Name: Cartographie de la morphologie des cellules étoilées hépatiques dans des modèles murins de fibrose hépatique (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-02-13T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 55 s
Description: Découvrez une méthode d'imagerie 3D pour cartographier la morphologie des cellules étoilées hépatiques dans le foie intact de souris. Ce protocole combine marquage fluorescent, clarification tissulaire iDISCO et microscopie confocale pour reconstruire l'architecture cellulaire.

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<ol><li>Henderson, N. C., Rieder, F., Wynn, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibrosis%3A+from+mechanisms+to+medicines%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Fibrosis: from mechanisms to medicines.</a> Nature. 587 (7835), 555-566 (2020).</li>
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<li>Hagström, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibrosis+stage+but+not+NASH+predicts+mortality+and+time+to+development+of+severe+liver+disease+in+biopsy-proven+NAFLD%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Fibrosis stage but not NASH predicts mortality and time to development of severe liver disease in biopsy-proven NAFLD.</a> J Hepatol. 67 (6), 1265-1273 (2017).</li>
<li>Geng, Y., Schwabe, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hepatic+stellate+cell+heterogeneity%3A+Functional+aspects+and+therapeutic+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Hepatic stellate cell heterogeneity: Functional aspects and therapeutic implications.</a> Hepatology. , (2025).</li>
<li>Trinh, V. Q. -H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hepatic+stellate+cells+maintain+liver+homeostasis+through+paracrine+neurotrophin-3+signaling+that+induces+hepatocyte+proliferation%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Signal%22%5BJournal%5D)">Hepatic stellate cells maintain liver homeostasis through paracrine neurotrophin-3 signaling that induces hepatocyte proliferation.</a> Sci Signal. 16 (787), eadf6696(2023).</li>
<li>Sugimoto, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hepatic+stellate+cells+control+liver+zonation%2C+size+and+functions+via+R-spondin+3%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Hepatic stellate cells control liver zonation, size and functions via R-spondin 3.</a> Nature. 640 (8059), 752-761 (2025).</li>
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<li>Sato, M., Suzuki, S., Senoo, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hepatic+stellate+cells%3A+Unique+characteristics+in+cell+biology+and+phenotype%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Struct+Funct%22%5BJournal%5D)">Hepatic stellate cells: Unique characteristics in cell biology and phenotype.</a> Cell Struct Funct. 28 (2), 105-112 (2003).</li>
<li>Du, K., Jun, J. H., Dutta, R. K., Plasticity Diehl, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((heterogeneity%2C+and+multifunctionality+of+hepatic+stellate+cells+in+liver+pathophysiology%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatol+Commun%22%5BJournal%5D)">heterogeneity, and multifunctionality of hepatic stellate cells in liver pathophysiology.</a> Hepatol Commun. 8 (5), e0411(2024).</li>
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<li>Renier, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((iDISCO%3A+A+simple%2C+rapid+method+to+immunolabel+large+tissue+samples+for+volume+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">iDISCO: A simple, rapid method to immunolabel large tissue samples for volume imaging.</a> Cell. 159 (4), 896-910 (2014).</li>
<li>Molbay, M., Kolabas, Z. I., Todorov, M. I., Ohn, T., Ertürk, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+guidebook+for+DISCO+tissue+clearing%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Syst+Biol%22%5BJournal%5D)">A guidebook for DISCO tissue clearing.</a> Mol Syst Biol. 17 (3), e9807(2021).</li>
<li>Scott, G. D., Blum, E. D., Fryer, A. D., Jacoby, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+optical+clearing%2C+three-dimensional+imaging%2C+and+computer+morphometry+in+whole+mouse+lungs+and+human+airways%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Cell+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Tissue optical clearing, three-dimensional imaging, and computer morphometry in whole mouse lungs and human airways.</a> Am J Respir Cell Mol Biol. 51 (1), 43-55 (2014).</li>
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<li>Mederacke, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fate+tracing+reveals+hepatic+stellate+cells+as+dominant+contributors+to+liver+fibrosis+independent+of+its+aetiology%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Fate tracing reveals hepatic stellate cells as dominant contributors to liver fibrosis independent of its aetiology.</a> Nat Commun. 4, 2823(2013).</li>
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<li>Shrirao, A. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autofluorescence+of+blood+and+its+application+in+biomedical+and+clinical+research%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnol+Bioeng%22%5BJournal%5D)">Autofluorescence of blood and its application in biomedical and clinical research.</a> Biotechnol Bioeng. 118 (12), 4550-4576 (2021).</li>
<li>Croce, A. C., Bottiroli, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipids%3A+Evergreen+autofluorescent+biomarkers+for+the+liver+functional+profiling%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Histochem%22%5BJournal%5D)">Lipids: Evergreen autofluorescent biomarkers for the liver functional profiling.</a> Eur J Histochem. 61 (2), 2808(2017).</li>
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</ol>

