Name: Un protocole basé sur la fluorescence pour le dépistage préliminaire des inhibiteurs de synthèse protéique provenant de sources naturelles (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-01-27T14:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 24 s
Description: Découvrez un protocole fluorométrique pour le dépistage d'inhibiteurs de synthèse protéique issus de sources naturelles. Cette méthode accessible forme les étudiants aux techniques modernes de découverte de médicaments.

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<ol><li>Merrick, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanism+and+regulation+of+eukaryotic+protein+synthesis%5BTitle%5D)+AND+%22Microbiol+Rev%22%5BJournal%5D)">Mechanism and regulation of eukaryotic protein synthesis.</a> Microbiol Rev. 56, 291-315 (1992).</li>
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<li>Ma, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dehydroabietylamine+exerts+antitumor+effects+by+affecting+nucleotide+metabolism+in+gastric+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Carcinogenesis%22%5BJournal%5D)">Dehydroabietylamine exerts antitumor effects by affecting nucleotide metabolism in gastric cancer.</a> Carcinogenesis. 45 (10), 759-772 (2024).</li>
<li>Shinde, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+single-cell+adhesion+force+kinetics+and+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">A review of single-cell adhesion force kinetics and applications.</a> Cells. 10 (3), 577(2021).</li>
<li>Vargas-Accarino, E., Herrera-Montávez, C., Ramón y Cajal, s, Aasen, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spontaneous+cell+detachment+and+reattachment+in+cancer+cell+lines%3A+an+in+vitro+model+of+metastasis+and+malignancy%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Spontaneous cell detachment and reattachment in cancer cell lines: an in vitro model of metastasis and malignancy.</a> Int J Mol Sci. 22 (9), 4929(2021).</li>
<li>Song, L., Hennink, E. J., Young, I. T., Tanke, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photobleaching+kinetics+of+fluorescein+in+quantitative+fluorescence+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys+J%22%5BJournal%5D)">Photobleaching kinetics of fluorescein in quantitative fluorescence microscopy.</a> Biophys J. 68 (6), 2588-2600 (1995).</li>
<li>Ling, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dehydroabietylamine+derivatives+target+triple-negative+breast+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Med+Chem%22%5BJournal%5D)">Dehydroabietylamine derivatives target triple-negative breast cancer.</a> Eur J Med Chem. 102, 9-13 (2015).</li>
<li>Gautam, L. N., Ling, T., Lang, W., Rivas, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anti-proliferative+evaluation+of+monoterpene+derivatives+against+leukemia%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Med+Chem%22%5BJournal%5D)">Anti-proliferative evaluation of monoterpene derivatives against leukemia.</a> Eur J Med Chem. 113, 75-80 (2016).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Lecteur multimode d’imagerie cellulaire Agilent Biotek Cytation 1</td><td>Agilent&nbsp ;</td><td>BTCYT1V</td><td></td></tr><tr><td>Composé 1 (Déshydroabitétylamine, CAS 1446-61-3)</td><td>Énamine</td><td>EN300-7409771</td><td></td></tr><tr><td>Composé 2 (Bakuchiol, CAS 10309-37-2)</td><td>ChemFaces</td><td>CFN99047</td><td></td></tr><tr><td>Heraeus Megafuge 16R</td><td>Thermo Scientific & nbsp ;</td><td>75004271</td><td></td></tr><tr><td>Plaque Ibidi GmbH-slide à 96 puits</td><td>Ibidi</td><td>80826</td><td></td></tr><tr><td>Lignées cellulaires MDA-MB-231</td><td>ATCC</td><td>ATCC HTB-26</td><td></td></tr><tr><td>Solution saline tamponnée phosphate pH 7,4</td><td>ATCC</td><td>ATCC 30-2200</td><td></td></tr><tr><td>Kit de synthèse protéique (vert)</td><td>Abcam</td><td>Ab239725</td><td></td></tr></tbody></table>

un protocole basé sur la fluorescence pour le dépistage préliminaire des inhibiteurs de synthèse protéique provenant de sources naturelles

A Fluorescence-based Protocol for Preliminary Screening of Protein Synthesis Inhibitors from Natural Sources

Un protocole basé sur la fluorescence pour le dépistage préliminaire des inhibiteurs de synthèse protéique provenant de sources naturelles

Natural products represent a rich source of therapeutic compounds with applications across multiple diseases, particularly cancer. By leveraging these ...

a-fluorescence-based-protocol-for-preliminary-screening-protein

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Dans cette vidéo, nous démontrons le test homogène de proximité luminescent amplifié, un test de proximité basé sur des billes. Il utilise des billes accepteuses et donneuses de taille homogène, immobilisées avec deux protéines qui ont tendance à interagir pour cribler les petites molécules potentielles inhibant les interactions protéiques.

