Name: Technique d’injection sous-rétinienne transsclérale mini-invasive optimisée chez la souris (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-25T13:10:00.000+00:00
Duration: 6 min 46 s
Description: Découvrez une technique d'injection sous-rétinienne transsclérale mini-invasive optimisée chez la souris. Cette méthode améliore la reproductibilité et réduit les dommages chirurgicaux pour les études précliniques en thérapie rétinienne.

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<ol><li>Trapani, I., Banfi, S., Simonelli, F., Surace, E. M., Auricchio, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+therapy+of+inherited+retinal+degenerations%3A+prospects+and+challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Gene therapy of inherited retinal degenerations: prospects and challenges.</a> Hum Gene Ther. 26, 193-200 (2015).</li>
<li>Peng, Y., Tang, L., Zhou, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subretinal+Injection%3A+A+Review+on+the+Novel+Route+of+Therapeutic+Delivery+for+Vitreoretinal+Diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmic+Res%22%5BJournal%5D)">Subretinal Injection: A Review on the Novel Route of Therapeutic Delivery for Vitreoretinal Diseases.</a> Ophthalmic Res. 58, 217-226 (2017).</li>
<li>Simunovic, M. P., Xue, K., Jolly, J. K., MacLaren, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structural+and+Functional+Recovery+Following+Limited+Iatrogenic+Macular+Detachment+for+Retinal+Gene+Therapy%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Structural and Functional Recovery Following Limited Iatrogenic Macular Detachment for Retinal Gene Therapy.</a> JAMA Ophthalmol. 135, 234-241 (2017).</li>
<li>Parikh, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+Alternative+and+Validated+Injection+Method+for+Accessing+the+Subretinal+Space+via+a+Transcleral+Posterior+Approach%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">An Alternative and Validated Injection Method for Accessing the Subretinal Space via a Transcleral Posterior Approach.</a> J Vis Exp. (118), e54808(2016).</li>
<li>Testa, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-year+follow-up+after+unilateral+subretinal+delivery+of+adeno-associated+virus+in+patients+with+Leber+congenital+Amaurosis+type+2%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Three-year follow-up after unilateral subretinal delivery of adeno-associated virus in patients with Leber congenital Amaurosis type 2.</a> Ophthalmology. 120, 1283-1291 (2013).</li>
<li>Ghazi, N. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treatment+of+retinitis+pigmentosa+due+to+MERTK+mutations+by+ocular+subretinal+injection+of+adeno-associated+virus+gene+vector%3A+results+of+a+phase+I+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Genet%22%5BJournal%5D)">Treatment of retinitis pigmentosa due to MERTK mutations by ocular subretinal injection of adeno-associated virus gene vector: results of a phase I trial.</a> Hum Genet. 135, 327-343 (2016).</li>
<li>Bennett, J., Anand, V., Acland, G. M., Maguire, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cross-species+comparison+of+in+vivo+reporter+gene+expression+after+recombinant+adeno-associated+virus-mediated+retinal+transduction%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Enzymol%22%5BJournal%5D)">Cross-species comparison of in vivo reporter gene expression after recombinant adeno-associated virus-mediated retinal transduction.</a> Methods Enzymol. 316, 777-789 (2000).</li>
<li>Muhlfriedel, R., Michalakis, S., Garcia Garrido, M., Biel, M., Seeliger, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimized+technique+for+subretinal+injections+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Optimized technique for subretinal injections in mice.</a> Methods Mol Biol. 935, 343-349 (2013).</li>
<li>Hejri, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+non-surgical+method+for+subretinal+delivery+by+trans-scleral+microneedle+injection%5BTitle%5D)+AND+%22Bioeng+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">A non-surgical method for subretinal delivery by trans-scleral microneedle injection.</a> Bioeng Transl Med. 10 (3), e10755(2025).</li>
<li>Sastry, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microscope-Integrated+OCT-Guided+Volumetric+Measurements+of+Subretinal+Blebs+Created+by+a+Suprachoroidal+Approach%5BTitle%5D)+AND+%22Transl+Vis+Sci+Technol%22%5BJournal%5D)">Microscope-Integrated OCT-Guided Volumetric Measurements of Subretinal Blebs Created by a Suprachoroidal Approach.</a> Transl Vis Sci Technol. 10, 24(2021).</li>
