Name: Isolement et culture des cellules marginales primaires de la strie vasculaire à partir de souris néonatales (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-03-20T13:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 27 s
Description: Découvrez le protocole d'isolement et de culture de cellules marginales primaires de la strie vasculaire chez la souris néonatale. Ce modèle in vitro permet d'étudier la dysfonctionnement de la strie vasculaire liée aux pertes auditives.

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<ol><li>Raphael, Y., Altschuler, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+and+innervation+of+the+cochlea%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res+Bull%22%5BJournal%5D)">Structure and innervation of the cochlea.</a> Brain Res Bull. 60 (5-6), 397-422 (2003).</li>
<li>Bovee, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+stria+vascularis%3A+Renewed+attention+on+a+key+player+in+age-related+hearing+loss%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">The stria vascularis: Renewed attention on a key player in age-related hearing loss.</a> Int J Mol Sci. 25 (10), 5391(2024).</li>
<li>Schulte, B. A., Schmiedt, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lateral+wall+Na%2CK-ATPase+and+endocochlear+potentials+decline+with+age+in+quiet-reared+gerbils%5BTitle%5D)+AND+%22Hear+Res%22%5BJournal%5D)">Lateral wall Na,K-ATPase and endocochlear potentials decline with age in quiet-reared gerbils.</a> Hear Res. 61 (1-2), 35-46 (1992).</li>
<li>Hibino, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+is+the+highly+positive+endocochlear+potential+formed%3F+The+specific+architecture+of+the+stria+vascularis+and+the+roles+of+the+ion-transport+apparatus%5BTitle%5D)+AND+%22Pflugers+Arch%22%5BJournal%5D)">How is the highly positive endocochlear potential formed? The specific architecture of the stria vascularis and the roles of the ion-transport apparatus.</a> Pflugers Arch. 459 (4), 521-533 (2010).</li>
<li>Johns, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+the+stria+vascularis+in+neglected+otologic+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Hear+Res%22%5BJournal%5D)">The role of the stria vascularis in neglected otologic disease.</a> Hear Res. 428, 108682(2023).</li>
<li>Yu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+the+stria+vascularis+in+the+pathogenesis+of+sensorineural+hearing+loss%3A+A+narrative+review%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Role of the stria vascularis in the pathogenesis of sensorineural hearing loss: A narrative review.</a> Front Neurosci. 15, 774585(2021).</li>
<li>Ohlemiller, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+correlates+of+age-related+endocochlear+potential+reduction+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Hear+Res%22%5BJournal%5D)">Cellular correlates of age-related endocochlear potential reduction in a mouse model.</a> Hear Res. 220 (1-2), 10-26 (2006).</li>
<li>Mahendrasingam, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relative+time+course+of+degeneration+of+different+cochlear+structures+in+the+CD%2F1+mouse+model+of+accelerated+aging%5BTitle%5D)+AND+%22J+Assoc+Res+Otolaryngol%22%5BJournal%5D)">Relative time course of degeneration of different cochlear structures in the CD/1 mouse model of accelerated aging.</a> J Assoc Res Otolaryngol. 12 (4), 437-453 (2011).</li>
<li>Lee, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+apoptosis+induced+by+cisplatin+in+marginal+cells+in+mouse+stria+vascularis%5BTitle%5D)+AND+%22ORL+J+Otorhinolaryngol+Relat+Spec%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of apoptosis induced by cisplatin in marginal cells in mouse stria vascularis.</a> ORL J Otorhinolaryngol Relat Spec. 66 (3), 111-118 (2004).</li>
<li>Ohlemiller, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+endocochlear+potential+as+an+indicator+of+reticular+lamina+integrity+after+noise+exposure+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Hear+Res%22%5BJournal%5D)">The endocochlear potential as an indicator of reticular lamina integrity after noise exposure in mice.</a> Hear Res. 361, 138-151 (2018).</li>
