Name: In vitro Perfusion intraluminale de gel : une approche avancée pour l’analyse microscopique des artères de résistance humaine (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-08-19T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 20 s
Description: Découvrez une méthode de perfusion intraluminale de gel pour préserver l'architecture des artères de résistance humaines. Cette technique permet l'analyse histologique et moléculaire détaillée des tissus vasculaires.

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<ol><li>Intengan, H. D., Schiffrin, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+remodeling+in+hypertension%3A+Roles+of+apoptosis%2C+inflammation%2C+and+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Vascular remodeling in hypertension: Roles of apoptosis, inflammation, and fibrosis.</a> Hypertension. 38 (3 Pt 2), 581-587 (2001).</li>
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<li>Zieman, S. J., Melenovsky, V., Kass, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms%2C+pathophysiology%2C+and+therapy+of+arterial+stiffness%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Mechanisms, pathophysiology, and therapy of arterial stiffness.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 25 (5), 932-943 (2005).</li>
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<li>Intengan, H. D., Schiffrin, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+and+mechanical+properties+of+resistance+arteries+in+hypertension%3A+Role+of+adhesion+molecules+and+extracellular+matrix+determinants%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Structure and mechanical properties of resistance arteries in hypertension: Role of adhesion molecules and extracellular matrix determinants.</a> Hypertension. 36 (3), 312-318 (2000).</li>
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<li>Chistiakov, D. A., Orekhov, A. N., Bobryshev, Y. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+barrier+and+its+abnormalities+in+cardiovascular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Physiol%22%5BJournal%5D)">Endothelial barrier and its abnormalities in cardiovascular disease.</a> Front Physiol. 6, 365(2015).</li>
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<li>Torii, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histopathologic+characterization+of+peripheral+arteries+in+subjects+with+abundant+risk+factors%3A+Correlating+imaging+with+pathology%5BTitle%5D)+AND+%22JACC+Cardiovasc+Imaging%22%5BJournal%5D)">Histopathologic characterization of peripheral arteries in subjects with abundant risk factors: Correlating imaging with pathology.</a> JACC Cardiovasc Imaging. 12 (8 Pt 1), 1501-1513 (2019).</li>
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<li>Chatzizisis, Y. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+endothelial+shear+stress+in+the+natural+history+of+coronary+atherosclerosis+and+vascular+remodeling%3A+Molecular%2C+cellular%2C+and+vascular+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Role of endothelial shear stress in the natural history of coronary atherosclerosis and vascular remodeling: Molecular, cellular, and vascular behavior.</a> J Am Coll Cardiol. 49 (25), 2379-2393 (2007).</li>
<li>Li, S., Liu, S., Wang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+of+3D+printing+in+vascularized+organ+construction%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Bioprint%22%5BJournal%5D)">Advances of 3D printing in vascularized organ construction.</a> Int J Bioprint. 8 (3), 588(2022).</li>
<li>Rengier, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((3D+printing+based+on+imaging+data%3A+Review+of+medical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Comput+Assist+Radiol+Surg%22%5BJournal%5D)">3D printing based on imaging data: Review of medical applications.</a> Int J Comput Assist Radiol Surg. 5 (4), 335-341 (2010).</li>
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<li>Tucker, W. D., Arora, Y., Mahajan, K. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aTucker%2C+WD+%22Anatomy%2C+Blood+Vessels%22">Anatomy, Blood Vessels</a>. , Statpearls Publishing. Treasure Island, FL. (2025).</li>
<li>Choi, J., Lee, E. J., Jang, W. B., Kwon, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+biocompatible+3D-printed+artificial+blood+vessels+through+multidimensional+approaches%5BTitle%5D)+AND+%22J+Funct+Biomater%22%5BJournal%5D)">Development of biocompatible 3D-printed artificial blood vessels through multidimensional approaches.</a> J Funct Biomater. 14 (10), 497(2023).</li>
