Name: Établissement et maintenance d’organoïdes du cancer de la prostate dérivés de patients : un protocole expérimental détaillé (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-11-14T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 4 s
Description: Apprenez à établir et maintenir des organoïdes dérivés de patients pour le cancer de la prostate. Ce protocole standardisé préserve les caractéristiques tumorales et améliore le criblage de médicaments pour la médecine personnalisée.

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<ol><li>James, N. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+lancet+commission+on+prostate+cancer%3A+planning+for+the+surge+in+cases%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">The lancet commission on prostate cancer: planning for the surge in cases.</a> Lancet. 403 (10437), 1683-1722 (2024).</li>
<li>Knutson, T. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AR+alterations+inform+circulating+tumor+DNA+detection+in+metastatic+castration+resistant+prostate+cancer+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">AR alterations inform circulating tumor DNA detection in metastatic castration resistant prostate cancer patients.</a> Nat Commun. 15 (1), 10648(2024).</li>
<li>Haffner, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Framework+for+the+pathology+workup+of+metastatic+castration-resistant+prostate+cancer+biopsies%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Framework for the pathology workup of metastatic castration-resistant prostate cancer biopsies.</a> Clin Cancer Res. 31 (3), 466-478 (2025).</li>
<li>Fang, Z., Li, P., Du, F., Shang, L., Li, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+organoids+in+cancer+research%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Hematol+Oncol%22%5BJournal%5D)">The role of organoids in cancer research.</a> Exp Hematol Oncol. 12 (1), 69(2023).</li>
<li>Sachs, N., Clevers, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoid+cultures+for+the+analysis+of+cancer+phenotypes%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Genet+Dev%22%5BJournal%5D)">Organoid cultures for the analysis of cancer phenotypes.</a> Curr Opin Genet Dev. 24, 68-73 (2014).</li>
<li>Zhou, L., Zhang, C., Zhang, Y., Shi, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+organoid+models+in+prostate+cancer+research%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Oncol%22%5BJournal%5D)">Application of organoid models in prostate cancer research.</a> Front Oncol. 11, 736431(2021).</li>
<li>Gao, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoid+cultures+derived+from+patients+with+advanced+prostate+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Organoid cultures derived from patients with advanced prostate cancer.</a> Cell. 159 (1), 176-187 (2014).</li>
<li>Drost, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoid+culture+systems+for+prostate+epithelial+and+cancer+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Organoid culture systems for prostate epithelial and cancer tissue.</a> Nat Protoc. 11 (2), 347-358 (2016).</li>
<li>Puca, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+organoids+to+model+rare+prostate+cancer+phenotypes%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Patient-derived organoids to model rare prostate cancer phenotypes.</a> Nat Commun. 9 (1), 2404(2018).</li>
<li>Pamarthy, S., Sabaawy, H. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+organoids+in+prostate+cancer%3A+improving+therapeutic+efficacy+in+precision+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cancer%22%5BJournal%5D)">Patient-derived organoids in prostate cancer: improving therapeutic efficacy in precision medicine.</a> Mol Cancer. 20 (1), 125(2021).</li>
<li>Karkampouna, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+xenografts+and+organoids+model+therapy+response+in+prostate+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Patient-derived xenografts and organoids model therapy response in prostate cancer.</a> Nat Commun. 12 (1), 1117(2021).</li>
<li>Driehuis, E., Kretzschmar, K., Clevers, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+patient-derived+cancer+organoids+for+drug-screening+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Establishment of patient-derived cancer organoids for drug-screening applications.</a> Nat Protoc. 15 (10), 3380-3409 (2020).</li>
<li>Neal, J. T., Kuo, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoids+as+models+for+neoplastic+transformation%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Pathol%22%5BJournal%5D)">Organoids as models for neoplastic transformation.</a> Annu Rev Pathol. 11, 199-220 (2016).</li>
<li>Waseem, M., Wang, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoids%3A+an+emerging+precision+medicine+model+for+prostate+cancer+research%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Organoids: an emerging precision medicine model for prostate cancer research.</a> Int J Mol Sci. 25 (2), (2024).</li>
<li>Moschovas, M. C., Patel, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurovascular+bundle+preservation+in+robotic-assisted+radical+prostatectomy%3A+how+I+do+it+after+15%2C000+cases%5BTitle%5D)+AND+%22Int+Braz+J+Urol%22%5BJournal%5D)">Neurovascular bundle preservation in robotic-assisted radical prostatectomy: how I do it after 15,000 cases.</a> Int Braz J Urol. 48 (2), 212-219 (2022).</li>
