Name: Coloration par peroxysome dans les cellules de mammifères à l’aide de sondes spécifiques aux peroxysomes (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-12-19T13:20:00.000+00:00
Duration: 5 min 57 s
Description: Découvrez la coloration des peroxysomes dans les cellules de mammifères à l'aide des sondes PeroxiSPY. Ces protocoles optimisés permettent l'imagerie en cellules vivantes et fixées pour étudier la dynamique des peroxysomes.

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<ol><li>Kassmann, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myelin+peroxisomes+-+essential+organelles+for+the+maintenance+of+white+matter+in+the+nervous+system%5BTitle%5D)+AND+%22Biochimie%22%5BJournal%5D)">Myelin peroxisomes - essential organelles for the maintenance of white matter in the nervous system.</a> Biochimie. 98, 111-118 (2014).</li>
<li>van den Bosch, H., Schutgens, R. B., Wanders, R. J., Tager, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biochemistry+of+peroxisomes%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Biochem%22%5BJournal%5D)">Biochemistry of peroxisomes.</a> Annu Rev Biochem. 61, 157-197 (1992).</li>
<li>Aubourg, P., Wanders, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peroxisomal+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Handb+Clin+Neurol%22%5BJournal%5D)">Peroxisomal disorders.</a> Handb Clin Neurol. 113, 1593-1609 (2013).</li>
<li>Honsho, M., Okumoto, K., Tamura, S., Fujiki, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peroxisome+biogenesis+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Exp+Med+Biol%22%5BJournal%5D)">Peroxisome biogenesis disorders.</a> Adv Exp Med Biol. 1299, 45-54 (2020).</li>
<li>Korotkova, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescent+fatty+acid+conjugates+for+live+cell+imaging+of+peroxisomes%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Fluorescent fatty acid conjugates for live cell imaging of peroxisomes.</a> Nat Commun. 15, 4314(2024).</li>
<li>Bezman, L., Moser, H. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incidence+of+X-linked+adrenoleukodystrophy+and+the+relative+frequency+of+its+phenotypes%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Med+Genet%22%5BJournal%5D)">Incidence of X-linked adrenoleukodystrophy and the relative frequency of its phenotypes.</a> Am J Med Genet. 76 (5), 415-419 (1998).</li>
<li>Visser, W. F., van Roermund, C. W., Ijlst, L., Waterham, H. R., Wanders, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolite+transport+across+the+peroxisomal+membrane%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+J%22%5BJournal%5D)">Metabolite transport across the peroxisomal membrane.</a> Biochem J. 401 (2), 365-375 (2007).</li>
<li>Matsuzono, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+PEX19%3A+cDNA+cloning+by+functional+complementation%2C+mutation+analysis+in+a+patient+with+Zellweger+syndrome%2C+and+potential+role+in+peroxisomal+membrane+assembly%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Human PEX19: cDNA cloning by functional complementation, mutation analysis in a patient with Zellweger syndrome, and potential role in peroxisomal membrane assembly.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 96 (5), 2116-2121 (1999).</li>
<li>Borisyuk, A., Howman, C., Pattabiraman, S., Kaganovich, D., Amen, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protein+Kinase+C+promotes+peroxisome+biogenesis+and+peroxisome-endoplasmic+reticulum+interaction%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Protein Kinase C promotes peroxisome biogenesis and peroxisome-endoplasmic reticulum interaction.</a> J Cell Biol. 224 (9), e202505040(2025).</li>
<li>Gould, S. G., Keller, G. A., Subramani, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+a+peroxisomal+targeting+signal+at+the+carboxy+terminus+of+firefly+luciferase%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Identification of a peroxisomal targeting signal at the carboxy terminus of firefly luciferase.</a> J Cell Biol. 105 (6 Pt 2), 2923-2931 (1987).</li>
<li>Lukinavicius, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+near-infrared+fluorophore+for+live-cell+super-resolution+microscopy+of+cellular+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Chem%22%5BJournal%5D)">A near-infrared fluorophore for live-cell super-resolution microscopy of cellular proteins.</a> Nat Chem. 5 (2), 132-139 (2013).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Anticorps anti-PEX14</td><td>Proteintech</td><td>10594-1-AP</td><td></td></tr><tr><td>Confocal Microscope</td><td>Nikon</td><td>A1r</td><td>Tout microscope confocal avec un objectif NA élevé, par exemple 60x huile NA1.4</td></tr><tr><td>DMEM</td><td>Pan Biotech</td><td>&nbsp ; P04-03590</td><td>Milieu de culture cellulaire</td></tr><tr><td>Plaques d’imagerie à fond de verre</td><td>Cellvis</td><td>D35C4-20-1.5-N</td><td></td></tr><tr><td>Anti-Lapins Alexa Fluor 488&nbsp ;</td><td>ABCAM</td><td>ab150081</td><td></td></tr><tr><td>HEK293T</td><td>ATCC</td><td>CRL-3216&nbsp ;</td><td></td></tr><tr><td>PeroxiSPY555</td><td>Spirochrome</td><td>https://spirochrome.com/product/peroxi_spy555/</td><td>&nbsp ; https://doi.org/10.1038/s41467-024-48679-2</td></tr><tr><td>PeroxisPY650</td><td>Spirochrome</td><td>https://spirochrome.com/product/peroxi_spy650/</td><td>&nbsp ; https://doi.org/10.1038/s41467-024-48679-2</td></tr></tbody></table>

coloration par peroxysome dans les cellules de mammifères à l’aide de sondes spécifiques aux peroxysomes

Peroxisome Staining in Mammalian Cells Using Peroxisome-Specific Probes

Coloration par peroxysome dans les cellules de mammifères à l’aide de sondes spécifiques aux peroxysomes

Peroxisomes are ubiquitous organelles with essential roles in human health, and their dysfunction leads to a spectrum of genetic disorders. Visualization ...

