Name: Perfectionnement de OnePot PURE et production brute de ribosomes pour une synthèse acellulaire reproductible des protéines (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-08-22T13:45:00.000+00:00
Duration: 8 min 26 s
Description: Découvrez le protocole OnePOT PURE optimisé pour la synthèse acellulaire de protéines. Ce guide standardise la croissance bactérienne et la préparation des ribosomes par ultracentrifugation, améliorant la reproductibilité entre lots pour la biologie synthétique.

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<ol><li>Laohakunakorn, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bottom-up+construction+of+complex+biomolecular+systems+with+cell-free+synthetic+biology%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Bioeng+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Bottom-up construction of complex biomolecular systems with cell-free synthetic biology.</a> Front Bioeng Biotechnol. 8 (213), 1-26 (2020).</li>
<li>Silverman, A. D., Karim, A. S., Jewett, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell-free+gene+expression%3A+an+expanded+repertoire+of+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Genet%22%5BJournal%5D)">Cell-free gene expression: an expanded repertoire of applications.</a> Nat Rev Genet. 21 (3), 151-170 (2019).</li>
<li>Shimizu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell-free+translation+reconstituted+with+purified+components%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Cell-free translation reconstituted with purified components.</a> Nat Biotechnol. 19 (8), 751-755 (2001).</li>
<li>Shimizu, Y., Ueda, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pure+technology%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Pure technology.</a> Methods Mol Biol. 607, 11-21 (2010).</li>
<li>Wang, H. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiplexed+in+vivo+His-tagging+of+enzyme+pathways+for+in+vitro+single-pot+multienzyme+catalysis%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Synth+Biol%22%5BJournal%5D)">Multiplexed in vivo His-tagging of enzyme pathways for in vitro single-pot multienzyme catalysis.</a> ACS Synth Biol. 1 (2), 43-52 (2012).</li>
<li>Shepherd, T. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((De+novo+design+and+synthesis+of+a+30-cistron+translation-factor+module%5BTitle%5D)+AND+%22Nucleic+Acids+Res%22%5BJournal%5D)">De novo design and synthesis of a 30-cistron translation-factor module.</a> Nucleic Acids Res. 45 (18), 10895-10905 (2017).</li>
<li>Villarreal, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthetic+microbial+consortia+enable+rapid+assembly+of+pure+translation+machinery%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Chem+Biol%22%5BJournal%5D)">Synthetic microbial consortia enable rapid assembly of pure translation machinery.</a> Nat Chem Biol. 14 (1), 29-35 (2018).</li>
<li>Lavickova, B., Maerkl, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple%2C+robust%2C+and+low-cost+method+to+produce+the+PURE+cell-free+system%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Synth+Biol%22%5BJournal%5D)">A simple, robust, and low-cost method to produce the PURE cell-free system.</a> ACS Synth Biol. 8 (2), 455-462 (2019).</li>
<li>Grasemann, L., Lavickova, B., Elizondo, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((OnePot+PURE+cell-free+system%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">OnePot PURE cell-free system.</a> J Vis Exp. (172), e62625(2021).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimizing+protein+expression+in+the+One-Pot+PURE+system%3A+insights+into+reaction+composition+and+translation+efficiency%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Synth+Biol%22%5BJournal%5D)">Optimizing protein expression in the One-Pot PURE system: insights into reaction composition and translation efficiency.</a> ACS Synth Biol. 14 (5), 1496-1508 (2025).</li>
<li>Yadav, S., Perkins, A. J. P., Liyanagedera, S. B. W., Bougas, A., Laohakunakorn, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ATP+regeneration+from+pyruvate+in+the+PURE+system%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Synth+Biol%22%5BJournal%5D)">ATP regeneration from pyruvate in the PURE system.</a> ACS Synth Biol. 14 (1), 247-256 (2025).</li>
<li>Doerr, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modelling+cell-free+RNA+and+protein+synthesis+with+minimal+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Phys+Biol%22%5BJournal%5D)">Modelling cell-free RNA and protein synthesis with minimal systems.</a> Phys Biol. 16 (2), 025001(2019).</li>