<table><tbody><tr><td>Anticorps RFP, lapin, pré-adsorbé</td><td>Rockland</td><td>600-401-379</td><td></td></tr><tr><td>Antenne inférieure en verre de 35 mm à 4 chambres avec micropuits de 20 mm, verre de couverture #1,5</td><td>Cellvis</td><td>D35C4201,5N</td><td></td></tr><tr><td>Injection d’AnaSed (injection de xylazine)</td><td>Akorn, Inc.</td><td>NDC 593990110-20</td><td>20 mg/mL</td></tr><tr><td>Tubes centrifugeuses coniques : 50 ml & nbsp ;</td><td>Faucon</td><td>352098</td><td></td></tr><tr><td>Cotonne-tiges</td><td>Medline</td><td>MDS202000</td><td></td></tr><tr><td>Verrouillage courbé &nbsp ; Hémostats</td><td>Fisher Scientific</td><td>16-100-117</td><td></td></tr><tr><td>AffiniPure Donkey Anti-Rat IgG conjugué en Cy3 (H+L)</td><td>Jackson ImmunoResearch</td><td>712-165-153</td><td></td></tr><tr><td>Ciseaux délicats à fonctionnement 4,75" courbés, tranchants/émoussés</td><td>Instrument chirurgical Roboz</td><td> 728501</td><td></td></tr><tr><td>Éther dibenzylique (DBE), 98 %</td><td>Sigma Aldrich</td><td>108014</td><td></td></tr><tr><td>Dichlorométhane (DCM), &nbsp ; &ge ; 99.8%</td><td>Sigma Aldrich</td><td>270997</td><td></td></tr><tr><td>Diméthylsulfoxyde (DMSO), &ge ; 99.9%</td><td>Sigma Aldrich</td><td>D8418</td><td></td></tr><tr><td>Anti-Rabbit IgG (H+L) Anticorps secondaire fortement adsorbé croisé, Alexa Fluor 647</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>A31573</td><td></td></tr><tr><td>Sérum d’âne</td><td>EMD Millipore</td><td>S30</td><td></td></tr><tr><td>Éthyle cinnamate, 99 %</td><td>Sigma Aldrich</td><td>112372</td><td></td></tr><tr><td>ciseaux micro-disséqueurs ultra fins ; Lame 24 mm</td><td>Fisher Scientific</td><td>NC9232515</td><td></td></tr><tr><td>Rat à anticorps monoclonaux F4/80</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>14-4801-82</td><td></td></tr><tr><td>Fidji</td><td>NIH</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pinces</td><td>Fisher Scientific</td><td>NC9214139</td><td></td></tr><tr><td>Glycine</td><td>Bio-Rad</td><td>1610718</td><td></td></tr><tr><td>Héparine Sel Sodique</td><td>Chem-Impex</td><td>29984</td><td></td></tr><tr><td>Four d’hybridation hybaïde</td><td>Triad Scientific</td><td>Maxi 14</td><td></td></tr><tr><td>Peroxyde d’hydrogène, 30 %</td><td>Sigma Aldrich</td><td>31642</td><td></td></tr><tr><td>Logiciel Imaris 10.2.0</td><td>Oxford Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Logiciel ImarisFileConverter 10.2.0</td><td>Oxford Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ImarisViewer 11.0.0</td><td>Oxford Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cathéter IV</td><td>Exel International Inc.