Name: Développement de lignées organoïdes dérivées de souris à partir de cellules épithéliales de trompes de Fallope pour la modélisation du carcinome de l’ovaire séreux de haut grade (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-08-06T14:30:00.000+00:00
Duration: 6 min 51 s
Description: Découvrez le développement d'organoïdes dérivés de trompes de Fallope murines pour modéliser le carcinome séreux de l'ovaire de haut grade. Cette méthode permet d'étudier les interactions tumorales et immunitaires in vivo.

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<ol><li>Korch, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DNA+profiling+analysis+of+endometrial+and+ovarian+cell+lines+reveals+misidentification%2C+redundancy+and+contamination%5BTitle%5D)+AND+%22Gynecol.+Oncol%22%5BJournal%5D)">DNA profiling analysis of endometrial and ovarian cell lines reveals misidentification, redundancy and contamination.</a> Gynecol. Oncol. 127 (1), 241-248 (2012).</li>
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<li>Zhao, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoids%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Methods+Primers%22%5BJournal%5D)">Organoids.</a> Nat Rev Methods Primers. 2, 94(2022).</li>
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</ol>

<table><tbody><tr><td>0,25 % de trypsina, 0,1 % d’EDTA dans le HBSS sans calcium, magnésium et bicarbonate de sodium</td><td>Corning</td><td>25053CI</td><td></td></tr><tr><td>A83-01</td><td>Tocris Bioscience</td><td>2939</td><td></td></tr><tr><td>DMEM avancé/F12</td><td>Gibco</td><td>12-634-028</td><td></td></tr><tr><td>Âgée C57BL/6J (femme)</td><td>Le laboratoire Jackson</td><td>000664</td><td></td></tr><tr><td>Mini kit AllPrep ADN/ARN</td><td>QIAGEN</td><td>80204</td><td>Pour l’extraction d’ADN/ARN</td></tr><tr><td>Alt-R S.p. Cas9-GFP V3</td><td>Technologies ADN intégrées</td><td>10008100</td><td></td></tr><tr><td>Anticorps anti-Ki67</td><td>Abcam</td><td>ab15580</td><td></td></tr><tr><td>Système AutoClip</td><td>Outils scientifiques finement</td><td>12020-00</td><td>Pour la fermeture de plaie après l’IBI</td></tr><tr><td>Complément de B-27 (50 fois), sans sérum</td><td>Gibco</td><td>17-504-001</td><td></td></tr><tr><td>Blasticidine HCl (10 mg/mL) 50 mg</td><td>InvivoGen</td><td>ANT-BL-05</td><td></td></tr><tr><td>Albumine sérique bovine</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A9647</td><td></td></tr><tr><td>Buffer RLT Plus</td><td>QIAGEN</td><td>1053393</td><td>Lyser les cellules avant l’extraction de l’ADN/ARN</td></tr><tr><td>Solution de récupération cellulaire</td><td>Corning</td><td>354253</td><td></td></tr><tr><td>Collagénase/Hyaluronidase</td><td>STEMCELL Technologies</td><td>07912</td><td></td></tr><tr><td>CoraLite 594-Phalloidin (rouge)</td><td>Proteintech</td><td>PF00003</td><td></td></tr><tr><td>Verre de couverture 15CIR-1</td><td>Fisherbrand</td><td>12-545-83</td><td></td></tr><tr><td>Verre de couverture 24 mm & aigu ; 40 mm-1</td><td>Fisherbrand</td><td>12-544-12</td><td></td></tr><tr><td>Supplément N-2 CTS (Cell Therapy Systems)</td><td>Gibco</td><td>A1370701</td><td></td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Roche</td><td>10236276001</td><td></td></tr><tr><td>Désoxyribonucléase I (DNAse I) provenant du pancréas bovin</td><td>Sigma Aldrich</td><td>D5025</td><td></td></tr><tr><td>Lait écrémé Difco</td><td>Becton Dickinson</td><td>232100</td><td></td></tr><tr><td>Dispase</td><td>STEMCELL Technologies</td><td>07913</td><td></td></tr><tr><td>DMEM avec L-glutamine, 4,5 g/L de glucose et pyruvate de sodium</td><td>Corning</td><td>10013CV</td><td></td></tr><tr><td>DNase I recombinante, sans RNase</td><td>Roche</td><td>04716728001</td><td></td></tr><tr><td>La solution tamponnée phosphate de Dulbecco</td><td>Sigma Aldrich</td><td>D8537</td><td></td></tr><tr><td>Dumont #5 - Pinces recouvertes de céramique</td><td>Outils scientifiques finement</td><td>11252-50</td><td>Pour la dissection des trompes de Fallope</td></tr><tr><td>Sérum fœtal bovin</td><td>Corning</td><td>35-010-CV</td><td>Inactivation thermique à 56 °C ; C pendant 60 min.