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<li>Xiang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Building+consensus+on+the+application+of+organoid-based+drug+sensitivity+testing+in+cancer+precision+medicine+and+drug+development%5BTitle%5D)+AND+%22Theranostics%22%5BJournal%5D)">Building consensus on the application of organoid-based drug sensitivity testing in cancer precision medicine and drug development.</a> Theranostics. 14 (8), 3300-3316 (2024).</li>
<li>Van Hemelryk, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+xenografts+and+organoids+recapitulate+castration-resistant+prostate+cancer+with+sustained+androgen+receptor+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Patient-derived xenografts and organoids recapitulate castration-resistant prostate cancer with sustained androgen receptor signaling.</a> Cells. 11 (22), 3632(2022).</li>
<li>Zhao, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+bladder+cancer+organoids+as+a+valuable+tool+for+understanding+tumor+biology+and+developing+personalized+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Sci+%28Weinh%29%22%5BJournal%5D)">Patient-derived bladder cancer organoids as a valuable tool for understanding tumor biology and developing personalized treatment.</a> Adv Sci (Weinh). 12 (13), e2414558(2025).</li>
<li>Polak, R., Zhang, E. T., Kuo, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+organoids+2.0%3A+modelling+the+complexity+of+the+tumour+immune+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cancer%22%5BJournal%5D)">Cancer organoids 2.0: modelling the complexity of the tumour immune microenvironment.</a> Nat Rev Cancer. 24 (8), 523-539 (2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>A 83-01</td><td>TOCRIS</td><td>2939</td><td></td></tr><tr><td>adMEM/F12</td><td>Gibco</td><td>12634010</td><td></td></tr><tr><td>Armoire de biosécurité</td><td>Jinan Xinbeixi Biotechnology Co., Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Solution de récupération cellulaire</td><td>Corning</td><td>354253</td><td></td></tr><tr><td>centrifugeuse</td><td>Shenzhen Ruiwode Life Technology Co., Ltd</td><td>M1416R</td><td></td></tr><tr><td>Tubes centrifugeuses</td><td>Nankin iResearch Biotechnology Co., Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cultrex CheminClear BM</td><td>R& D</td><td>3533-010-02</td><td></td></tr><tr><td>Cultrex facteur de croissance réduit BME, Type 2</td><td>R& D</td><td>3533-005-02</td><td></td></tr><tr><td>Contenants de culture (plaques à faible adhérence à 24 puits)</td><td>Thermo</td><td>Nunc-174930-ZX</td><td></td></tr><tr><td>DHT</td><td>ISOREAG</td><td>521-18-6</td><td></td></tr><tr><td>Balance électronique</td><td>Nankin iResearch Biotechnology Co., Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sérum fœtal bovin</td><td>Gibco</td><td>10099141</td><td></td></tr><tr><td>GlutaminePlus-200mM</td><td>R& D</td><td>B90210</td><td></td></tr><tr><td>HEPES</td><td>R& D</td><td>1254/10</td><td></td></tr><tr><td>Incubateur de cultures cellulaires humidifiées (37&deg ; C, 5 % de CO2)</td><td>Shanghai Hetian Scientific Instrument Co., Ltd</td><td>HY-160SY</td><td></td></tr><tr><td>Glacière</td><td>Nankin iResearch Biotechnology Co., Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>plats culturels de taille moyenne</td><td>Absin</td><td>abs7005</td><td></td></tr><tr><td>Supplément média N21-MAX (50X)</td><td>R& D</td><td>AR008</td><td></td></tr><tr><td>N-acétylcystéine</td><td>Sigma</td><td>A9165-5G</td><td></td></tr><tr><td>Nicotinamide</td><td>R& D</td><td>3533-010-02</td><td></td></tr><tr><td>Normocine</td><td>Invivogen</td><td>ANT-NR-2</td><td></td></tr><tr><td>Dispositif de pipetage à aide de pipet</td><td>Instrument scientifique Hotspot de Nankin Co., Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pipettes</td><td>Instrument scientifique Hotspot de Nankin Co., Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Primocin</td><td>Invivogen</td><td>ANT-PM-2</td><td></td></tr><tr><td>rhEGF</td><td>R& D</td><td>236-EG-01M</td><td></td></tr><tr><td>rhFGF</td><td>R& D</td><td>233-FB-025</td><td></td></tr><tr><td>rhFGF-10</td><td>R& D</td><td>345-FG-025</td><td></td></tr><tr><td>rhNoggin</td><td>R& D</td><td>6057-NG-100</td><td></td></tr><tr><td>rhR-Spondin 1</td><td>R& D</td><td>4656-RS-100</td><td></td></tr><tr><td>SB 202190</td><td>TOCRIS</td><td>1264</td><td></td></tr><tr><td>Appareil de préparation de la suspension à cellule unique</td><td>Propulsion</td><td>DSC-400</td><td></td></tr><tr><td>Ciseaux tissulaires/scalpel</td><td>Nankin iResearch Biotechnology Co., Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>TryplE Express</td><td>Gibco</td><td>126A04013</td><td></td></tr><tr><td>Kit de dissociation tumorale, humain</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-095-929</td><td></td></tr><tr><td>Pince à épiler</td><td>Nankin iResearch Biotechnology Co., Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Bain d’eau</td><td>Changzhou Zhongjie Fabrication d’Instruments Expérimentaux Co., Ltd</td><td>HH-600</td><td></td></tr><tr><td>Y-27632 dihydrochlorure</td><td>R& D</td><td>1254/10</td><td></td></tr></tbody></table>

