Name: Génération et manipulation génétique des organoïdes cervicales humains (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-03-10T13:20:00.000+00:00
Duration: 10 min 29 s
Description: Découvrez la génération et la manipulation génétique d'organoides cervicaux humains par nucléofection avec siRNA. Cette méthode permet d'étudier la biologie des cellules souches cervicales et les mécanismes pathologiques.

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<ol><li>Singh, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+estimates+of+incidence+and+mortality+of+cervical+cancer+in+2020%3Aa+baseline+analysis+of+the+WHO+Global+Cervical+Cancer+Elimination+Initiative%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Glob+Health%22%5BJournal%5D)">Global estimates of incidence and mortality of cervical cancer in 2020:a baseline analysis of the WHO Global Cervical Cancer Elimination Initiative.</a> Lancet Glob Health. 11 (2), e197-e206 (2023).</li>
<li>Worldwide cancer data. , World Cancer Research Fund International. 
 <a target="_blank" href="https://www.wcrf.org/cancer-trends/worldwide-cancer-data/">https://www.wcrf.org/cancer-trends/worldwide-cancer-data/</a> (2022).</li>
<li>Cohen, P. A., Jhingran, A., Oaknin, A., Denny, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cervical+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Cervical cancer.</a> Lancet. 393 (10167), 169-182 (2019).</li>
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<li>Kim, J., Lee, D., Son, K. B., Bae, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+burden+of+cervical+cancer+in+Korea%3Aa+population-based+study%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Environ+Res+Public+Health%22%5BJournal%5D)">The burden of cervical cancer in Korea:a population-based study.</a> Int J Environ Res Public Health. 17 (17), 6308(2020).</li>
<li>Chang, H. K., Seo, S. S., Myong, J. P., Yu, Y. L., Byun, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incidence+and+costs+of+cervical+intraepithelial+neoplasia+in+the+Korean+population%5BTitle%5D)+AND+%22J+Gynecol+Oncol%22%5BJournal%5D)">Incidence and costs of cervical intraepithelial neoplasia in the Korean population.</a> J Gynecol Oncol. 30 (3), e37(2019).</li>
<li>Anwar, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pregnancy+outcome+after+electrosurgical+cervical+cone+biopsy+using+Fischer+cone+biopsy+excisor%5BTitle%5D)+AND+%22J+Matern+Fetal+Neonatal+Med%22%5BJournal%5D)">Pregnancy outcome after electrosurgical cervical cone biopsy using Fischer cone biopsy excisor.</a> J Matern Fetal Neonatal Med. 29 (3), 477-481 (2016).</li>
<li>Pils, S., Eppel, W., Seemann, R., Natter, C., Ott, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sequential+cervical+length+screening+in+pregnancies+after+loop+excision+of+the+transformation+zone+conisation%3A+a+retrospective+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22BJOG%22%5BJournal%5D)">Sequential cervical length screening in pregnancies after loop excision of the transformation zone conisation: a retrospective analysis.</a> BJOG. 121 (4), 457-462 (2014).</li>
<li>Lee, C. J., Nam, Y., Rim, Y. A., Ju, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advanced+animal+replacement+testing+strategies+using+stem+cell+and+organoids%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Advanced animal replacement testing strategies using stem cell and organoids.</a> Int J Stem Cells. 18 (2), 107-125 (2025).</li>
<li>Jeong, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+to+identify+epithelial+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Organoid%22%5BJournal%5D)">Methods to identify epithelial stem cells.</a> Organoid. 2, e24(2022).</li>