<li>Christodoulou, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heteronuclear+NMR+investigations+of+dynamic+regions+of+intact+Escherichia+coli+ribosomes%5BTitle%5D)+AND+%22PNAS%22%5BJournal%5D)">Heteronuclear NMR investigations of dynamic regions of intact Escherichia coli ribosomes.</a> PNAS. 101 (30), 10949-10954 (2004).</li>
<li>Garenne, D., Thompson, S., Brisson, A., Khakimzhan, A., Noireaux, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+all-E+coli+TXTL+toolbox+3.0%3A+new+capabilities+of+a+cell-free+synthetic+biology+platform%5BTitle%5D)+AND+%22Synth+Biol%22%5BJournal%5D)">The all-E coli TXTL toolbox 3.0: new capabilities of a cell-free synthetic biology platform.</a> Synth Biol. 6 (1), 1-8 (2021).</li>
<li>Romantseva, E., Alperovich, N., Ross, D., Lund, S. P., Strychalski, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+DNA+template+preparation+on+variability+in+cell-free+protein+production%5BTitle%5D)+AND+%22Synth+Biol%22%5BJournal%5D)">Effects of DNA template preparation on variability in cell-free protein production.</a> Synth Biol. 7 (1), 1-17 (2022).</li>
<li>Thornton, E. L., Boyle, J. T., Laohakunakorn, N., Regan, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell-free+protein+synthesis+as+a+method+to+rapidly+screen+machine+learning-generated+protease+variants%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Synth+Biol%22%5BJournal%5D)">Cell-free protein synthesis as a method to rapidly screen machine learning-generated protease variants.</a> ACS Synth Biol. 14 (5), 1710-1718 (2025).</li>
<li>Laohakunakorn, N. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aLaohakunakorn%2C+N+%22Cell-free+3PGA+energy+solution%22">Cell-free 3PGA energy solution</a>. , Protocols.io. (2020).</li>
<li>Kalpaxis, D. L., Theocharis, D. A., Coutsogeorgopoulos, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kinetic+studies+on+ribosomal+peptidyltransferase%3A+the+behaviour+of+the+inhibitor+blasticidin+S%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Biochem%22%5BJournal%5D)">Kinetic studies on ribosomal peptidyltransferase: the behaviour of the inhibitor blasticidin S.</a> Eur J Biochem. 154 (2), 267-271 (1986).</li>
<li>Blaha, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparation+of+functional+ribosomal+complexes+and+effect+of+buffer+conditions+on+tRNA+positions+observed+by+cryoelectron+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Enzymol%22%5BJournal%5D)">Preparation of functional ribosomal complexes and effect of buffer conditions on tRNA positions observed by cryoelectron microscopy.</a> Methods Enzymol. 317, 292-309 (2000).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>2x YouTube</td><td>Sigma</td><td>Y2377-250G</td><td></td></tr><tr><td>Acides aminés</td><td>Sigma</td><td>LAA21-1KT</td><td></td></tr><tr><td>Acétate d’ammonium sans ARNase</td><td>Thermo Scientific</td><td>AM9070G</td><td></td></tr><tr><td>chlorure d’ammonium</td><td>Sigma</td><td>09718-1KG</td><td></td></tr><tr><td>Ampicilline</td><td>Sigma</td><td>A8351-5G</td><td></td></tr><tr><td>BL21(DE3) E. coli compétent</td><td>ONÉ</td><td>C2527H</td><td></td></tr><tr><td>bouteille, centrifugeuse (Nalgene)</td><td>Thermo Scientific</td><td>3120-9500</td><td>Bouteille de copolymère en polypropylène</td></tr><tr><td>bouteille, verre (Duran) 250 mL, 500 mL, 1 L, 2 L</td><td>VWR</td><td>215-1593, 215-1594, 215-1595, 215-1596</td><td></td></tr><tr><td>Analyse Bradford, Quick Start 1x Réactif de colorant</td><td>Bio-Rad</td><td>5000205</td><td></td></tr><tr><td>centrifugeuse</td><td>Thermo Scientific</td><td>Heraeus Megafuge 16R</td><td></td></tr><tr><td>centrifugeuse, micro</td><td>Eppendorf</td><td>5424R&nbsp ;</td><td></td></tr><tr><td>Colonne chromatographie</td><td>Bio-Rad</td><td>7321010</td><td></td></tr><tr><td>Phosphate de créatine</td><td>Sigma</td><td>27920</td><td></td></tr><tr><td>Cuvettes, semi-micro 1,6 mL</td><td>Fisherbrand</td><td>FB55147</td><td></td></tr><tr><td>di-sodium hydrogène orthophophosphate dihydraté</td><td>Fisher Chemical</td><td>S/4450/60</td><td></td></tr><tr><td>cassette dialyse, Slide-A-Lyzer G3, MWCO 2 kDa, 15 mL</td><td>Thermo Scientific</td><td>A52962</td><td></td></tr><tr><td>Orthophosphate d’hydrogène dipotassique anhydre</td><td>Fisher Chemical</td><td>P/5240/60</td><td></td></tr><tr><td>TNT sans pesée</td><td>Thermo Scientific</td><td>A39255</td><td></td></tr><tr><td>Unité de filtre, MWCO centrifuge de 3kDa Amicon Ultra 15</td><td>EMD Millipore</td><td>UFC900324</td><td></td></tr><tr><td>flasque, 500 mL</td><td>VWR</td><td>214-1133</td><td></td></tr><tr><td>flasque, déflecteur 2,5 L&nbsp ;</td><td>Tunair</td><td>SS-5013</td><td></td></tr><tr><td>Acide folinique</td><td>Sigma</td><td>F7878-100MG</td><td></td></tr><tr><td>glycérol</td><td>Sigma</td><td>G5516-1L</td><td></td></tr><tr><td>Hcl</td><td>Fisherbrand</td><td>H/1200/PB17</td><td></td></tr><tr><td>Tampon