Établissement et maintenance d’organoïdes du cancer de la prostate dérivés de patients : un protocole expérimental détaillé

Establishment and Maintenance of Patient-derived Prostate Cancer Organoids: A Detailed Experimental Protocol

Prostate cancer (PCa) is a highly heterogeneous malignancy and a leading cause of cancer-related mortality in men, with significant clinical challenges in ...

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Les organoïdes dérivés de tumeurs sont un type de modèle de culture cellulaire 3D qui peut maintenir les caractéristiques pathologiques et la lignée cellulaire spécifique à l’organe des tumeurs. Dans l’exemple de protocole, nous verrons des scientifiques générer des organoïdes à partir d’une tumeur de la prostate à partir d’un modèle de souris génétiquement modifié.

Préparation d’organoïdes à partir de tumeurs : un modèle tumoral 3D in vitro

Nous présentons ici un protocole visant à guider la manipulation humaine primaire organoïde la prostate puis indiquent les points de terminaison pour évaluer le phénotype. Semis, entretien de la culture, recouvrement de gel de matrice, quantification morphologique, enrobage et sectionnement, FFIP sectionnement, entier-montez coloration et application d’essais commerciaux sont décrites.

Manutention et évaluation de la Culture humaine Organoïde la Prostate primaire

Nous montrons une méthode pour l'autopsie et la dissection des modèles de cancer de la prostate de souris, se concentrant sur la dissection de tumeur de prostate. Un protocole étape par étape pour la génération des organoïdes de tumeur de prostate de souris est également présenté.

