Stratégies comparatives pour la détection de l’ubiquitination dans les lysats cellulaires de mammifères en utilisant SMAD2/SMURF2 comme modèle

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17 avril 2026

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17 avril 2026

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L’ubiquitination est un régulateur critique des fonctions intracellulaires des protéines. Ici, nous décrivons deux méthodes de lyse cellulaire pour détecter les niveaux d’ubiquitination des protéines du substrat dans les cellules de mammifères et comparons leur efficacité dans l’analyse des niveaux d’ubiquitination. La surexpression des protéines dans HEK293T cellules a été induite par transfection transitoire, et des protéines ubiquitinées ont été détectées par analyse western blot.

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Ubiquitination des prot ines

Chapters in this video

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Introduction

0:05

Ubiquitination

0:50

Preparation of cells

2:35

Cell Collection

2:59

Agarose bead preparation

3:25

Ice-bath method

3:56

Heat-treatment method

4:41

Immunoprecipitation and Ubiquitination detection

5:51

Results

7:49

Conclusion and Experimental Precautions

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