Amplified luminescent Proximity Homogeneous Assay : Un test de proximité basé sur des billes pour cribler de petites molécules inhibant les interactions protéine-protéine

Cette vidéo montre le criblage de composés immunomodulateurs par fluorescence. Les lymphocytes T dérivés de souris transgéniques avec des cassettes d’expression de protéines fluorescentes vertes sont traités avec ces composés. Les signaux GFP améliorés et réduits permettent d'identifier les effets stimulants et inhibiteurs des composés, respectivement.

Un test basé sur la fluorescence utilisant des lymphocytes modifiés pour le criblage de composés immunomodulateurs

Une approche rationalisée de dépistage de l'expression des protéines membranaires recombinantes dans Escherichia coli basée sur la fusion de la protéine fluorescente verte est présenté.

Green Fluorescent Protein base Expression dépistage des protéines membranaires dans<em&gt; Escherichia coli</em

Un protocole pour le criblage de petits médicaments moléculaires basé sur la synthèse in situ de nanoclusters d’or fluorescents ultra-petits (NC Au) en utilisant des protéines chargées de médicaments comme modèle est présenté. Cette méthode est simple pour déterminer l’affinité de liaison des médicaments à une protéine cible par un signal fluorescent visible émis par les NC Au à matrice de protéines.

Un rapide et quantitative Méthode fluorimétrique pour Small Molecule dépistage du médicament protéique Ciblage

Nous présentons dans l'étude d'un nouveau test basé sur la fluorescence en utilisant des lymphocytes dérivés d'une souris transgénique. Ce dosage est adapté pour le criblage à haut débit (HTS) de petites molécules dotées de la capacité de l'une ou l'inhibition de la promotion de l'activation des lymphocytes.

A base Fluorescence-lymphocytaire Assay Convient pour Criblage à haut débit des petites molécules

Cet article décrit une méthode pour visualiser et quantifier les événements de traduction localisée dans les compartiments subcellulaires. L’approche proposée dans ce manuscrit nécessite un système d’imagerie confocal base et réactifs et est rapide et rentable.

Immunofluorescence quantitative de mesure globale localisée Translation

Une méthode de microdilution bouillon simple et adaptable pour le dépistage des substances antifongiques et extraits.

Bouillon Microdilution In Vitro Screening : une méthode simple et rapide pour détecter les nouveaux composés antifongiques

Nous présentons ici la procédure détaillée d’une plateforme de test de protéase récemment développés utilisant la protéine liant le maltose/protéine N-terminale et fusionné avec protéines recombinantes substrats fluorescents attachés à la surface de nickel-nitrilotriacétique acide magnétique agarose perles. Une analyse ultérieure de dans-gel de l’essai des échantillons séparés par électrophorèse sur gel sodium dodécyl sulfate polyacrylamide est également présentée.

Utilisation des protéines de Fusion recombinantes dans une plate-forme de test de protéase Fluorescent et leur Renaturation en gel

Le suivi des événements de traduction individuels permet des études cinétiques à haute résolution des mécanismes de traduction dépendant du plafond. Ici nous démontrons un essai in vitro d’une seule molécule basé sur des interactions de formation image entre les anticorps fluorescents étiquetés et les peptides naissants épitope-marqués. Cette méthode permet la caractérisation à molécule unique de la cinétique d’initiation et d’élongation peptidique lors de la traduction active in vitro...

Un essai in vitro d’imagerie à molécule unique pour l’analyse de la cinétique de traduction cap-dépendante

La surveillance des changements dans la température de fusion d’une protéine cible(c.-à-d.essai de décalage thermique, TSA) est une méthode efficace pour filtrer les bibliothèques de fragments de quelques centaines de composés. Nous présentons un protocole TSA mettant en œuvre la fluorimétrie à balayage nano-différentiel assistée par robotique (nano-DSF) pour surveiller la fluorescence intrinsèque du tryptophane et la rétrodiffusion de la lumière pour le criblage des fragments.

Fluorimétrie à balayage nano-différentiel pour le criblage dans la découverte de plomb à base de fragments

Ce protocole décrit un test biochimique par déplacement de gel pour mesurer l’activité de FEN1 (Flap Endonuclease 1) et le développement d’inhibiteurs.

Détection par fluorescence de l’activité des nucléases FEN1 et criblage d’inhibiteurs de petites molécules

Découvrez un protocole fluorométrique pour le dépistage d'inhibiteurs de synthèse protéique issus de sources naturelles. Cette méthode accessible forme les étudiants aux techniques modernes de découverte de médicaments.

Un protocole basé sur la fluorescence pour le dépistage préliminaire des inhibiteurs de synthèse protéique provenant de sources naturelles (Vidéo) | JoVE Journal

Un protocole basé sur la fluorescence pour le dépistage préliminaire des inhibiteurs de synthèse protéique provenant de sources naturelles

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