Génération d'organoïdes tumoraux à partir de modèles de souris génétiquement modifiés du cancer de la prostate

Présenté ici est un protocole pour étudier des réponses pharmacologiques dans les organoïdes épithélial de prostate. Les organoïdes ressemblent beaucoup à la biologie in vivo et récapitulent la génétique des patients, ce qui en fait des systèmes modèles attrayants. Les organoïdes de prostate peuvent être établis à partir des prostates sauvages de type, des modèles génétiquement modifiés de souris, du tissu humain bénin, et du cancer de la prostate avancé.

Les cultures organoïdes de la prostate comme outils pour traduire les génotypes et les profils mutationnels en réponses pharmacologiques

Les cultures tridimensionnelles des spécimens patients de BMPC et des xénogreffes du cancer de la prostate métastatique d'os maintiennent l'hétérogénéité fonctionnelle de leurs tumeurs originales ayant pour résultat des kystes, des sphéroïdes et des organoïdes complexes de tumeur-comme. Ce manuscrit fournit une stratégie d'optimisation et un protocole pour la culture 3D d'échantillons dérivés de patients hétérogènes et leur analyse à l'aide de l'IFC.

Établissement et analyse des organoïdes tridimensionnels (3D) dérivés des spécimens de métastasie osseuse du cancer de la prostate du patient et de leurs Xénogreffes

Un protocole détaillé est fourni ici pour établir des organoïdes mammaires humains à partir de résections de tumeurs mammaires dérivées de patientes ou de tissu mammaire normal. Le protocole fournit des instructions complètes étape par étape pour la culture, la congélation et la décongélation d’organoïdes mammaires humains dérivés de patientes.

Établissement et culture d’organoïdes mammaires dérivés de patientes

Les organoïdes tumoraux ont révolutionné la recherche sur le cancer et l’approche de la médecine personnalisée. Ils représentent un modèle de tumeur cliniquement pertinent qui permet aux chercheurs de garder une longueur d’avance sur la tumeur en clinique. Ce protocole établit des organoïdes tumoraux à partir d’échantillons frais de tissus tumoraux pancréatiques et de xénogreffes dérivées de patients d’origine adénocarcinome pancréatique.

Mise en place d’organoïdes tumoraux et de fibroblastes dérivés du cancer du pancréas à partir de tissus frais

Ce protocole décrit la génération d’un modèle murin à base d’organoïdes prostatiques cultivé en 2D. Elle comprend la dissociation organoïde, l’ensemencement cellulaire, la différenciation, l’évaluation de l’intégrité épithéliale et l’infection in vitro par Escherichia coli uropathogène. Le modèle offre une accessibilité apicale et convient à l’étude des interactions hôte-pathogène, surmontant ainsi les limites des systèmes organoïdes 3D traditionnels.

Génération d’un modèle à base d’organoïdes prostatiques de souris pour étudier les interactions hôte-pathogène

Utilisant des tumeurs provenant de patients dans un modèle préclinique sous-cutanée est une excellente façon d'étudier l'efficacité de nouvelles thérapies, la découverte de biomarqueurs prédictifs et les voies résistantes aux médicaments. Ce modèle, dans le processus de développement de médicaments, est essentielle pour déterminer le sort de nombreuses thérapies anticancéreuses avant investigation clinique.

Développement et maintenance d&#39;une tumeur du patient Préclinique dérivé modèle de xénogreffe de l&#39;enquête de Novel Anti-Cancer Therapies

Le protocole suivant est axé sur la mise en place d’une culture primaire de sarcome des tissus mous dérivé de patient (STS). Ce modèle pourrait nous aider à mieux comprendre la base moléculaire et le profil pharmacologique de ces tumeurs malignes rares et pourrait constituer un point de départ pour poursuivre les recherches visant à améliorer la gestion de STS.

Mise en place d’une Culture primaire de sarcome des tissus mous dérivé de Patient

Apprenez à établir et maintenir des organoïdes dérivés de patients pour le cancer de la prostate. Ce protocole standardisé préserve les caractéristiques tumorales et améliore le criblage de médicaments pour la médecine personnalisée.

Établissement et maintenance d’organoïdes du cancer de la prostate dérivés de patients : un protocole expérimental détaillé

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