HEPES, solution 1 M pH 7,3</td><td>Thermo Scientific</td><td>BP299</td><td></td></tr><tr><td>Imidazole</td><td>Sigma</td><td>I2399-500G</td><td></td></tr><tr><td>incubateur</td><td>Eppendorf</td><td>New Brunswick Innova & reg ; 42</td><td></td></tr><tr><td>IPTG</td><td>Thermo Scientific</td><td>R0392</td><td></td></tr><tr><td>Pellets KOH</td><td>Thermo Scientific</td><td>P1767-500G</td><td></td></tr><tr><td>L-Glutamique hémimagnésium sel tétrahydrate</td><td>Sigma</td><td>49605-250G</td><td></td></tr><tr><td>Acide L-glutamique monopotassium sel monohydrate</td><td>Sigma</td><td>49601-500G</td><td></td></tr><tr><td>Tétrahydrate d’acétate de magnésium</td><td>Sigma</td><td>M5661-50G</td><td></td></tr><tr><td>chlorure de magnésium</td><td>Fluka</td><td>63020-1L</td><td></td></tr><tr><td>Installation de brassage magnétique</td><td>Stuart</td><td>US152</td><td></td></tr><tr><td>Nanodrop</td><td>Thermo Scientific</td><td>Nanodrop 2000</td><td></td></tr><tr><td>NEBExpress Ni-NTA Perles de chargeur</td><td>ONÉ</td><td>S1423S</td><td></td></tr><tr><td>Parafilm</td><td>Sigma</td><td>P7543-1EA</td><td></td></tr><tr><td>pipette, Eppendorf Research Plus multicanal 30-300 & micro ; L</td><td>Eppendorf</td><td>3125000052</td><td></td></tr><tr><td>Joint adhésif de plaque pour lecteur de plaque</td><td>ExcelScientific</td><td>STR-SEAL-PLT (Stérile)</td><td></td></tr><tr><td>Joint respirant à plaque</td><td>Starlab</td><td>E2796-3005</td><td></td></tr><tr><td>Joint en feuille d’aluminium</td><td>ExcelScientific</td><td>FCS-25</td><td></td></tr><tr><td>Lecteur de plaques</td><td>BioTek</td><td>Synergie H1</td><td></td></tr><tr><td>Vibrateur de plaques</td><td>Allsheng</td><td>MBI100-4A</td><td></td></tr><tr><td>Plate, puits 384</td><td>Thermo Scientific</td><td>242764</td><td></td></tr><tr><td>plaque, puits profond 96 1 mL</td><td>Thermo Scientific</td><td>736-0601</td><td></td></tr><tr><td>plaque, puits profond 96 2 mL</td><td>Sarstedt</td><td>82.1972.002</td><td></td></tr><tr><td>PCR à plaque, 96 puits</td><td>Sarstedt</td><td>721,978</td><td></td></tr><tr><td>Plaque, puits optique 96</td><td>Thermo Scientific</td><td>10057581</td><td></td></tr><tr><td>chlorure de potassium</td><td>Sigma</td><td>P5405-500G</td><td></td></tr><tr><td>Orthophosphate de dihydrogène potassique</td><td>Fisher Chemical</td><td>P/4800/53</td><td></td></tr><tr><td>Réactif d’extraction de protéines (BugBuster)</td><td>EMD Millipore</td><td>70584-3</td><td></td></tr><tr><td>Résine de purification des protéines (cOmplete)</td><td>Roche</td><td>5893682001</td><td></td></tr><tr><td>Shaker à rôti</td><td>Starlab</td><td>RM-Multi 1</td><td></td></tr><tr><td>chlorure de sodium</td><td>Fisher Chemical</td><td>S/3105/70</td><td></td></tr><tr><td>sonde de sonication, FisherBrand 15-50 mL</td><td>Thermo Scientific</td><td>12931181</td><td></td></tr><tr><td>Sonicator</td><td>Fisher Scientific</td><td>FB120</td><td></td></tr><tr><td>spectrophotomètre</td><td>Jenway</td><td>Genova Plus</td><td></td></tr><tr><td>Spermidine</td><td>Sigma</td><td>S2626-1G</td><td></td></tr><tr><td>TCEP 0,5 M</td><td>Supelco</td><td>646547</td><td></td></tr><tr><td>Thermo Fisher NTP, Tris tamponné</td><td>Thermo Scientific</td><td>R1481</td><td></td></tr><tr><td>ARNt provenant d’E. coli MRE600</td><td>Roche</td><td>10109541001</td><td></td></tr><tr><td>Tryptone</td><td>Formedium</td><td>TRP02</td><td></td></tr><tr><td>tube, 0,2 mL de qualité PCR</td><td>Sarstedt</td><td>72,737,002</td><td></td></tr><tr><td>tube, bijoux Sterilin 7 mL polystyrène</td><td>Thermo Scientific</td><td>129A</td><td></td></tr><tr><td>tube, conique (Falcon) 15 mL</td><td>Sarstedt</td><td>62.554.502</td><td></td></tr><tr><td>tube, conique (Falcon) 50 mL</td><td>Sarstedt</td><td>62.547.254</td><td></td></tr><tr><td>tube, microcentrifugeuse (Eppendorf) 1,5 mL</td><td>Sarstedt</td><td>72.690.001</td><td></td></tr><tr><td>tube, microcentrifuge (Eppendorf) 2 mL</td><td>Sarstedt</td><td>72.695.700</td><td></td></tr><tr><td>tube, centrifugation S100 & nbsp ;</td><td>Beckman-Coulter</td><td>355619</td><td></td></tr><tr><td>tube, centrifugation S30 & nbsp ;</td><td>Thermo Scientific</td><td>3118-0050</td><td></td></tr><tr><td>Ultracentrifuge</td><td>Beckman-Coulter</td><td>Optima XPN-100</td><td></td></tr><tr><td>Rotor d’ultracentrifuge</td><td>Beckman-Coulter</td><td>Rotor à angle fixe 70Ti</td><td></td></tr><tr><td>Eau distillée ultrapure sans DNase/RNase</td><td>Thermo Scientific</td><td>10977049</td><td></td></tr><tr><td>Vortexer</td><td>VWR</td><td>444-2791</td><td></td></tr><tr><td>extrait de levure</td><td>Oxoïde</td><td>LP0021T</td><td></td></tr></tbody></table>