<li>Liberman, M. C., Kujawa, S. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cochlear+synaptopathy+in+acquired+sensorineural+hearing+loss%3A+Manifestations+and+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Hear+Res%22%5BJournal%5D)">Cochlear synaptopathy in acquired sensorineural hearing loss: Manifestations and mechanisms.</a> Hear Res. 349, 138-147 (2017).</li>
<li>Levano, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Whole+neonatal+cochlear+explants+as+an+in+vitro+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Whole neonatal cochlear explants as an in vitro model.</a> J Vis Exp. (197), e65160(2023).</li>
<li>Wu, K. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+culture+of+primary+cochlear+hair+cells+from+neonatal+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Isolation and culture of primary cochlear hair cells from neonatal mice.</a> J Vis Exp. (199), e65687(2023).</li>
<li>Schmiedt, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+furosemide+applied+chronically+to+the+round+window%3A+A+model+of+metabolic+presbyacusis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Effects of furosemide applied chronically to the round window: A model of metabolic presbyacusis.</a> J Neurosci. 22 (21), 9643-9650 (2002).</li>
<li>Kurata, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histopathologic+evaluation+of+vascular+findings+in+the+cochlea+in+patients+with+presbycusis%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA+Otolaryngol+Head+Neck+Surg%22%5BJournal%5D)">Histopathologic evaluation of vascular findings in the cochlea in patients with presbycusis.</a> JAMA Otolaryngol Head Neck Surg. 142 (2), 173-178 (2016).</li>
<li>Wangemann, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+of+KCNJ10+protein+expression+abolishes+endocochlear+potential+and+causes+deafness+in+Pendred+syndrome+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Med%22%5BJournal%5D)">Loss of KCNJ10 protein expression abolishes endocochlear potential and causes deafness in Pendred syndrome mouse model.</a> BMC Med. 2, 30(2004).</li>
<li>Ding, L., Wang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((miR-106a+facilitates+the+sensorineural+hearing+loss+induced+by+oxidative+stress+by+targeting+connexin-43%5BTitle%5D)+AND+%22Bioengineered%22%5BJournal%5D)">miR-106a facilitates the sensorineural hearing loss induced by oxidative stress by targeting connexin-43.</a> Bioengineered. 13 (6), 14080-14093 (2022).</li>
<li>Wan, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PARP1+inhibition+prevents+oxidative+stress+in+age-related+hearing+loss+via+PAR-Ca%282%2B%29-AIF+axis+in+cochlear+strial+marginal+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Free+Radic+Biol+Med%22%5BJournal%5D)">PARP1 inhibition prevents oxidative stress in age-related hearing loss via PAR-Ca(2+)-AIF axis in cochlear strial marginal cells.</a> Free Radic Biol Med. 220, 222-235 (2024).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decreased+poly%28ADP-ribose%29+polymerase+1+expression+attenuates+glucose+oxidase-induced+damage+in+rat+cochlear+marginal+strial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Decreased poly(ADP-ribose) polymerase 1 expression attenuates glucose oxidase-induced damage in rat cochlear marginal strial cells.</a> Mol Neurobiol. 53 (9), 5971-5984 (2016).</li>
<li>Fetoni, A. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathogenesis+of+presbycusis+in+animal+models%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Gerontol%22%5BJournal%5D)">Pathogenesis of presbycusis in animal models: A review.</a> Exp Gerontol. 46 (6), 413-425 (2011).</li>
<li>Marie, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Senescence-accelerated+mouse+prone+8+%28SAMP8%29+as+a+model+of+age-related+hearing+loss%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Lett%22%5BJournal%5D)">Senescence-accelerated mouse prone 8 (SAMP8) as a model of age-related hearing loss.</a> Neurosci Lett. 656, 138-143 (2017).</li>
<li>Li, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+models+in+sensorineural+hearing+loss+research%3A+A+comprehensive+review%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Sci%22%5BJournal%5D)">Rodent models in sensorineural hearing loss research: A comprehensive review.</a> Life Sci. 358, 123156(2024).</li>
