Name: Modélisation de l’hypoxie/lésion par réoxygénation dans les cellules épithéliales tubulaires proximales (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-11-21T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 23 s
Description: Découvrez un modèle in vitro de lésion d'ischémie-réperfusion rénale dans les cellules épithéliales tubulaires proximales. Cette méthode permet d'évaluer les marqueurs de lésion rénale et la fonction mitochondriale.

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<table><tbody><tr><td>Plaque qPCR à 384 puits</td><td>Biosystèmes appliqués</td><td>4309849</td><td></td></tr><tr><td>Centrifugeuse</td><td>Ortoalresa</td><td>Biocen22R</td><td></td></tr><tr><td>Chloroforme</td><td>VWR</td><td>0757-500ML</td><td></td></tr><tr><td>DMEM/F12</td><td>Gibco</td><td>21331020</td><td></td></tr><tr><td>Facteur de croissance épidermique</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>E9644</td><td></td></tr><tr><td>Éthanol</td><td>PanReac AppliChem</td><td>141086.1214</td><td></td></tr><tr><td>FCS</td><td>Biowest</td><td>S181B-500</td><td></td></tr><tr><td>Bloc chauffant</td><td>Eppendorf</td><td>ThermoMixer C</td><td></td></tr><tr><td>Hydrocortisone</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H0135</td><td></td></tr><tr><td>Incubateur d’hypoxie</td><td>Memmert</td><td>ICO 50med</td><td></td></tr><tr><td>IFN-& gamma ;</td><td>ProspecBIo</td><td>CYT-358</td><td></td></tr><tr><td>Incubateur</td><td>Memmert</td><td>ICO 105</td><td></td></tr><tr><td>Isopropanol</td><td>VWR</td><td>0918-1L</td><td></td></tr><tr><td>ITSe</td><td>Gibco</td><td>41400045</td><td></td></tr><tr><td>L-glutamine</td><td>Gibco</td><td>25030081</td><td></td></tr><tr><td>Pipette multicanal</td><td>Eppendorf</td><td>3125000052</td><td></td></tr><tr><td>Incubateur non<sous>sous2</sous></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Amorces PCR</td><td>Eurofins Génomique</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pénicilline - Streptomycine</td><td>Gibco</td><td>15140-122</td><td></td></tr><tr><td>Mix maître qPCR</td><td>NZYTech</td><td>MB22303</td><td></td></tr><tr><td>Système qPCR en temps réel</td><td>Biosystèmes appliqués</td><td>QuantStudio 5</td><td></td></tr><tr><td>Mix maître à transcription inversée</td><td>NZYTech</td><td>MB12502</td><td>Contient un mélange enzymatique</td></tr><tr><td>Eau sans ARNase</td><td>HyClone</td><td>SH3053802</td><td></td></tr><tr><td>Kit de test de stress Mito pour cellule XF Seahorse</td><td>Agilent</td><td>103015-100</td><td>Contient de l’oligomycine, du FCCP, de l’antimycine A et de la roténone</td></tr><tr><td>Seahorse XF DMEM medium</td><td>Agilent</td><td>103575-100</td><td></td></tr><tr><td>Hippocampe XF Glucose</td><td>Agilent</td><td>03577-100</td><td></td></tr><tr><td>Glutamine XF Hippocampe</td><td>Agilent</td><td>103579-100</td><td></td></tr><tr><td>Seahorse XF Pyruvate</td><td>Agilent</td><td>103578-100</td><td></td></tr><tr><td>Analyseur Seahorse XFe96</td><td>Agilent</td><td>S7800BR</td><td></td></tr><tr><td>Seahorse XFe96 FluxPak</td><td>Agilent</td><td>103792-100</td><td>Contient une microplaque de culture cellulaire XFe96 et une cartouche de capteur XFe96</td></tr><tr><td>Cycleur thermique</td><td>BIO-RAD</td><td>Cycleur thermique T100</td><td></td></tr><tr><td>Triiodothyronine</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T5516</td><td></td></tr><tr><td>Trizol</td><td>Invitrogen</td><td>15596026</td><td></td></tr><tr><td>Spectrophotomètre UV-Vis</td><td>DeNovix</td><td>DS-11</td><td></td></tr></tbody></table>

modélisation de l’hypoxie/lésion par réoxygénation dans les cellules épithéliales tubulaires proximales

Modeling Hypoxia/Reoxygenation Injury in Proximal Tubular Epithelial Cells

Modélisation de l’hypoxie/lésion par réoxygénation dans les cellules épithéliales tubulaires proximales

Kidney transplantation accounts for approximately 60%-65% of all transplanted solid organs. Most donor kidneys are obtained from deceased individuals, ...

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Biology

Biologie

Les effets de l'activation de la protéine kinase C (PKC) isozymes de la fonction mitochondriale associés à la respiration et la phosphorylation oxydative et sur la viabilité cellulaire sont décrites. L'approche technique s'adapte adénoviral de façon sélective surexprimer isoenzymes de PKC dans une culture cellulaire primaire et une variété de tests pour déterminer les fonctions mitochondriales et l'état énergétique de la cellule.