<li>De Graaf, M. N. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiplexed+fluidic+circuit+board+for+controlled+perfusion+of+3D+blood+vessels-on-a-chip%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Chip%22%5BJournal%5D)">Multiplexed fluidic circuit board for controlled perfusion of 3D blood vessels-on-a-chip.</a> Lab Chip. 23 (1), 168-181 (2022).</li>
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<li>Yu, T., Yang, Q., Peng, B., Gu, Z., Zhu, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascularized+organoid-on-a-chip%3A+Design%2C+imaging%2C+and+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Angiogenesis%22%5BJournal%5D)">Vascularized organoid-on-a-chip: Design, imaging, and analysis.</a> Angiogenesis. 27 (2), 147-172 (2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Concentration 1 % d’alcool acide</td><td>StatLab</td><td>&nbsp ; SL89-1</td><td></td></tr><tr><td>10 % NBS</td><td>Leica Biosystems</td><td>3800598</td><td></td></tr><tr><td>Caméra HDMI 4K Microscopy</td><td>Hitech Instruments, Inc.</td><td>HT-XP4K8MA</td><td></td></tr><tr><td>Diluant d’anticorps - Réduction de fond</td><td>Dako</td><td>S3022</td><td></td></tr><tr><td>Processeur tissulaire automatisé &nbsp ;</td><td>Leica Biosystems</td><td>HistoCore PEGASUS/Cat# 14048858005</td><td></td></tr><tr><td>Bond Dewax Solution</td><td>Leica Biosystems</td><td>AR9222</td><td></td></tr><tr><td>Solution de récupération d’épitope lié 1</td><td>Leica Biosystems</td><td>AR9961</td><td></td></tr><tr><td>Solution de récupération d’épitope de liaison 2</td><td>Leica Biosystems</td><td>AR9640</td><td></td></tr><tr><td>Détection du raffinage des polymères liants</td><td>Leica Biosystems</td><td>DS9800</td><td></td></tr><tr><td>Détection de rouge raffiné par polymère liant</td><td>Leica Biosystems</td><td>DS9390</td><td></td></tr><tr><td>Solution de lavage de liaison (10 fois)</td><td>Leica Biosystems</td><td>AR9590</td><td></td></tr><tr><td>Pack de canules (verre), 80 et ndash ; 100 & mu ; m</td><td>DMT</td><td>Code produit : 300407</td><td></td></tr><tr><td>CD31</td><td>Abcam</td><td>ab28364</td><td></td></tr><tr><td>Plats de dissection, grands (verre pyrex), 93 mm</td><td>Instrumentation des systèmes vivants</td><td>SKU : DD-90</td><td></td></tr><tr><td>Plats de dissection, petits</td><td>Instrumentation des systèmes vivants</td><td>SKU : DD-50</td><td></td></tr><tr><td>Dissection Microscope</td><td>Hitech Instruments, Inc.</td><td>ZEISS SteREO Discovery.V8&nbsp ;</td><td></td></tr><tr><td>Pinces Dumont #5</td><td>Outils scientifiques finement</td><td>Article n° 11295-10</td><td></td></tr><tr><td>Pinces Dumont #5SF</td><td>Outils scientifiques finement</td><td>Article n° 11252-00</td><td></td></tr><tr><td>EcoMount</td><td>BioCare Medical</td><td>EM897L</td><td></td></tr><tr><td>Éosine</td><td>IHC Monde</td><td>IW-3100B</td><td></td></tr><tr><td>Hématoxyline</td><td>BioCare Medical</td><td>Cathe-MM</td><td></td></tr><tr><td>Caméra de jamging</td><td>Olyumpus</td><td>DP28</td><td></td></tr><tr><td>Microscope d’imagerie</td><td>Olyumpus</td><td>BX51</td><td></td></tr><tr><td>Tampon de Krebs Henseleit (avec 2 mM de chlorure de calcium)</td><td>Boston BioProducts, Inc.</td><td>SKU : C-10625N-200mL</td><td></td></tr><tr><td>Tampon Krebs-Henseleit (sans calcium)</td><td>Boston BioProducts, Inc.</td><td>SKU : C-9906W-200mL</td><td></td></tr><tr><td>Médias de montage</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>4111</td><td></td></tr><tr><td>Chambre et unité à myographe</td><td>DMT</td><td>202/204CM</td><td></td></tr><tr><td>PBS (solution sésale tamponnée phosphate)</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>10010023</td><td></td></tr><tr><td>PPIB</td><td>&nbsp ; ACDBio</td><td>313908</td><td></td></tr><tr><td>Kit de réactifs RNAscope 2,5 LS-RED</td><td>ACDBio</td><td>322150</td><td></td></tr><tr><td>Stainer</td><td>Leica</td><td>Système automatisé Leica Bond RX</td><td></td></tr><tr><td>Goupilles de dissection en acier inoxydable</td><td>Instrumentation des systèmes vivants</td><td>SKU : PIN-0,1MM | BROCHE 0,2MM | NIP-#3 | PIN-VP-1</td><td></td></tr><tr><td>Paraplaste Surgipath</td><td>Leica Biosystems</td><td>39601006</td><td></td></tr><tr><td>Gel de protection tissulaire</td><td>StatLab</td><td>&nbsp ; TissueGuard/SKU : TG12</td><td></td></tr><tr><td>Ciseaux à ressort Vannas - tranchant de 2 mm</td><td>Outils scientifiques finement</td><td>Article n° 15000-03</td><td></td></tr><tr><td>Ciseaux à ressort Vannas - Tranchant de 2,5 mm</td><td>Outils scientifiques finement</td><td>Article n° 15000-08</td><td></td></tr><tr><td>Ciseaux à ressort Vannas - tranchant tranchant 3 mm</td><td>Outils scientifiques finement</td><td>Article n° 15000-00</td><td></td></tr><tr><td>&alpha ;-SMA</td><td>Abcam</td><td>ab5694</td><td></td></tr></tbody></table>