</td><td>EXE 26751</td><td></td></tr><tr><td>Kétamine, injection d’hydrochlorure</td><td>Dechra</td><td>B8U4</td><td>100 mg/mL</td></tr><tr><td>Logiciel LAS X 4.4.0.24861</td><td>Leica</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Leica Stellaris 8 Confocal Microscope</td><td>Leica</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Méthanol, grade HPLC</td><td>Fisher</td><td>A452-2</td><td></td></tr><tr><td>Rotateur polyvalent</td><td>Industries Scientifiques, Inc.</td><td>Modèle 151</td><td></td></tr><tr><td>Aiguilles (27G x 1/2'')</td><td>BD</td><td>305109</td><td></td></tr><tr><td>Paraformadéhylde, poudre, 95 %</td><td>Sigma Aldrich</td><td>158127</td><td></td></tr><tr><td>Pompe péristaltique</td><td>Gilson</td><td>Modèle Minipuls 3</td><td></td></tr><tr><td>Tube de pompe péristaltique, MasterFlex</td><td>Thermo Scientific</td><td>96400-16</td><td>Tubage de pompe de précision en silicone durci au peroxyde de 3,1 mm diamètre x 7,6 m L/S, taille L/S 16, barpille de tuyau de 1/8 pouce</td></tr><tr><td>Solution physiologique tamponnée au phosphate (PBS)</td><td>Cytiva</td><td>SH30256.01</td><td>Stérile, pH 7,0 - 7,2, sans calcium, magnésium</td></tr><tr><td>Propidium iodure, &ge ; 94,0 % (HPLC)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P4170</td><td></td></tr><tr><td>Lames de rasoir</td><td>American Line</td><td>66-0362</td><td></td></tr><tr><td>Plateforme basculante</td><td>VWR</td><td>Modèle 200</td><td></td></tr><tr><td>Azidée de sodium, &ge ; 99.5%</td><td>Sigma Aldrich</td><td>S2002</td><td></td></tr><tr><td>Suture</td><td>Ethicon</td><td>J109T</td><td></td></tr><tr><td>Seringue (1 mL)</td><td>BD</td><td>309628</td><td></td></tr><tr><td>TritonX-100</td><td>Sigma</td><td>T9284</td><td></td></tr><tr><td>Préadolescent-20</td><td>Thermo Scientific</td><td>J20605-AP</td><td></td></tr><tr><td>Fioles, bouchon à vis avec bouchon plein avec doublure en aluminium, préassemblé</td><td>Sigma Aldrich</td><td>27470-U</td><td>volume 7 mL, flacon en verre ambré, O.D. & times ; H 17 mm et les heures ; 60 mm, filetage pour 15-425</td></tr></tbody></table>