<li>Dutta, D., Heo, I., Clevers, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Disease+modeling+in+stem+cell-derived+3D+organoid+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Disease modeling in stem cell-derived 3D organoid systems.</a> Trends Mol Med. 23 (5), 393-410 (2017).</li>
<li>Jeong, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+and+genetic+manipulation+of+human+and+mouse+oesophageal+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Gut%22%5BJournal%5D)">Identification and genetic manipulation of human and mouse oesophageal stem cells.</a> Gut. 65 (7), 1077-1086 (2016).</li>
<li>Myeong, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microbial+metabolites+control+self-renewal+and+precancerous+progression+of+human+cervical+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Microbial metabolites control self-renewal and precancerous progression of human cervical stem cells.</a> Nat Commun. 16 (1), 2327(2025).</li>
<li>Rock, J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Basal+cells+as+stem+cells+of+the+mouse+trachea+and+human+airway+epithelium%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Basal cells as stem cells of the mouse trachea and human airway epithelium.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 106 (31), 12771-12775 (2009).</li>
<li>Rajkumar, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+of+ubiquitin-specific+protease+11+mitigates+pulmonary+fibrosis+in+human+pluripotent+stem+cell-derived+alveolar+organoids%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Loss of ubiquitin-specific protease 11 mitigates pulmonary fibrosis in human pluripotent stem cell-derived alveolar organoids.</a> Int J Stem Cells. 18 (2), 205-213 (2025).</li>
<li>Ko, K. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Key+genetic+determinants+driving+esophageal+squamous+cell+carcinoma+initiation+and+immune+evasion%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterol%22%5BJournal%5D)">Key genetic determinants driving esophageal squamous cell carcinoma initiation and immune evasion.</a> Gastroenterol. 165 (3), 613-628 (2023).</li>
<li>Choi, Y. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((YAP1+regulates+esophageal+stem+cells%27+self-renewal+and+differentiation%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Res+Commun%22%5BJournal%5D)">YAP1 regulates esophageal stem cells' self-renewal and differentiation.</a> Biochem Biophys Res Commun. 726, 150280(2024).</li>
<li>Oh, B., Kim, J., Kim, N., Jeong, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lung+cancer+organoid+system+to+evaluate+the+cytotoxicity+of+natural+killer+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Lung cancer organoid system to evaluate the cytotoxicity of natural killer cells.</a> Int J Stem Cells. 18 (1), 99-106 (2025).</li>
<li>Han, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synergistic+drug+combinations+for+cancer+identified+in+a+CRISPR+screen+for+pairwise+genetic+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Synergistic drug combinations for cancer identified in a CRISPR screen for pairwise genetic interactions.</a> Nat Biotechnol. 35 (5), 463-474 (2017).</li>
<li>Jeong, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+KEAP1%2FNFE2L2+mutations+in+the+chemotherapeutic+response+of+patients+with+non-small+cell+lung+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Role of KEAP1/NFE2L2 mutations in the chemotherapeutic response of patients with non-small cell lung cancer.</a> Clin Cancer Res. 26 (1), 274-281 (2020).</li>
<li>Zhang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetically+defined%2C+syngeneic+organoid+platform+for+developing+combination+therapies+for+ovarian+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Discov%22%5BJournal%5D)">Genetically defined, syngeneic organoid platform for developing combination therapies for ovarian cancer.</a> Cancer Discov. 11 (2), 362-383 (2021).</li>
