voies respiratoires supérieures et inférieures. Ces méthodes offrent la meilleure standardisation et la tolérance que les techniques d’échantillonnage respiratoires existants.

Absorption de liquides nasales et bronchiques : échantillonnage Precision de la muqueuse respiratoire humaine et traitement des échantillons en laboratoire

Ce protocole décrit une technique améliorée pour la collection abondante de liquide céphalo-rachidien (LCR) sans la contamination du sang. Avec une plus grande collecte d’échantillons et de la pureté, des analyses plus peuvent être effectuées à l’aide de CSF pour faire avancer notre compréhension des maladies qui affectent le cerveau et la moelle épinière.

Une méthode améliorée pour la collecte du liquide céphalo-rachidien de souris anesthésiés

Cette communication décrit les méthodes d’isolement et culture des macrophages alvéolaires, des humains et des modèles murins à des fins expérimentales.

Isolement et la Culture In Vitro de Macrophages alvéolaires murines et humaines

Le lavage nasal salin peut être utilisé pour échantillonner le microenvironnement immunitaire nasal canin. Parce que l’approche est relativement non invasive et ne perturbe pas les tissus nasaux, elle peut être réalisée en série. Les cellules et les protéines collectées à partir de la technique de lavage nasal peuvent être traitées pour diverses analyses de laboratoire.

Lavage salin pour l’échantillonnage du microenvironnement immunitaire nasal canin

Ici, nous présentons un protocole pour une technique de collecte de sang optimisée chez des sujets murins par ponction veineuse faciale à l’aide d’une lancette. Nous utilisons cette technique parallèlement à l’évaluation par cytométrie en flux pour caractériser les phénotypes cellulaires des souches transgéniques, congéniques et rapporteures. Il convient également à l’analyse des cytokines sériques et aux études sur le diabète.

Ponction veineuse faciale pour le prélèvement de sang murin

Apprenez une méthode de prélèvement de liquide de lavage nasal murin sans contamination sanguine. Cette technique améliore la détection des pathogènes respiratoires et l'analyse immunologique.

Prélèvement de liquide de lavage nasal murin sans contamination sanguine

Explorer plus de vidéos