</td></tr><tr><td>Ciseaux fins - ToughCut</td><td>Outils scientifiques finement</td><td>14058-09</td><td>Pour la prélèvement de trompes de Fallope et l’incision IBI</td></tr><tr><td>Antibiotique sélectif à la génétiqueine (G418 Sulfate) (50 mg/mL)</td><td>Gibco</td><td>10131027</td><td></td></tr><tr><td>Supplément GlutaMAX (100x)</td><td>Gibco</td><td>35-050-061</td><td></td></tr><tr><td>Anticorps secondaire adsorbé croisé contre l’IgG de lapin (H+L) de chèvre, Cyanine3</td><td>Invitrogen</td><td>A10520</td><td></td></tr><tr><td>Pince Graefe</td><td>Outils scientifiques finement</td><td>11053-10</td><td>Pour la manipulation de tissus</td></tr><tr><td>Tampon HEPES</td><td>Corning</td><td>25060CI</td><td></td></tr><tr><td>Protéine recombinante R-Spondine 1 humaine</td><td>PeproTech</td><td>120-38</td><td></td></tr><tr><td>Seringue à insuline, U-100 0,5 mL 0,36 mm (28 G)x 12,7 mm (1/2")</td><td>BD</td><td>BD329461</td><td></td></tr><tr><td>Insuline-Transferrin-Sélénium (ITS -G) (100x)</td><td>Gibco</td><td>41-400-045</td><td></td></tr><tr><td>L-Glutamine 200 mM (100x)</td><td>Gibco</td><td>25-030-081</td><td></td></tr><tr><td>Matrice membranaire de socle GFR Matrigel</td><td>Corning</td><td>356231</td><td>BMM</td></tr><tr><td>Protéine recombinante EGF de souris</td><td>PeproTech</td><td>315-09</td><td></td></tr><tr><td>Protéine recombinante FGF-base de la souris</td><td>PeproTech</td><td>450-33</td><td></td></tr><tr><td>Protéine recombinante de Noggin de souris</td><td>PeproTech</td><td>250-38</td><td></td></tr><tr><td>Protéine recombinante Wnt-3a de la souris</td><td>PeproTech</td><td>315-20</td><td></td></tr><tr><td>Supplément N2</td><td>Gibco</td><td>17502048</td><td></td></tr><tr><td>Amide de N-acétylcystéine</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A0737</td><td></td></tr><tr><td>Système d’électroporation Neon NxT</td><td>Invitrogen</td><td>NEON1S</td><td>Pour l’électroporation CRISPR-Cas9</td></tr><tr><td>Système d’électroporation Neon NxT 10-&mu ; Kit L avec tubes à un canal</td><td>Invitrogen</td><td>N1025</td><td>Consommables pour l’électroporation, y compris le tampon d’édition du génome</td></tr><tr><td>Nicotinamide</td><td>Sigma Aldrich</td><td>N3376</td><td></td></tr><tr><td>Sérum normal pour souris</td><td>Invitrogen</td><td>10410</td><td></td></tr><tr><td>Sérum normal pour rats</td><td>STEMCELL Technologies</td><td>13551</td><td></td></tr><tr><td>Médium sérique réduit Opti-MEM I</td><td>Gibco</td><td>31985070</td><td></td></tr><tr><td>Anticorps polyclonal PAX8</td><td>Proteintech</td><td>10336-1-AP</td><td></td></tr><tr><td>Pénicilline-Streptomycine (10 000 U/mL)</td><td>Gibco</td><td>15-140-122</td><td></td></tr><tr><td>Puromycine</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P8833</td><td></td></tr><tr><td>Selectfrost 25 mm & aigu ; 75 mm et aigu ; 1,0 mm</td><td>Fisherbrand</td><td>12-550-003</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Bioréactifs de Fisher</td><td>BP151</td><td></td></tr><tr><td>TrypLE Express Enzyme (1x), sans phénol rouge</td><td>Gibco</td><td>12-604-013</td><td></td></tr><tr><td>Ciseaux à ressort Vannas - Tranchant de 4 mm</td><td>Outils scientifiques finement</td><td>15019-10</td><td>Pour la dissection des trompes de Fallope</td></tr><tr><td>Y27632</td><td>STEMCELL Technologies</td><td>72304</td><td>Inhibiteur de la rho-kinase (ROCK) &nbsp ;</td></tr></tbody></table>

développement de lignées organoïdes dérivées de souris à partir de cellules épithéliales de trompes de fallope pour la modélisation du carcinome de l’ovaire séreux de haut grade

Development of Mouse-Derived Organoid Lines from Fallopian Tube Epithelial Cells for High Grade Serous Ovarian Carcinoma Modeling

Développement de lignées organoïdes dérivées de souris à partir de cellules épithéliales de trompes de Fallope pour la modélisation du carcinome de l’ovaire séreux de haut grade

Effective modeling of diseases in realistic environments is crucial to improve our understanding of diverse pathologies. In this aspect, organoids offer a ...

development-mouse-derived-organoid-lines-from-fallopian-tube

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Un modèle orthotopique de cancer ovarien séreux dans des souris immunocompétentes In vivo L&#39;imagerie des tumeurs et le suivi des tumeurs réponses immunitaires

Une méthode de microdissection de l’oviducte de souris qui permet la collecte des segments individuels tout en maintenant l’intégrité de l’ARN est présentée. En outre, une procédure de dissociation des cellules oviductales non enzymatiques est décrite. Les méthodes sont appropriées pour l’analyse ultérieure des gènes et des protéines des segments oviductaux fonctionnellement différents et des cellules oviductales dissociées.