<li>Lohmussaar, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+organoids+model+cervical+tissue+dynamics+and+viral+oncogenesis+in+cervical+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Patient-derived organoids model cervical tissue dynamics and viral oncogenesis in cervical cancer.</a> Cell Stem Cell. 28 (8), 1380-1396 (2021).</li>
<li>Chumduri, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Opposing+Wnt+signals+regulate+cervical+squamocolumnar+homeostasis+and+emergence+of+metaplasia%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Opposing Wnt signals regulate cervical squamocolumnar homeostasis and emergence of metaplasia.</a> Nat Cell Biol. 23 (2), 184-197 (2021).</li>
<li>He, X. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PTEN-deficient+intestinal+stem+cells+initiate+intestinal+polyposis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Genet%22%5BJournal%5D)">PTEN-deficient intestinal stem cells initiate intestinal polyposis.</a> Nat Genet. 39 (2), 189-198 (2007).</li>
<li>Wang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pten+deletion+leads+to+the+expansion+of+a+prostatic+stem%2Fprogenitor+cell+subpopulation+and+tumor+initiation%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Pten deletion leads to the expansion of a prostatic stem/progenitor cell subpopulation and tumor initiation.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 103 (5), 1480-1485 (2006).</li>
<li>Yanagi, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pten+controls+lung+morphogenesis%2C+bronchioalveolar+stem+cells%2C+and+onset+of+lung+adenocarcinomas+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Pten controls lung morphogenesis, bronchioalveolar stem cells, and onset of lung adenocarcinomas in mice.</a> J Clin Invest. 117 (10), 2929-2940 (2007).</li>
<li>Jeong, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+KEAP1%2FNRF2+and+TP53+mutations+in+lung+squamous+cell+carcinoma+development+and+radiation+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Discov%22%5BJournal%5D)">Role of KEAP1/NRF2 and TP53 mutations in lung squamous cell carcinoma development and radiation resistance.</a> Cancer Discov. 7 (1), 86-101 (2017).</li>
<li>Liu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+dissection+of+cellular+and+molecular+features+underlying+human+cervical+squamous+cell+carcinoma+initiation+and+progression%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Adv%22%5BJournal%5D)">Single-cell dissection of cellular and molecular features underlying human cervical squamous cell carcinoma initiation and progression.</a> Sci Adv. 9 (4), eadd8977(2023).</li>
<li>Koster, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modelling+Chlamydia+and+HPV+co-infection+in+patient-derived+ectocervix+organoids+reveals+distinct+cellular+reprogramming%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Modelling Chlamydia and HPV co-infection in patient-derived ectocervix organoids reveals distinct cellular reprogramming.</a> Nat Commun. 13 (1), 1030(2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Kit de cellule primaire P4 4D-nucléofecteur X</td><td>Lonza</td><td>V4XP-4032</td><td></td></tr><tr><td>Plaque d’attache ultra-basse à 96 puits</td><td>SPL</td><td>39796</td><td></td></tr><tr><td>Filtre cellulaire 40 & micro ; m</td><td>SPL</td><td>93040</td><td></td></tr><tr><td>Tube conique 500 mL 500/boîte</td><td>SLP</td><td>SPL50050</td><td></td></tr><tr><td>Tube conique de 15 ml</td><td>Sarstedt</td><td>62.554.502</td><td></td></tr><tr><td>Tube CryoPure 1,8 mL - blanc</td><td>Sarstedt</td><td>72,379P</td><td></td></tr><tr><td>37 & deg ; C, 5 % CO2 & nbsp ; Incubateur</td><td>Eppendorf</td><td>9734IQ905476</td><td></td></tr><tr><td>Insertion en culture cellulaire</td><td>SPL</td><td>37024</td><td></td></tr><tr><td>Amaxa 4D-Nucléofecteur</td><td>Lonza</td><td>AAF-1003X</td><td></td></tr><tr><td>Tampon de blocage (2 % BCS dans DPBS)</td><td>Gibco / Welgene</td><td>BCS : 26010074 ; DPBS : LB001-02</td><td></td></tr><tr><td>Poudre de dispase II</td><td>Gibco</td><td>17105041</td><td></td></tr><tr><td>DNAse I</td><td>Enzynomique</td><td>M059L</td><td></td></tr><tr><td>Matrigel</td><td>Corning</td><td>356231</td><td></td></tr><tr><td>Tampon de lyse des globules rouges</td><td>Biosesang</td><td>R2015</td><td></td></tr><tr><td>TrypLE Express</td><td>Gibco</td><td>12605</td><td></td></tr><tr><td>Tampon de lavage (HBSS)</td><td>JBI</td><td>BL003-1</td><td></td></tr><tr><td>DMEM avancé/F12</td><td>Gibco</td><td>12634028</td><td></td></tr><tr><td>Supplément GlutaMAX</td><td>Gibco</td><td>35050-061</td><td></td></tr><tr><td>Pénicilline & ndash ; Streptycine</td><td>Biowest</td><td>L0022-100</td><td></td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Gibco</td><td>15630-080</td><td></td></tr><tr><td>Supplément B27</td><td>Gibco</td><td>17504044</td><td></td></tr><tr><td>Noggin</td><td>PeproTech</td><td>118214</td><td></td></tr><tr><td>N-acétyl-l-cystéine</td><td>Sigma</td><td>A9165</td><td></td></tr><tr><td>Y-27632</td><td>STEMCELL Technologies</td><td>72307</td><td></td></tr><tr><td>FGF2</td><td>PeproTech</td><td>100-18B-50UG</td><td></td></tr><tr><td>FGF7</td><td>PeproTech</td><td>AF-100-19-250UG</td><td></td></tr><tr><td>A83-01</td><td>Selleckchem</td><td>S7692&nbsp ;</td><td></td></tr><tr><td>Forskolin</td><td>Sigma</td><td>F6886</td><td></td></tr><tr><td>Neureguline 1</td><td>PeproTech</td><td>100-03-50UG</td><td></td></tr><tr><td>NGF</td><td>PeproTech</td><td>AF-450-01-100UG</td><td></td></tr><tr><td>R-spondine</td><td>Sinobiologique</td><td>11083-HNAS</td><td></td></tr><tr><td>HGF</td><td>Peprotech</td><td>100-39H-250ug</td><td></td></tr><tr><td>FGF10</td><td>Peprotech</td><td>100-26</td><td></td></tr><tr><td>Pétridish 35 mm&nbsp ;</td><td>SPL</td><td>10035</td><td></td></tr><tr><td><recette de médias organoïdes forts> forts</forts ></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td><fort>Nom</fort></td><td>< forte>Compagnie </forte ></td><td><fort>Numéro de catalogue</fort></td><td><Concentration> fort</Fort ></td></tr><tr><td>DMEM avancé/F12</td><td>Gibco</td><td>12634028</td><td></td></tr><tr><td>Supplément GlutaMAX</td><td>Gibco</td><td>35050-061</td><td>1x</td></tr><tr><td>Pénicilline & ndash ; Streptycine</td><td>Biowest</td><td>L0022-100</td><td>1x</td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Gibco</td><td>15630-080</td><td>10 mM</td></tr><tr><td>Supplément B27</td><td>Gibco</td><td>17504044</td><td>1x sans vitamine A</td></tr><tr><td>Noggin</td><td>PeproTech</td><td>118214</td><td>100 ng/ml</td></tr><tr><td>N-acétyl-l-cystéine</td><td>Sigma</td><td>A9165</td><td>1 mM</td></tr><tr><td>Y-27632</td><td>STEMCELL Technologies</td><td>72307</td><td>10 uM</td></tr><tr><td>FGF2</td><td>PeproTech</td><td>100-18B-50UG</td><td>50 ng/ml</td></tr><tr><td>FGF7</td><td>PeproTech</td><td>AF-100-19-250UG</td><td>25 ng/ml</td></tr><tr><td>FGF10</td><td>Peprotech</td><td>100-26</td><td>100 ng/ml</td></tr><tr><td>A83-01</td><td>Selleckchem</td><td>S7692&nbsp ;</td><td>500 nM</td></tr><tr><td>Forskolin</td><td>Sigma</td><td>F6886</td><td>10 & mu ; M</td></tr><tr><td>Neureguline 1</td><td>PeproTech</td><td>100-03-50UG</td><td>50 ng/ml</td></tr><tr><td>NGF</td><td>PeproTech</td><td>AF-450-01-100UG</td><td>20 ng/ml</td></tr><tr><td>R-spondine</td><td>Sinobiologique</td><td>11083-HNAS</td><td>100 ng/ml</td></tr><tr><td>HGF</td><td>Peprotech</td><td>100-39H-250ug</td><td>25 ng/ml</td></tr></tbody></table>