<li>Blanc, V. F., Jacob, J. L., Milot, J., Cyrenne, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+oculorespiratory+reflex+revisited%5BTitle%5D)+AND+%22Can+J+Anaesth%22%5BJournal%5D)">The oculorespiratory reflex revisited.</a> Can J Anaesth. 35, 468-472 (1988).</li>
<li>Dewar, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+oculocardiac+reflex%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+R+Soc+Med%22%5BJournal%5D)">The oculocardiac reflex.</a> Proc R Soc Med. 69, 373-374 (1976).</li>
<li>Katzung, B. G. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKatzung%2C+BG+%22Basic+%26amp%3B+clinical+pharmacology%22">Basic &amp; clinical pharmacology</a>. , 9th ed, Lange Medical Books/McGraw Hill. New York, USA. (2004).</li>
<li>Mai, X., Huang, S., Chen, W., Ng, T. K., Chen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+Optical+Coherence+Tomography+to+a+Mouse+Model+of+Retinopathy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Application of Optical Coherence Tomography to a Mouse Model of Retinopathy.</a> J Vis Exp. (179), e63421(2022).</li>
<li>L'Abbate, D., Prescott, K., Geraghty, B., Kearns, V. R., Steel, D. H. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biomechanical+considerations+for+optimising+subretinal+injections%5BTitle%5D)+AND+%22Surv+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Biomechanical considerations for optimising subretinal injections.</a> Surv Ophthalmol. 69, 722-732 (2024).</li>
<li>Huang, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subretinal+injection+in+mice+to+study+retinal+physiology+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Subretinal injection in mice to study retinal physiology and disease.</a> Nat Protoc. 17, 1468-1485 (2022).</li>
<li>Stockslager, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optical+method+for+automated+measurement+of+glass+micropipette+tip+geometry%5BTitle%5D)+AND+%22Precis+Eng%22%5BJournal%5D)">Optical method for automated measurement of glass micropipette tip geometry.</a> Precis Eng. 46, 88-95 (2016).</li>
<li>Li, Q., Rycaj, K., Chen, X., Tang, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+stem+cells+and+cell+size%3A+A+causal+link%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Cancer+Biol%22%5BJournal%5D)">Cancer stem cells and cell size: A causal link.</a> Semin Cancer Biol. 35, 191-199 (2015).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Chlorure de sodium injectable à 0,9 %, USP</td><td>Hospira</td><td>PAA130066</td><td></td></tr><tr><td>Solution ophtalmique de sulfate d’atropine à 1 %, USP</td><td>Akorn</td><td>NDC 17478-215-05</td><td></td></tr><tr><td>30&deg ; couteau diamant</td><td>Katena</td><td>K2-6560</td><td></td></tr><tr><td>AmScope 6W LED double illuminateur à col de cygne</td><td>AmScope</td><td>LED-11CR</td><td></td></tr><tr><td>Ciseaux Vannas coudés</td><td>Roboz</td><td>RS-5618</td><td></td></tr><tr><td>Solution d’irrigation stérile BSS</td><td>Alcon</td><td>289010-0902</td><td></td></tr><tr><td>Gouttes oculaires dilatantes Cyclomydril</td><td>Alcon</td><td>0065-0359-02</td><td>0,2 % cyclopentolate, 1 % phényléphrine</td></tr><tr><td>Pointes de pipette epT.I.P.S. MicroloaderTM</td><td>Eppendorf</td><td>5242 956.003</td><td></td></tr><tr><td>Micro-injecteur FemtoJet 4i</td><td>Eppendorf</td><td>E5252000021</td><td>Produit discontinué</td></tr><tr><td>Pommade oculaire lubrifiante GenTeal Tears</td><td>Alcon</td><td>16027802</td><td></td></tr><tr><td>Aiguilles de micro-injection en verre</td><td>Clunbury Scientific</td><td>Réf. B100-58-50</td><td>30&deg ; biseau. Diamètre : 50 & micro ; m extérieur, 29 & micro ; m intérieur</td></tr><tr><td>Solution d’isoflurane</td><td>Convoitise</td><td>29405</td><td></td></tr><tr><td>Microscope d’imagerie rétinienne MICRON IV avec OCT guidé par l’image</td><td>Phénix</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Stéréomicroscope SteREO Discovery.V8</td><td>Zeiss</td><td>495015-0001-000</td><td></td></tr><tr><td>Pince dentée à verrouillage Stern-Castroviejo</td><td>Katena</td><td>Référence K5-2552</td><td></td></tr><tr><td>Pinces dentées</td><td>Roboz</td><td>RS-5172</td><td></td></tr><tr><td>Fils de nettoyage en tungstène pour aiguilles de calibre 23s</td><td>Hamilton</td><td>18306</td><td></td></tr><tr><td>Lances oculaires Ultracell PVA</td><td>Médical aux BVI</td><td>40400-8</td><td></td></tr><tr><td>Seringues à insuline Ultra-Fine2015</td><td>BD</td><td>328438</td><td>3/10 ml, 8 mm (5/16 po), 31 g</td></tr></tbody></table>

