30 décembre 2025
Cette étude présente un protocole pour établir un modèle de rat reproductible et mini-invasif de la thrombose du sinus sagittal supérieur induite par le chlorure ferrique, en utilisant une méthode de suture de soie combinée à l’imagerie laser par contraste de taches et à une échographie haute résolution pour l’évaluation.
Dans notre domaine, plusieurs méthodes de modélisation de la thrombose du sinus sagittal supérieur sont utilisées. Cependant, la méthode d’induction au chlorure ferrique est largement utilisée en raison de sa simplicité et de son faible coût. Nous visons à affiner le modèle de thrombose du sinus sagittal supérieur induit par le chlorure ferrique en réduisant les lésions corticales et en visualisant le thrombus sinusal.
Pour commencer, appliquez une pommade ophtalmique sur les deux yeux d’un rat anesthésié et rasez soigneusement les poils du cuir chevelu. Ensuite, fixez le rat en position couchée sur une plateforme d’intervention à rongeurs à l’aide d’un ruban médical. Maintenez la température corporelle autour de 37 degrés Celsius avec une bouillotte.
Désinfectez soigneusement le cuir chevelu rasé avec 5 % de povidone-iode, suivi d’alcool à 75 %, puis répétez trois fois à chaque fois. Après confirmation de la profondeur anesthésiante par le réflexe de pincé de l’orteil, réalisez une incision cutanée périmédiane de 15 millimètres sur le cuir chevelu. À l’aide d’une dissection contusée, séparez le fascia sous-jacent et le périoste pour exposer complètement le crâne.
Affinez le crâne à l’aide d’un foret crânien jusqu’à ce que le sinus sagittal supérieur soit clairement exposé, en partant du lambda et s’étendant de 10 millimètres vers l’avant le long de la suture sagittale. Utilisez une technique de forage intermittent pour éviter d’endommager la dure-mère sous-jacente et le sinus sagittal supérieur, et irriguez régulièrement la mèche avec du sérum physiologique normal pour éviter les dommages thermiques au cortex. Après avoir imaginé les conditions de base, appliquez un segment de 10 millimètres de suture de soie 2-0 imbibé d’une solution de chlorure ferrique à 40 % sur la surface exposée du sinus sagittal supérieur pendant cinq minutes.
Remplacez la suture par un segment fraîchement trempé et appliquez encore cinq minutes. Ensuite, rincez le champ chirurgical avec 0,5 millilitre de solution physiologique normale trois fois pour éliminer le chlorure ferrique résiduel. Fermez la peau à l’aide de sutures interrompues avec une suture de soie 4-0, et désinfectez la zone avec de la povidone-iode.
Observez le rat jusqu’à ce qu’il soit complètement réveillé, puis remettez-le dans sa cage. Activez le système d’imagerie à contraste par taches laser et le logiciel correspondant, RF LSI version cinq. Appuyez sur le bouton mode en ligne pour activer l’imagerie en direct.
Ajustez la hauteur et la position de l’instrument jusqu’à ce que le laser indicateur soit centré dans le champ de vision. Placez le rat sur une plateforme en mousse et ajustez sa position jusqu’à ce que le sinus sagittal supérieur s’aligne avec le laser indicateur. Ajustez le grossissement et la mise au point jusqu’à ce que l’image soit clairement affichée.
Fixez les limites inférieure et supérieure du seuil de pseudocouleur afin d’optimiser l’apparence visuelle de l’image de pseudocouleur. Établissez un ROI circulaire sur le sinus sagittal supérieur, enregistrez le flux veineux et enregistrez les images originales et pseudo-couleurs. Préparez de l’isoflurane, du gel à ultrasons, des lames de rasoir jetables, des rubans médicaux, et vérifiez tous les instruments nécessaires.
Installez le moteur d’acquisition tridimensionnel sur le système d’imagerie. Ensuite, installez le transducteur UHF 57X et initialisez le moteur. Après avoir anesthésé le rat, placez-le en position couchée sur la plaque thermostatique réglée à 37 degrés Celsius, puis fixez doucement la tête et les membres à l’aide de rubans médicaux.
Appliquez du gel à ultrasons uniformément sur le cuir chevelu exposé. Ajustez la position et l’orientation du rat par rapport au transducteur jusqu’à ce que le sinus sagittal supérieur et le thrombus intraluminal soient clairement visualisés. Acquérir des images tomographiques séquentielles du sinus sagittal supérieur dans le plan sagittal en utilisant l’imagerie tridimensionnelle en mode B avec une taille de pas de 0,04 millimètre, suivies d’images tomographiques dans le plan coronal en utilisant les mêmes réglages.
Utilisez le mode Doppler couleur pour observer le flux sanguin dans le sinus sagittal supérieur, et appliquez le mode Doppler à onde pulsée pour mesurer la vitesse du flux sanguin. Arrêtez l’anesthésie et observez le rat jusqu’à ce qu’il soit complètement réveillé. Ensuite, remettez le rat dans sa cage.
Enfin, exportez les images acquises et analysez-les à l’aide du logiciel Vevo LAB. Notez les zones transversales sagittales et coronales maximales ainsi que le volume du thrombus dans le sinus sagittal supérieur, ainsi que la vitesse maximale du flux sanguin du sinus. Après application locale de chlorure ferrique, l’imagerie laser par contraste de taches a détecté une réduction significative du flux sanguin local dans le sinus sagittal supérieur par rapport à la référence.
Au septième jour postopératoire, l’échographie des petits animaux a confirmé la formation de thrombus dans le sinus sagittal supérieur avec une recanalisation luminale partielle. L’échographie Doppler à onde pulsée a démontré une vitesse mesurable du flux sanguin dans la lumière résiduelle du sinus sagittal supérieur. L’imagerie par ultrasons tridimensionnelle a permis la mesure volumétrique du thrombus du sinus sagittal supérieur à l’aide de tranches d’image sérielle d’une épaisseur de 0,04 millimètre.
Notre modèle affiné est moins invasif et plus compatible avec l’imagerie par ultrasons, permettant un développement et une évaluation thérapeutiques plus fiables et directs. Assurez-vous que l’imagerie interopératoire par contraste de taches laser confirme le succès du modèle et que l’échographie haute résolution postopératoire surveille dynamiquement la formation, la lyse et la recanalisation du lumen.
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Cet article présente un modèle raffiné de thrombose du sinus sagittal supérieur (SSS) chez le rat, utilisant une technique de suture imprégnée de FeCl3. Le protocole minimise les lésions corticales et améliore la compatibilité avec les modalités d'imagerie, offrant ainsi une plateforme reproductible et peu invasive pour l'étude de la thrombose veineuse cérébrale (TVC) et l'évaluation de thérapies potentielles.
Des modèles précliniques fiables de thrombose veineuse cérébrale (TVC) sont essentiels à la recherche translationnelle et à l'évaluation thérapeutique dans le domaine de la découverte de médicaments neurovasculaires. Le modèle modifié de thrombose du sinus sagittal supérieur induite par le FeCl3 permet des études reproductibles, peu invasives et compatibles avec l'imagerie, renforçant ainsi la confiance prédictive lors de la validation précoce des cibles et de la réduction des risques mécanistiques. Cette plateforme renforce la prise de décision stratégique en fournissant des données quantitatives et longitudinales sur la formation du thrombus et la recanalisation.
Ce modèle s'intègre à la continuité découverte-préclinique, reliant les premières études mécanistiques à l'évaluation de l'efficacité translationnelle pour les indications neurovasculaires.