in vitro perfusion intraluminale de gel : une approche avancée pour l’analyse microscopique des artères de résistance humaine

In Vitro Intraluminal Gel Infusion: An Advanced Approach for Microscopic Analysis of Human Resistance Arteries

Des tissus omentaires humains ont été prélevés sur des patients subissant des chirurgies abdominales cliniquement indiquées. De petites artères de résistance (100 à 300 m de diamètre) ont été méticuleusement isolées des tissus adipeux et conjonctifs environnants à l’aide d’un microscope de dissection (figure 1A-C). Les artères isolées ont été nettoyées, canulées avec succès, puis montées sur les canules en verre de la chambre de myographe de culture pour la ...

In vitro Perfusion intraluminale de gel : une approche avancée pour l’analyse microscopique des artères de résistance humaine

Resistance arteries, which include small arteries and arterioles, play essential roles in regulating blood pressure and tissue perfusion. Dysfunction in ...

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JoVE Journal

Biology

Biologie

La Ex vivo Préparation isolé microvaisseaux squelettique pour les enquêtes de la réactivité vasculaire

Nous présentons une préparation pour la visualisation et la manipulation de la signalisation calcique dans indigène, intact endothélium microvasculaire. Tubes endothéliales fraîchement isolées des artères de résistance de souris fournissant le muscle squelettique de conserver la morphologie in vivo et la signalisation dynamique au sein et entre les cellules voisines. Tubes endotheliales peuvent être préparés à partir de micro-vaisseaux d'autres tissus et organes.

Isolation de microvasculaire endothéliale des artères de résistance Tubes souris

La vasoconstriction pulmonaire hypoxique (HPV) est un phénomène physiologique important par lequel à l’hypoxie alvéolaire la perfusion pulmonaire est assortie à la ventilation. Le segment vasculaire principal contribuant au VPH est l’artère intra-acinnaire. Ici, nous décrivons notre protocole pour l’analyse du VPH des vaisseaux pulmonaires murins d’un diamètre de 20 à 100 μm.

Analyse vidéomorphométrique de la vasoconstriction pulmonaire hypoxique des artères intra-pulmonaires à l’aide de tranches pulmonaires coupées de précision murine

Nous présentons un protocole pour étudier les interactions endothéliale péricytes humaines chez la souris en utilisant une variante du test d'angiogenèse bouchon de gel de matrice.