perfectionnement de onepot pure et production brute de ribosomes pour une synthèse acellulaire reproductible des protéines

Refinement of OnePot PURE and Crude Ribosome Production for Reproducible Cell-free Protein Synthesis

Perfectionnement de OnePot PURE et production brute de ribosomes pour une synthèse acellulaire reproductible des protéines

Recent advances have enabled the Protein synthesis Using Recombinant Elements (PURE) cell-free system to be produced in individual laboratories ...

Nous avons affiné le système OnePOT PURE et la préparation à ribosomes bruts afin d’améliorer la reproductibilité et l’accessibilité, permettant à davantage de laboratoires de construire et de dépanner des systèmes robustes sans cellules pour la recherche en biologie synthétique. Les défis expérimentaux incluent la variabilité d’un lot à l’autre, l’instabilité du vecteur d’expression et les souches à croissance lente, qui entravent autant la reproductibilité et la constance des performances dans la préparation des systèmes PURE internes. Nous avons établi que le contrôle attentif de la croissance, de l’inoculation et de la concentration de glycérol améliore significativement la reproductibilité et les rendements dans les préparations OnePOT PURE et ribosomes chez les utilisateurs et les réplicés biologiques.Nous abordons l’absence d’un protocole reproductible et accessible pour préparer PURE et ribosomes en interne, aidant les laboratoires à surmonter les obstacles techniques pour adopter l’autorésistance dans la recherche en biologie synthétique. Notre protocole améliore la reproductibilité et la flexibilité en standardisant les conditions de croissance et l’utilisation du glycéro

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La contamination des préparations de ribosomes eucaryotes purifié par les méthodes traditionnelles par les co-purifiant nucléases et protéases une incidence négative sur l'aval des analyses biochimiques et structurelles. Une méthode de purification chromatographique rapide et simple est utilisée pour résoudre ce problème en utilisant des ribosomes levure comme système modèle.