Évaluation des fonctions mitochondriales et la viabilité cellulaire dans les cellules rénales surexprimant la protéine kinase C Isozymes

Source : Alluri, H., et.al. Privation et réoxygénation d’oxygène-glucose en tant que modèle de lésion d’ischémie-reperfusion in vitro pour l’étude du dysfonctionnement de la barrière hémato-encéphalique. J. Vis. Exp. (2015).La vidéo démontre l’impact de la privation d’oxygène-glucose et de la réoxygénation ultérieure sur les cellules endothéliales microvasculaires du cerveau du rat (RBMEC) en simulant des conditions hypoxiques et privées de nutriments. Ces conditions entraînent une...

Impact de la privation et de la réoxygénation d’oxygène-glucose sur les interactions cellule-cellule

Les lésions d’ischémie-reperfusion (IR) sont associées à un taux élevé de morbidité et de mortalité. L’objectif du modèle in vitro de privation et de réoxygénation d’oxygène-glucose (OGD-R) décrit ici est d’évaluer les effets des lésions d’ischémie et de reperfusion sur diverses cellules, en particulier dans les cellules endothéliales de la barrière hémato-encéphalique (BHE).

Oxygène-glucose privation et réoxygénation comme un<em&gt; In Vitro</em&gt; Ischémie-reperfusion modèle pour étudier la dysfonction barrière hémato-encéphalique

Ce protocole prévoit une approche rentable pour isoler et caractériser les souris primaire les cellules tubulaires rénales qui peuvent ensuite être Sub cultivées afin d’évaluer les fonctions biologiques rénales ex vivo, y compris bioénergétique mitochondriale.

Analyse de Flux extracellulaire isolement, caractérisation et un débit élevé de souris primaire tubulaire les cellules épithéliales rénales

Ce protocole décrit un modèle apico-out d’entérocolite nécrosante (ECN) dans une boîte utilisant des entéroïdes intestinaux grêles à polarité inversée, permettant l’accès à la surface apicale. Nous fournissons un protocole de coloration immunofluorescente pour détecter la perturbation épithéliale liée à l’ECN et une méthode pour déterminer la viabilité des entéroïdes à sortie apicale soumis au protocole NEC-in-a-dish.

In vitro Modèle entéroïde apical-out de l’entérocolite nécrosante

Ici, nous décrivons les protocoles permettant d’obtenir des cultures primaires de cellules épithéliales tubulaires rénales humaines (HRTEC) à partir du cortex rénal pour développer des monocouches et des cultures tridimensionnelles sur une matrice extracellulaire (3D-HRTEC).

Développement de cultures primaires de cellules épithéliales tubulaires rénales humaines dans des monocouches et des conditions tridimensionnelles

Nous présentons un protocole optimisé pour le traitement de reins humains entiers afin d’isoler et de cultiver des cellules épithéliales primaires du tubule proximal rénal et l’application de ces cellules dans une plateforme microfluidique microphysiologique tridimensionnelle pour récapituler le tubule proximal rénal.

Isolement de cellules épithéliales primaires du tubule proximal humain et leur utilisation dans la création d’un modèle microphysiologique du tubule proximal rénal

Les organoïdes cardiaques humains auto-assemblants (hCOs) sont un système émergent pour modéliser le développement et les maladies cardiaques humaines. Ici, une méthodologie pour générer et blesser les hCOs avec hypoxie-réoxygénation ainsi que des détails des résultats histologiques et fonctionnels attendus après une blessure sont fournis.

Un modèle de lésion hypoxie-réoxygénation chez les cardioïdes humains auto-assemblants

Nous décrivons ici une méthode détaillée pour la culture primaire des cellules épithéliales bronchiques humaines à partir d'explants de tissus des voies aériennes bronchiques humaines, y compris la croissance différenciée sur une interface air-liquide. Cette méthode fournit une source abondante de cellules primaires pour enquêter sur le rôle de l'épithélium des voies aériennes dans la santé des poumons et des maladies humaines.

Primaire cellules épithéliales bronchiques humaines Cultivé à partir d&#39;explants

CHIRP est une nouvelle technique et rapide à la carte génomique des sites de liaison de l'ARN non codantes de longues (lncRNAs). La méthode tire parti de la spécificité des oligonucléotides carrelage anti-sens pour permettre le dénombrement des sites génomiques lncRNA assortis.

Isolement de la chromatine par purification d&#39;ARN (CHIRP)

Découvrez un modèle in vitro de lésion d'ischémie-réperfusion rénale dans les cellules épithéliales tubulaires proximales. Cette méthode permet d'évaluer les marqueurs de lésion rénale et la fonction mitochondriale.

Modélisation de l’hypoxie/lésion par réoxygénation dans les cellules épithéliales tubulaires proximales

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