technique d’injection sous-rétinienne transsclérale mini-invasive optimisée chez la souris

Optimized Minimally Invasive Transscleral Subretinal Injection Technique in Mouse

Une injection réussie à l’aide de cette technique transsclérale génère une bulle sous-rétinienne observable sur OCT immédiatement après la procédure d’injection (Figure 2A). Compte tenu du défi technique de cette technique, l’étape d’imagerie est indispensable pour identifier les animaux injectés avec succès. Pour les chercheurs qui prévoient d’utiliser cette technique pour des expériences de thérapie génique, nous recommandons d’effectuer des injections pratiques avec des particules de viru...

Technique d’injection sous-rétinienne transsclérale mini-invasive optimisée chez la souris

The conventional method of material delivery to the subretinal space in the mouse involves dual perforation of the neural retina, which causes extensive ...

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Cette technique chirurgicale illustre l'injection de vecteurs de thérapie génique et les cellules souches dans l'espace sous-rétinien de l'oeil de la souris.

Injection sous-rétinien de vecteurs de thérapie génique et les cellules souches dans l&#39;œil de la souris

Source : Park, S. W., et al. Approche limbique-injection sous-rétinienne de vecteurs viraux pour la thérapie génique chez l’épithélium pigmentaire rétinien de souris. J. Vis. Exp. (2015)La vidéo décrit la méthode d’injection sous-rétinienne de vecteurs viraux dans l’épithélium pigmentaire rétinien (EPR) dans un modèle murin. Il détaille la procédure, de l’anesthésie et de la préparation oculaire à l’administration précise du vecteur lentiviral, assurant l’intégration et l’expression des gènes...

Injection sous-rétinienne de vecteurs viraux dans l’épithélium pigmentaire rétinien dans un modèle murin

Source : Parikh, S., et al. Une méthode d’injection alternative et validée pour accéder à l’espace sous-rétinien via une approche transclérale postérieure. J. Vis. Exp. (2016)Cette vidéo montre la procédure d’administration d’un colorant fluorescent dans l’espace sous-rétinien d’une souris. Le processus consiste à anesthésier la souris, à préparer l’œil, à faire des incisions précises pour accéder à l’espace sous-rétinien et à injecter le colorant pour créer un décollement de rétine contrôlé.