génération et manipulation génétique des organoïdes cervicales humains

Generation and Genetic Manipulation of Human Cervical Organoids

Génération et manipulation génétique des organoïdes cervicales humains

Cervical cancer is the fourth most common cancer in women and most frequently affects the uterine ectocervix. The uterine ectocervix is lined by ...

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La modélisation du développement du cerveau humain a été entravée en raison de la complexité sans précédent du tissu épithélial neural. Ici, une méthode de génération robuste d’organoïdes cérébraux pour délimiter les événements précoces du développement du cerveau humain et modéliser la microcéphalie in vitro est décrite.

Génération de iPSC dérivés du cerveau humain organites au Modèle des troubles du développement neurologique précoce

Organoïdes cérébrales représentent un nouveau système modèle pour étudier au début cerveau humain développement in vitro. Cet article présente la méthodologie détaillée pour générer efficacement homogène du prosencéphale dorsale de type organoïdes à partir des cellules souches humaines pluripotentes induites notamment les étapes cruciales de caractérisation et validation.

Génération de type prosencéphale standardisées et reproductibles organoïdes cérébrale de l’homme induites par les cellules souches pluripotentes

Un protocole pour produire des organoïdes endométrials primaires humains qui se composent des cellules épithéliales et stromales et pour retenir des caractéristiques du tissu endométrial indigène est présenté. Ce protocole décrit des méthodes de l'acquisition utérine de tissu au traitement histologique des organoïdes endométrials.

Génération d'organoïdes endométrials primaires humains multicellulaires

Ce protocole permet de différencier les cellules pluripotentes humaines en organoïdes intestinaux. Le protocole imite le développement humain normal en différenciant les cellules en une population d’endoderme définitif, d’endoderme de l’intestin postérieur, puis d’épithélium intestinal. Cela rend le protocole adapté à la fois à l’étude du développement intestinal et aux applications de modélisation des maladies.

Génération d’organoïdes intestinaux dérivés de hiPSC pour des applications de modélisation du développement et des maladies

Nous présentons des protocoles détaillés pour la génération et la caractérisation de modèles de développement néocortical basés sur des cellules souches pluripotentes induites par l’homme (hIPSC) 2D et 3D, ainsi que des méthodologies complémentaires permettant une analyse qualitative et quantitative de la biogenèse et de la fonction du cilium primaire (PC).

Modèles 2D et 3D à base de cellules souches pluripotentes induites par l’homme pour disséquer l’implication du cilium primaire au cours du développement néocortical

Ici, des méthodes détaillées pour générer, maintenir et caractériser des organoïdes de l’intestin grêle et du côlon dérivés de cellules souches pluripotentes humaines sont décrites. Ces méthodes sont conçues pour améliorer la reproductibilité, étendre l’évolutivité et réduire le temps de travail nécessaire au placage et au passage des organoïdes.

Génération, maintenance et caractérisation d’organoïdes intestinaux et coliques dérivés de cellules souches pluripotentes humaines

Les organoïdes cérébraux offrent des possibilités sans précédent d’étudier le développement des organes et la pathologie des maladies humaines. Bien qu’un grand succès ait été obtenu avec les systèmes de culture organoïdes cérébrales, il existe encore des difficultés opérationnelles dans l’application de cette technologie. Le présent protocole décrit une procédure organoïde cérébrale qui facilite le changement de milieu et le transfert organoïde.

Faciliter la culture organoïde cérébrale grâce à l’éclairage latéral à lumière douce

L’électroporation des organoïdes cérébraux des primates fournit une approche précise et efficace pour introduire des modifications génétiques transitoires dans différents types de progéniteurs et de neurones dans un système modèle proche du développement du néocortex (patho)physiologique des primates. Cela permet l’étude des processus neurodéveloppementaux et évolutifs et peut également être appliqué à la modélisation des maladies.

Microinjection ciblée et électroporation d’organoïdes cérébraux de primates pour la modification génétique

Nous présentons ici un protocole permettant de générer des organoïdes intestinaux de rat et de les utiliser dans plusieurs applications en aval. Les rats sont souvent un modèle préclinique privilégié, et le système organoïde intestinal robuste répond au besoin d’un système in vitro pour accompagner les études in vivo .

Génération et manipulation d’organoïdes intestinaux de rat

Ce protocole présente une méthode de génération d’organoïdes vasculaires à l’aide de cellules souches pluripotentes humaines.

Génération d’organoïdes vasculaires à partir de cellules souches pluripotentes induites par l’homme

Découvrez la génération et la manipulation génétique d'organoides cervicaux humains par nucléofection avec siRNA. Cette méthode permet d'étudier la biologie des cellules souches cervicales et les mécanismes pathologiques.

Génération et manipulation génétique des organoïdes cervicales humains

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