<li>Bommakanti, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cochlear+histopathology+in+human+genetic+hearing+loss%3A+State+of+the+science+and+future+prospects%5BTitle%5D)+AND+%22Hear+Res%22%5BJournal%5D)">Cochlear histopathology in human genetic hearing loss: State of the science and future prospects.</a> Hear Res. 382, 107785(2019).</li>
<li>Nicolson, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Navigating+hereditary+hearing+loss%3A+Pathology+of+the+inner+ear%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Navigating hereditary hearing loss: Pathology of the inner ear.</a> Front Cell Neurosci. 15, 660812(2021).</li>
<li>Liu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applications+and+challenges+of+CRISPR-Cas+gene-editing+to+disease+treatment+in+clinics%5BTitle%5D)+AND+%22Precis+Clin+Med%22%5BJournal%5D)">Applications and challenges of CRISPR-Cas gene-editing to disease treatment in clinics.</a> Precis Clin Med. 4 (3), 179-191 (2021).</li>
<li>Guo, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+methods+and+research+progress+of+livestock+and+poultry+immortalized+cell+lines%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Vet+Sci%22%5BJournal%5D)">Establishment methods and research progress of livestock and poultry immortalized cell lines: A review.</a> Front Vet Sci. 9, 956357(2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Tube centrifuge de 15 mL</td><td>Servicebio</td><td>EP-1501-J</td><td>Utilisation pour la culture</td></tr><tr><td>Plat de culture cellulaire de 35 mm</td><td>NEST</td><td>706001</td><td>Utilisation pour la dissection</td></tr><tr><td>4 % de paraformaldéhyde</td><td>Servicebio</td><td>G1101</td><td>Coloration immunofluorescente</td></tr><tr><td>Plaque à 6 puits</td><td>Servicebio</td><td>CCP-6H</td><td>Utilisation pour la culture</td></tr><tr><td>Anticorps anti-lapin conjugué Alexa Fluor 488</td><td>Proteintech</td><td>SA00013-2</td><td>Coloration immunofluorescente</td></tr><tr><td>Milieu de montage antifade avec DAPI</td><td>Absine</td><td>abs9235</td><td>Coloration immunofluorescente</td></tr><tr><td>Kit de comptage cellulaire-8</td><td>Beyotime</td><td>C0037</td><td>utilisation pour le comptage de cellules</td></tr><tr><td>Colagnase de type II</td><td>Biosharp</td><td>BS164</td><td>Utilisation pour la culture</td></tr><tr><td>Système de balayage laser confocal</td><td>Olympus&nbsp ;</td><td>FV1200</td><td>Coloration immunofluorescente</td></tr><tr><td>DCFH-DA</td><td>Invitrogen</td><td>C2938</td><td>Coloration ROS</td></tr><tr><td>D-gal</td><td>Solarbio</td><td>D8310</td><td>Utilisation pour la modélisation cellulaire</td></tr><tr><td>EpiCM-a Medium</td><td>Sciencell</td><td>4131</td><td>Utilisation pour la culture</td></tr><tr><td>Pinces fines</td><td>Propulsion</td><td>F11020-11</td><td>Utilisation pour la dissection</td></tr><tr><td>Sérum de chèvre</td><td>Beyotime</td><td>C0265</td><td>Coloration immunofluorescente</td></tr><tr><td>H2O2</td><td>Mkbio</td><td>MM0707</td><td>Utilisation pour la modélisation cellulaire</td></tr><tr><td>La solution salée équilibrée de Hank (HBSS)</td><td>Biosharp</td><td>BL561A</td><td>Utilisation pour la culture</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Propulsion</td><td>R510-22-10</td><td>Utilisation pour la dissection</td></tr><tr><td>Anticorps KCNQ1 (G-8)</td><td>Santa Cruz</td><td>SC-365186</td><td>Coloration immunofluorescente</td></tr><tr><td>Microscope</td><td>Olympus&nbsp ;</td><td>SZX7-1063</td><td>Utilisation pour la dissection</td></tr><tr><td>Microscope</td><td>Olympus&nbsp ;</td><td>IX71</td><td>Utilisé pour observer les résultats de la coloration par immunofluorescence</td></tr><tr><td>MitoTracker Red CMXRos</td><td>Invitrogen</td><td>M7512</td><td>Coloration ROS</td></tr><tr><td>Petits souris néonatales (P0-P3)</td><td></td><td></td><td>fourni par BIONT</td></tr><tr><td>PBS</td><td>Servicebio</td><td>G4202</td><td>Coloration immunofluorescente</td></tr><tr><td>Anticorps monoclonal anti-souris CK18 du lapin</td><td>Proteintech</td><td>10830-1-AP</td><td>Coloration immunofluorescente</td></tr><tr><td>Kit de coloration sénescence &beta ;-Galactosidase</td><td>Beyotime</td><td>C0602</td><td>Coloration vieillissante</td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>X100</td><td>Coloration immunofluorescente</td></tr></tbody></table>