Etude in vivo de Human Interaction Endothelial-péricytes Utilisation du Gel Matrice Plug - test chez la souris

Protocoles pour l’étude de l’aorte murin embryonnaire et périnatale à l’aide en vivo clonale analyse et cartographie sort, explants aortiques et muscle lisse isolé des cellules sont détaillées ici. Ces diverses approches facilitent l’enquête de la morphogenèse de l’aorte embryonnaire et périnatale dans le développement normal et la pathogenèse de la maladie.

À l’aide de In Vivo et tissulaire et cellulaire Explant approches à l’étude de la morphogénèse et la pathogenèse de l’aorte embryonnaire et périnatale

Ce manuscrit décrit les protocoles de microscopie vidéo in vitro pour l’évaluation de la fonction vasculaire dans les artères de résistance cérébral de rat. Le manuscrit décrit également les techniques pour l’évaluation des microvaisseaux densité avec la perfusion lectine et tissu fluorescent étiquetée à l’aide de débitmétrie Doppler Laser.

Évaluation des mécanismes de contrôle vasculaire utilisant la microscopie vidéo des artères de résistance isolée de Rats

Les monocytes sont des médiateurs importants d’arteriogenesis dans le contexte de la maladie artérielle périphérique. En utilisant une matrice de type membrane basale et la microscopie intravitale, ce protocole étudie monocyte autoguidage et axés sur la tumeur de l’angiogenèse après injection de monocytes dans le modèle murin de la ligature de l’artère fémorale.

Microscopie intravitale de Monocyte Homing et axés sur la tumeur de l’angiogenèse dans un modèle murin de la maladie artérielle périphérique

Nous décrivons simultanée des essais mécaniques et 3D-imagerie de la paroi artérielle d’isolé, vivent les artères de la résistance humaine et des analyses d’image Fidji et Ilastik pour la quantification des densités de volume et d’organisation spatiales élastine et de collagène. Nous discutons de l’utilisation de ces données dans les modèles mathématiques de la mécanique de la paroi artérielle.

Évaluation de collagène et élastine Microarchitectures dépendant de la pression dans les artères de résistance vivants, humains en microscopie par Fluorescence Label-free

Présenté ici est un protocole pour étudier la microcirculation coronaire dans le tissu cardiaque murin vivant par la surveillance ex vivo de la pression artérielle de perfusion et le flux qui maintient la pression, ainsi que les composants vasculaires de l’arbre, y compris les lits capillaires et péricytes, que l’artère septale est cannulée et pressurisée.

Mesure dynamique et imagerie des capillaires, artérioles et péricytes dans le cœur de souris

La préparation intensive de « tubes » endothéliaux cérébraux intacts de souris à partir d’artérioles parenchymateuses cérébrales est illustrée pour étudier la régulation du flux sanguin cérébral. De plus, nous démontrons les forces expérimentales de ce modèle d’étude endothéliale pour l’imagerie par fluorescence et la mesure électrophysiologique des principales voies de signalisation cellulaire, y compris les changements dans le potentiel intracellulaire [Ca2+] et membranaire.

Isolement et analyse fonctionnelle de l’endothélium artériolaire du parenchyme cérébral de souris

Les images échographiques intravasculaires in vivo montrent le mouvement de la section transversale coronaire correspondant à différentes conditions de charge de pression. Sur la base d’un modèle d’éléments finis, un schéma itératif a été utilisé pour déterminer les propriétés mécaniques spécifiques au patient des artères coronaires in vivo en faisant correspondre le mouvement coronaire du modèle computationnel et des images médicales.

Approche de modélisation par éléments finis basée sur l’image de l’échographie intravasculaire pour quantifier les propriétés mécaniques in vivo de l’artère coronaire humaine 

Découvrez une méthode de perfusion intraluminale de gel pour préserver l'architecture des artères de résistance humaines. Cette technique permet l'analyse histologique et moléculaire détaillée des tissus vasculaires.

In vitro Perfusion intraluminale de gel : une approche avancée pour l’analyse microscopique des artères de résistance humaine

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