Administration d’un colorant fluorescent dans l’espace sous-rétinien d’une souris

Nous présentons ici un protocole accepté par la communauté en format multimédia pour l’injection sous-rétinienne d’un bolus de cellules EPR chez le rat et la souris. Cette approche peut être utilisée pour déterminer les potentiels de sauvetage, les profils d’innocuité et les capacités de survie des cellules EPR greffées lors de l’implantation dans des modèles animaux de dégénérescence rétinienne.

Exécution sous-rétinienne injections chez les rongeurs de produire des cellules de l&#39;épithélium pigmentaire rétinien Suspension

L’injection directe dans le nerf optique du rat est utile pour la recherche régénérative. Nous démontrons une technique mini-invasive d’injection directe dans un nerf optique de rat qui n’implique pas d’ouverture du crâne. Grâce à cette méthode, les complications chirurgicales sont minimisées et la récupération est plus rapide.

Technique mini-invasive pour injection dans Rat Optic Nerve

L’injection sous-rétinienne est une technique chirurgicale permettant une administration efficace de gènes à l’épithélium pigmentaire rétinien de l’œil de souris.  Nous décrivons ici une méthode simple et reproductible pour l’injection sous-rétinienne de vecteurs viraux dans l’épithélium pigmentaire rétinien chez des souris expérimentales.

Limbal injection Approche-sous-rétinienne de vecteurs viraux pour la thérapie génique chez la souris épithélium pigmentaire rétinien

Les injections sous-rétiniennes sont la technique la plus courante pour administrer de grands agents thérapeutiques tels que des protéines et des vecteurs viraux aux photorécepteurs et à l’épithélium pigmentaire rétinien. Une méthode alternative chez la souris qui cible avec succès l’espace sous-rétinien avec des dommages collatéraux minimaux et des temps de récupération rapides est décrite ici.

Une méthode alternative et Validé Injection pour l&#39;accès à l&#39;espace sous-rétinien<i&gt; via</i&gt; Une approche transclérale Postérieur

Injection sous-rétinienne a été largement appliquée dans les études précliniques de thérapie de remplacement de cellules souches pour la dégénérescence maculaire liée à l’âge. Dans cet article visualisé, nous décrivons une technique d’injection sous-rétinienne moins risqués, reproductibles et précisément modifiés via l’approche trans-sclérale pour livrer des cellules dans les yeux de rat.

Élaboration d’un protocole raffiné pour Trans-sclérale Transplantation sous-rétinienne des cellules épithéliales humaines pigmentaire dans les yeux de Rat

Nous démontrons une nouvelle approche à l’utilisation de tomographie à cohérence optique domaine spectral haute résolution (HR-SD-OCT) pour aider l’administration d’agents de thérapie génique dans l’espace sous-rétinienne, évaluer sa couverture areal et caractériser la vitalité des photorécepteurs.

Tomographie à cohérence optique souris ultra haute résolution pour faciliter l’Injection intraoculaire dans la recherche de la thérapie génique rétinienne

Ce protocole présente une approche trans-sclérale guidée par la vision transpupillaire pour administrer en toute sécurité et avec précision des greffons cellulaires sous-rétiniens, avec un faible taux de complications chirurgicales, chez des souris receveuses avec ou sans dégénérescence rétinienne.

Transplantation transsclérale guidée par voie transpupillaire de greffons sous-rétiniens dans un modèle murin de dégénérescence rétinienne

Cet article décrit les méthodes d’injection sous-rétinienne chez le rat, en utilisant la visualisation peropératoire pour contrôler à la fois le site d’injection et la zone de décollement de la rétine.

Visualisation peropératoire de l’injection sous-rétinienne et du décollement de la rétine chez le rat

Découvrez une technique d'injection sous-rétinienne transsclérale mini-invasive optimisée chez la souris. Cette méthode améliore la reproductibilité et réduit les dommages chirurgicaux pour les études précliniques en thérapie rétinienne.

Technique d’injection sous-rétinienne transsclérale mini-invasive optimisée chez la souris

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