Microdissection et dissociation de l’oviducte murin : identification de segment individuel et isolement unicellulaire

Ce protocole décrit des méthodologies pour établir des organoïdes épithéliaux de l’endomètre de souris pour l’expression génique et les analyses histologiques.

Établissement d’organoïdes endométriaux 3D à partir de l’utérus de souris

Ce protocole traite d’une approche pour générer des organoïdes épithéliaux à partir de tissu mammaire primaire normal et tumoral par centrifugation différentielle. En outre, des instructions sont incluses pour la culture tridimensionnelle ainsi que l’imagerie immunofluorescente des organoïdes intégrés.

Génération et imagerie d’organoïdes épithéliaux de souris et humains à partir de tissus mammaires normaux et tumoraux sans passage

Les organoïdes dérivés de patients (AOP) sont une culture tridimensionnelle (3D) qui peut imiter l’environnement tumoral in vitro. Dans le cancer séreux de l’ovaire de haut grade, les AOP représentent un modèle pour étudier de nouveaux biomarqueurs et thérapeutiques.

Génération et culture d’organoïdes dérivés de patients atteints d’un cancer de l’ovaire séreux de haut grade

Ce protocole décrit la microinjection et l’électroporation in vivo pour l’édition du génome médiée par CRISPR restreinte régionalement dans l’oviducte de souris.

Modèles murins génétiquement modifiés par génome somatique utilisant la microinjection et l’électroporation in vivo

Ce protocole offre un cadre systématique pour l’établissement d’organoïdes du cancer de l’ovaire à différents stades de la maladie et relève les défis de la variabilité spécifique à la patiente pour augmenter le rendement et permettre une expansion robuste à long terme pour des applications ultérieures. Il comprend des étapes détaillées pour le traitement des tissus, l’ensemencement, l’ajustement des exigences en matière de milieux et la coloration par immunofluorescence.

Stratégie de mise en banque d’organoïdes du cancer de l’ovaire : Aborder l’hétérogénéité interpatiente entre les sous-types histologiques et les stades de la maladie

Ce protocole décrit l’établissement d’organoïdes tissulaires tridimensionnels (3D) à partir de cellules primaires d’épithélium de surface ovarienne humaine (hOSE). Le protocole comprend l’isolement de l’hOSE à partir d’ovaires fraîchement collectés, l’expansion cellulaire de l’hOSE, les procédures de cryoconservation-décongélation et la dérivation d’organoïdes. L’immunofluorescence, l’analyse quantitative et la démonstration de l’utilité en tant que plate-forme de dépistage sont incluses.

Les organoïdes de l’épithélium de surface de l’ovaire humain comme plate-forme pour étudier la régénération des tissus

Ce protocole décrit une méthode d’une journée pour l’isolement des cellules épithéliales des trompes de Fallope humaines. Les cellules épithéliales isolées peuvent être plaquées en culture bidimensionnelle (2D) ou dissociées en suspensions unicellulaires et utilisées dans des expériences en aval, y compris la cytométrie en flux et le séquençage de l’ARN unicellulaire.

Une méthode efficace d’extraction de l’épithélium de la trompe de Fallope humaine pour des analyses de cellules uniques

Nous décrivons des méthodes pour isoler les cellules somatiques ovariennes de souris à partir d’une fraction enrichie en strome de l’ovaire et pour générer des organoïdes somatiques ovariens de souris en utilisant une approche sans échafaudage.

Sonder le microenvironnement ovarien : méthodes d’isolement, culture 2D et culture organoïde des cellules somatiques ovariennes de souris

Découvrez le développement d'organoïdes dérivés de trompes de Fallope murines pour modéliser le carcinome séreux de l'ovaire de haut grade. Cette méthode permet d'étudier les interactions tumorales et immunitaires in vivo.

Développement de lignées organoïdes dérivées de souris à partir de cellules épithéliales de trompes de Fallope pour la modélisation du carcinome de l’ovaire séreux de haut grade (Vidéo) | JoVE Journal

Développement de lignées organoïdes dérivées de souris à partir de cellules épithéliales de trompes de Fallope pour la modélisation du carcinome de l’ovaire séreux de haut grade

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