Modèles murins d’épididymite induits par des motifs moléculaires associés aux agents pathogènes

Nous étudions l’impact de l’inflammation sur la physiologie de l’épididyme dans la fertilité masculine. Injection compartimentée précise d’inducteurs inflammatoires sans dommage. Le canal épididymique dans les modèles murins nécessite un mélange avancé de compétences chirurgicales et de formation.

Pour commencer, placez l’animal anesthésié en position couchée sur le champ chirurgical. À l’aide d’un stylo coupe-roi électrique, effectuez une trichotomie de l’abdomen de la souris pour éliminer complètement le pelage. Ensuite, utilisez du coton stérile imbibé d’une solution de chlorhexidine à 0,25 %.

Et ensuite avec de l’alcool pour pratiquer l’abspsie abdominale. Avec un scalpel taille 15, réalisez une incision verticale d’environ quatre millimètres sur le côté droit de la paroi abdominale. Maintenant, séparez doucement la peau avec des pinces chirurgicales émoussées en angle.

Ensuite, avec le même scalpel, réalisez une autre incision verticale d’environ quatre millimètres sur le péritoine sur le côté de la première incision. Soulevez délicatement l’épididyme dans les testicules depuis la cavité abdominale en poussant doucement le côté droit du scrotum. À l’aide de pinces chirurgicales courbées, tirez doucement le tissu adipeux blanc épididyme pour localiser le segment initial de l’épididyme.

À l’aide du tissu adipeux blanc épididymaire, exposez le segment initial au site de l’incision. Ensuite, positionnez la seringue Hamilton préchargée avec la solution d’injection à un angle d’environ 90 degrés parallèle au segment numéro un du segment initial. Insérez soigneusement l’aiguille dans l’espace interstitiel avec le biseau orienté vers le bas.

Ensuite, positionnez les pinces chirurgicales courbes au site d’insertion de l’aiguille et pincez doucement la capsule épididymale et l’aiguille. Appuyez lentement sur le ventouse de la seringue, jusqu’à ce que toute la solution stimulus ait été injectée. En maintenant les pinces chirurgicales courbées en place, retirez soigneusement l’aiguille et relâchez les pinces courbées après environ 30 secondes.

Ensuite, en utilisant le tissu adipeux blanc épididymaire, ramenez doucement le tissu testiculaire vers la cavité abdominale. Identifiez le péritoine et fermez-le en réalisant deux points de suture à l’aide d’un porte-aiguille et d’une suture chirurgicale de taille cinq, puis fermez l’incision cutanée avec deux points de suture. Après l’opération, observez la souris pour assurer une récupération postopératoire appropriée.

Après l’administration de l’anesthésie, placez la souris en position couchée sur le champ chirurgical. Placez l’index et le pouce sous le scrotum pour palper et confirmer la position des testicules et de l’épididyme. Si nécessaire, massez doucement les côtés de l’abdomen vers le scrotum pour guider les testicules et l’épididyme en position.

À l’aide d’un stylo coupe-eau électrique, effectuez une trichotomie du scrotum pour éliminer complètement les poils et désinfectez la zone avec du coton stérile imbibé dans une solution de chlorhexidine à 0,25 %, puis à l’alcool. Avec l’index et le pouce sous le scrotum, étirez doucement la peau du scrotum. À l’aide d’un scalpel taille 15, réalisez une incision verticale d’environ deux millimètres sur la partie médiale du scrotum.

Maintenant, déplacez doucement le testicule et l’épididyme gauches vers la cavité abdominale, tout en gardant le testicule droit et l’épididyme dans le scrotum. Avec l’index et le pouce positionnés sous le testicule droit et l’épididyme, maintenez la peau scrotale délicatement étirée. Ensuite, à l’aide de pinces chirurgicales à extrémité émoussée en angle, ouvrez et fermez soigneusement les extrémités au-dessus du fascia spermatique interne pour rompre le fascia spermatique interne et la tunique vaginale.

Ensuite, soulager la pression sur l’index et le pouce et insérer la pince chirurgicale inclinée par l’ouverture de la tunique vaginale vers la base du scrotum. À l’aide de la pince, tirez délicatement la graisse épididymale distale pour localiser l’épididyme de la queue. Localisez maintenant le canal déférent et positionnez les pinces chirurgicales droites en dessous.

Placez la pince à pince bulldog sur le canal déférant, en assurant suffisamment d’espace entre l’épididyme de la queue et la pince. Ensuite, positionner la seringue Hamilton préchargée avec la solution d’injection à un angle d’environ 10 à 15 degrés parallèle au canal déférant, et insérer l’aiguille dans le canal déférent avec le biseau orienté vers le haut. Pressez doucement les pinces chirurgicales droites pour libérer le canal déférent et appuyez lentement sur le plongeur de la seringue pour injecter toute la solution stimulus.

Maintenant, retirez les pinces chirurgicales droites. À l’aide de pinces chirurgicales courbes, pincez doucement la zone autour du site d’insertion de l’aiguille, puis retirez délicatement l’aiguille de la seringue. Après environ 30 secondes, retirez les pinces chirurgicales courbes et la pince à pince bulldog, puis remettez doucement le canal déférent sur le scrotum.

Ensuite, identifiez la tunique vaginale et refermez-la d’un point de suture à l’aide d’un porte-aiguille et d’une suture chirurgicale taille cinq-zéro. À l’aide de l’index, poussez doucement le testicule droit et l’épididyme vers l’abdomen et déplacez le testicule et l’épididyme gauches dans le scrotum. Enfin, fermez l’incision cutanée scrotale avec deux points de suture à l’aide d’un porte-aiguille et des points chirurgicaux de taille 5-0, puis observez la souris pour assurer une bonne récupération postopératoire.

L’injection interstitielle dans le segment initial a conduit à limiter le colorant bleu Evans injecté principalement au premier segment pendant jusqu’à 30 minutes après l’injection, puis à se diffuser dans les segments voisins du segment initial et de l’épididyme capule. L’injection intravasale dans le canal déférent a confiné le colorant bleu Evans dans la lumière du segment 10 pendant jusqu’à 30 minutes après l’injection. Des photomicrographies histologiques ont confirmé que les injections de sérum sérum contrôle n’ont pas modifié la morphologie de l’épididyme 72 heures après le traitement.

L’injection interstitielle de LPS dans le segment initial a induit un œdème interstitiel et des infiltrations intenses de cellules immunitaires interstitielles, intraépithéliales et intraluminales 72 heures après le traitement. L’injection intervasale de LPS ou de LTA dans l’épididyme de la queue a produit un œdème interstitiel et des infiltrations de cellules immunitaires dans les compartiments interstitiels et intraluminaux 72 heures après le traitement. Manque de modèles animaux reproductibles étudiant l’inflammation épididymale localisée et son impact sur la fertilité masculine.

L’injection régionale directe de substances chimiques inflammatoires permet une analyse précise des réponses immunitaires spécifiques à la région dans les résultats de l’épididyme.