isolement et culture des cellules marginales primaires de la strie vasculaire à partir de souris néonatales

Isolation and Culture of Primary Marginal Cells of the Stria Vascularis from Neonatal Mice

Isolement et culture des cellules marginales primaires de la strie vasculaire à partir de souris néonatales

The stria vascularis is a key structure in the inner ear responsible for generating and maintaining the endocochlear potential (EP), and its dysfunction ...

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Ici, nous décrivons un protocole pour l'isolement et la culture de cellules endothéliales murines pulmonaires. Cette méthode comprend mécanicien et dissociation enzymatique du tissu pulmonaire ainsi que d'un processus de purification en 2 étapes utilisant des anticorps anti-PECAM-1 et anti-ICAM-2 anticorps conjugués à des billes magnétiques, ce qui produit une population de cellules endothéliales pures d'origine essentiellement microvasculaires.

Isolement et culture de cellules endothéliales pulmonaires des souris néonatales

Cultures de cardiomyocytes de souris primaires sont un des outils les pivots de l'enquête de l'organisation et de la fonction myofibrillaire. Le protocole suivant décrit l'isolement et la culture des cardiomyocytes primaires de coeurs de souris néonatales. Les cultures de cardiomyocytes résultants peuvent être ensuite utilisés pour une variété de tests biomécaniques, biochimiques et cellulaires biologiques.

Isolement et culture de cardiomyocytes de souris néonatales

Une des clés de réussite de l'enquête de la biologie de la microglie est la préservation de la microglie immunofunction ex vivo lors de l'isolement de tissu du SNC. Isoler la microglie par les résultats serrant rotatifs dans des cultures de cellules de grande pureté et immunofonctionnel évaluée par imagerie de fluorescence, immunocytochimie, et ELISA activation de la microglie suivante avec le lipopolysaccharide stimuli pro-inflammatoires (LPS) et Pam 3 CSK 4 (Pam).

Isolation des corticale microglie avec immunophénotype préservée et fonctionnalité De murins nouveau-nés

Les cellules endothéliales microvasculaires cérébrales (BMEC) sont interconnectées par des protéines jonctionnelles spécifiques formant une barrière hautement régulée séparant le sang et le système nerveux central (SNC), ce que l’on appelle la barrière hémato-encéphalique (BHE). L’isolement des cellules endothéliales microvasculaires cérébrales primaires murines, comme nous l’avons vu dans ce protocole, permet des études in vitro détaillées de la BHE.

Isolement de cellules primaires murins cerveau endothéliales microvasculaires

Les kératinocytes épidermiques forment une barrière fonctionnelle de la peau et sont positionnés à la ligne de front de la défense de l'hôte contre les insultes environnementales externes. Nous décrivons ici des méthodes d'isolement et de culture primaire de kératinocytes épidermiques provenant de peau de souris néonatale et adulte, et l'induction de la différenciation terminale et la réponse inflammatoire déclenchée par les UVB des kératinocytes.

Isolation et culture des kératinocytes de la souris primaire de la peau de souris néonatale et adulte

Les cultures primaires de microglies sont couramment utilisées pour évaluer de nouvelles molécules anti-inflammatoires. Le présent protocole décrit une méthode reproductible et pertinente pour isoler magnétiquement la microglie des nouveau-nés.

Isolement magnétique de cellules microgliales de souris nouveau-née pour des cultures de cellules primaires

Dans cet article, des cellules endothéliales pulmonaires primaires ont été isolées et cultivées à partir de souris néonatales.

Isolement de cellules endothéliales pulmonaires primaires de souris

Les cultures primaires de glie de Müller obtenues à partir de rétines de souris représentent un outil très robuste et fiable pour étudier la conversion gliale en cellules progénitrices rétiniennes après un traitement par microARN. Des molécules uniques ou des combinaisons peuvent être testées avant leur application ultérieure d’approches in vivo .

Cultures cellulaires primaires pour étudier le potentiel de régénération de murin Müller Glia après un traitement par microARN

La strie vasculaire est vitale pour la génération du potentiel endocochléaire. Ici, nous présentons la dissection de la strie vasculaire de la souris adulte pour le séquençage mononucléaire ou l’immunomarquage.

Dissection de la strie vasculaire de souris adulte pour le séquençage mononucléaire ou l’immunomarquage

Ce manuscrit décrit un protocole détaillé pour isoler les cellules gliales rétiniennes de Müller des yeux de souris. Le protocole commence par l’énucléation et la dissection des yeux de souris, suivies de l’isolement, de l’ensemencement et de la culture des cellules de Müller.

Isolement de cellules gliales gliales rétiniennes primaires de souris

Cet article présente un protocole détaillé pour isoler les cellules primaires de Müller de la rétine chez le rat Sprague-Dawley (SD) néonatal. La procédure comprend l’énucléation des globes oculaires, la dissection du tissu rétinien, l’extraction et l’identification des cellules, ainsi que des considérations clés pour la culture cellulaire ultérieure.

Isolement et culture de cellules primaires de Müller rétiniennes chez des rats Sprague-Dawley (SD)

Découvrez le protocole d'isolement et de culture de cellules marginales primaires de la strie vasculaire chez la souris néonatale. Ce modèle in vitro permet d'étudier la dysfonctionnement de la strie vasculaire liée aux pertes auditives.

Isolement et culture des cellules marginales primaires de la strie vasculaire à partir de souris néonatales

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