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Developmental Biology

Biologie du développement

La dynamique des glycosomes dans les trypanosomes africains est difficile à étudier par les techniques traditionnelles de biologie cellulaire telles que la microscopie électronique et la microscopie à fluorescence.  Comme moyen d’observer le comportement dynamique des organites, un système rapporteur d’organites fluorescents a été utilisé en conjonction avec la cytométrie en flux pour surveiller la dynamique des glycosomes en temps réel chez les parasites vivants.

Utilisation de protéines fluorescentes pour surveiller glycosome Dynamics dans le trypanosome africain

Nous présentons un protocole pour étudier la distribution des mitochondries et du réticulum endoplasmique dans les cellules entières après modification génétique utilisant la lumière corrélative et la microscopie électronique de volume comprenant la peroxidase d'ascorbate 2 et la coloration de peroxidase de raifort, sectionnement en série des cellules avec et sans le gène cible dans la même section, et imagerie en série par microscopie électronique.

Imagerie des mitochondries et du réticulum endoplasmique par microscopie corrélative de lumière et d'électron de volume

Ce protocole décrit l’évaluation de l’état redox subcellulaire spécifique au compartiment dans la cellule. Une sonde fluorescente sensible au redox permet une analyse ratiométrique pratique dans les cellules intactes.

Évaluation de l’oxydation cellulaire à l’aide d’une protéine fluorescente verte rougeox-sensible spécifique à compartiment subcellulaire

Le présent protocole décrit une méthode de détection des espèces réactives de l’oxygène (ROS) dans les organoïdes murins intestinaux à l’aide d’une imagerie qualitative et de tests de cytométrie quantitative. Ce travail peut être potentiellement étendu à d’autres sondes fluorescentes pour tester l’effet de composés sélectionnés sur les ROS.

Analyse du stress oxydatif dans les organoïdes intestinaux murins à l’aide d’une sonde fluorogénique sensible aux espèces réactives de l’oxygène

La mitophagie est le principal mécanisme du contrôle de la qualité mitochondriale. Cependant, l’évaluation de la mitophagie in vivo est entravée par le manque de tests quantitatifs fiables. Un protocole d’observation de la mitophagie dans les cellules vivantes est présenté ici à l’aide d’un colorant mitochondrial vert-fluorescent perméable de cellules et d’un colorant lysosome fluorescent rouge.

Visualisation de la mitophagie avec des colorants fluorescents pour les mitochondries et le lysosome

Ce protocole fournit des instructions pour déclencher et surveiller la pexophagie médiée par Stub1 dans les cellules vivantes.

Surveillance de la pexophagie médiée par Stub1

L’exploration de la mitophagie par microscopie électronique, capteurs génétiques et immunofluorescence nécessite un équipement coûteux, du personnel qualifié et un investissement en temps important. Ici, nous démontrons l’efficacité d’un kit de colorant de fluorescence commercial pour quantifier le processus de mitophagie à la fois chez Caenorhabditis elegans et dans une lignée cellulaire de cancer du foie.

Détection de la mitophagie chez Caenorhabditis elegans et des cellules de mammifères à l’aide de colorants spécifiques aux organites

Le peroxyde d’hydrogène (H2,O2) est à la fois une source de dommages oxydatifs et une molécule de signalisation. Ce protocole décrit comment mesurer le H 2 O2mitochondrial à l’aide de HyPer7 (mtHyPer7) ciblant les mitochondries, un biocapteur ratiométrique génétiquement codé, chez la levure vivante. Il détaille comment optimiser les conditions d’imagerie et effectuer des analyses cellulaires et subcellulaires quantitatives à l’aide d’un logiciel disponible gratuitement.

Imagerie de mtHyPer7, un biocapteur ratiométrique pour le peroxyde mitochondrial, dans des cellules de levure vivantes

Ce protocole présente un flux de travail pour la propagation, la différenciation et la coloration de cellules SH-SY5Y en culture et de neurones primaires de l’hippocampe de rat pour la visualisation et l’analyse de l’ultrastructure mitochondriale à l’aide de la microscopie à déplétion par émission stimulée (STED).

Utilisation de l’imagerie STED de cellules vivantes pour visualiser l’ultrastructure de la membrane interne mitochondriale dans des modèles de cellules neuronales

La teneur en hydroperoxyde lipidique représente l’indicateur le plus couramment utilisé de la mort cellulaire ferroptotique. Cet article présente l’analyse par cytométrie en flux étape par étape de la teneur en hydroperoxyde lipidique dans les cellules lors de l’induction de la ferroptose.

Révéler le phénotype ferroptotique du médulloblastome

Découvrez la coloration des peroxysomes dans les cellules de mammifères à l'aide des sondes PeroxiSPY. Ces protocoles optimisés permettent l'imagerie en cellules vivantes et fixées pour étudier la dynamique des peroxysomes.

Coloration par peroxysome dans les cellules de mammifères à l’aide de sondes spécifiques aux peroxysomes

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