Purification chromatographique des ribosomes de levure hautement active

Ce protocole détaille les étapes, les coûts et équipements nécessaires pour générer des e. coli-extraits cellulaires de base et mettre en œuvre en vitro réactions de synthèse de protéines dans les 4 jours ou moins. Pour tirer parti de la souplesse de cette plate-forme pour les applications larges, nous discutons des conditions de réaction qui peuvent être adaptées et optimisées.

Escherichia coli-base de la synthèse protéique acellulaire : protocoles pour une technologie de plate-forme robuste, flexible et accessible

Ce protocole décrit la méthode, les matériaux, l’équipement et les étapes pour la préparation ascendante de l’ARN et des protéines produisant des cellules synthétiques. Le compartiment aqueux intérieur des cellules synthétiques contenait le lysate bactérien S30 encapsulé dans un bilayer lipidique (c.-à-d. liposomes stables), à l’aide d’une méthode de transfert d’émulsion d’émulsion de l’eau dans l’huile.

Préparation des cellules synthétiques produisant des protéines à l’aide d’extraits bactériens exempts de cellules, de liposomes et de transfert d’émulsion

Nous présentons une méthode rapide et rentable pour produire le système TX-TL recombinant PURE sans cellule à l’aide d’équipements de laboratoire standard.

Système onePot PURE sans cellule

L’étude décrit un protocole pour créer de grandes quantités (μg-mg) d’ADN pour des campagnes de dépistage de protéines à partir de fragments de gènes synthétiques sans clonage ni utilisation de cellules vivantes. Le gabarit minimal est digéré et circularisé de manière enzymatique, puis amplifié à l’aide d’une amplification de cercle roulant isotherme. Des réactions d’expression sans cellules pourraient être effectuées avec le produit non purifié.

Méthodes enzymatiques rapides pour l’amplification de modèles linéaires minimaux pour le prototypage de protéines à l’aide de systèmes sans cellules

Ce travail décrit la préparation de l’extrait cellulaire d’Escherichia coli (E. coli) suivie de réactions de synthèse de protéines sans cellules (CFPS) en moins de 24 heures. L’explication du protocole d’auto-induction sans cellule (CFAI) détaille les améliorations apportées pour réduire la surveillance des chercheurs et augmenter les quantités d’extrait cellulaire obtenues.

Des cellules à la synthèse de protéines sans cellules en 24 heures à l’aide d’un flux de travail d’auto-induction sans cellules

Ce protocole décrit le système de synthèse des protéines libres (CFPS) utilisé dans la construction des cellules synthétiques. Il décrit les étapes clés avec des résultats représentatifs dans différents micro-compartiments. Le protocole vise à établir les meilleures pratiques pour divers laboratoires de la communauté des cellules synthétiques, faisant ainsi progresser le développement des cellules synthétiques.

SYSTÈME DE SYNTHÈSE DE PROTÉINES ACELLULAIRES POUR LA CONSTRUCTION DE CELLULES SYNTHÉTIQUES

Colloïdes d'or stabilisées Alkanethiolate connus comme des grappes monocouche protégée (PPM) sont synthétisés, caractérisés, et assemblés en couches minces comme une interface d'adsorption pour l'électrochimie monocouche de protéines de protéines redox simples...

Synthèse, l&#39;Assemblée, et caractérisation des nanoparticules Monocouche protégées Films d&#39;or pour Electrochimie monocouche de protéines

Nous présentons la synthèse d'un hydrogel split-induite par une intéine de protéines. Les éléments constitutifs de cet hydrogel sont deux copolymères de protéines contenant chacun une sous-unité d'une protéine trimérique qui sert d'agent de réticulation et une moitié d'une intéine dissociée. Le mélange des deux copolymères de protéine déclenche une réaction de trans-épissage d'intéine, ce qui donne une unité de polypeptide qui s'auto-assemble en un hydrogel. Cet hydrogel est très stable au pH...

Synthèse d&#39;une protéine artificielle induite par une intéine Hydrogel

Ici, nous décrivons des méthodes simples pour la préparation de vésicules, l'encapsulation de la transcription et de la machinerie de traduction, et le suivi de la production de protéines. Les systèmes sans cellules résultantes peuvent être utilisées comme point de départ pour construire imite cellulaires de plus en plus complexes.

L&#39;encapsulation de transcription cellulaire et sans traduction machines dans des vésicules pour la construction de Mimics cellulaires

Découvrez le protocole OnePOT PURE optimisé pour la synthèse acellulaire de protéines. Ce guide standardise la croissance bactérienne et la préparation des ribosomes par ultracentrifugation, améliorant la reproductibilité entre lots pour la biologie synthétique.

Perfectionnement de OnePot PURE et production brute de ribosomes pour une synthèse acellulaire reproductible des protéines

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