cartographie de la morphologie des cellules étoilées hépatiques dans des modèles murins de fibrose hépatique

Mapping Hepatic Stellate Cell Morphology in Mouse Models of Liver Fibrosis

Cartographie de la morphologie des cellules étoilées hépatiques dans des modèles murins de fibrose hépatique

Tissue-resident fibroblasts are the cellular drivers of fibrosis across tissues. Within the liver, hepatic stellate cells (HSCs), the resident pericytes ...

mapping-hepatic-stellate-cell-morphology-mouse-models-liver

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Nous décrivons ici une méthode pour l'isolement de cellules étoilées du foie à partir du foie de souris. Pour la purification de cellules étoilées, les foies de souris sont...

Sept étapes pour Stellate Cellules

La perturbation de l’écoulement de la bile entraîne une lésion hépatique cholestatique inflammatoire sévère avec une séquence caractéristique d’altérations morphologiques dépendante du temps. Nous présentons ici un protocole de ligature chirurgicale du canal cholédoque chez la souris qui permet d’induire une forte réponse fibrotique après 21 à 28 jours.

Bile ligature du canal chez la souris: induction de inflammatoire lésions hépatiques et les fibrose par obstructive cholestase

Une fibrose soutenue avec dépôt excessif de protéines de la matrice extracellulaire conduit à la cirrhose. L’abus d’alcool est l’une des principales causes de maladies graves du foie. Nous avons établi un modèle de foie fibrotique de poisson-zèbre induit par l’éthanol pour étudier les mécanismes et les stratégies de promotion de la régénération des hépatocytes lors de lésions induites par l’alcool.

Développement d&#39;un fibrotique du foie Modèle induite de l&#39;éthanol en Zebrafish pour étudier de cellules souches médiée hépatocytes Régénération

Ce protocole fournit une méthode simple et fiable pour la production de tranches de foie de précision viables de souris. Les échantillons de tissu ex vivo peuvent être maintenus dans des conditions de culture tissulaire de laboratoire pendant plusieurs jours, fournissant un modèle flexible pour examiner la pathobiologie de foie.

Murine Precision-Cut Liver Slices comme un modèle Ex Vivo de biologie du foie

Ce protocole présente un modèle biomimétique 3D avec compartiment stromal fibrotique d’accompagnement. Préparé avec des hydrogels physiologiquement pertinents dans des rapports imitant les propriétés biophysiques de la matrice extracellulaire stromal, un médiateur actif des interactions cellulaires, de la croissance tumorale et de la métastase.

Un modèle biomimétique pour le cancer du foie pour étudier les interactions tumeur-stroma dans un environnement 3D avec tunable propriétés bio-physiques

Le protocole actuel optimise les méthodes de perfusion/décellularisation in situ du foie et de microscopie à deux photons afin d’établir une plateforme fiable pour visualiser la dynamique du remodelage de la matrice extracellulaire (ECM) au cours de la stéatohépatite non alcoolique (NASH).

Imagerie 3D de la matrice extracellulaire hépatique dans un modèle murin de stéatohépatite non alcoolique

Les hépatocytes chargés de lipides sont inhérents à la régénération du foie, mais sont généralement perdus lors de la centrifugation par gradient de densité. Ici, nous présentons un protocole d’isolement cellulaire optimisé qui conserve les hépatocytes stéatotiques, produisant des populations représentatives d’hépatocytes en régénération après hépatectomie partielle chez la souris.

Isolement des hépatocytes régénérants après hépatectomie partielle chez la souris

Nous avons établi un modèle murin de fibrose hépatique chronique, qui fournit un modèle animal approprié pour l’étude mécaniste de la fibrose hépatique induite par le virus de l’atrésie biliaire (AB) et une plate-forme pour les futurs traitements de l’AB.

Un modèle murin de fibrose hépatique chronique pour l’étude de l’atrésie biliaire

L’objectif de cette étude était de développer un nouveau modèle numérique tridimensionnel pour le diagnostic précoce de la fibrose hépatique, qui inclut la rigidité de chaque voxel dans le foie du patient et peut donc être utilisé pour calculer le rapport de distribution du foie du patient à différents stades de la fibrose.

Un modèle numérique tridimensionnel pour le diagnostic précoce de la fibrose hépatique basé sur l’élastographie par résonance magnétique

Le modèle murin d’hépatectomie partielle de 2/3 (66 %) est bien décrit dans la littérature, mais les hépatectomies plus étendues imitant le syndrome de petite taille après une transplantation hépatique ont rarement été utilisées. Nous décrivons une procédure d’hépatectomie prolongée à 78 % dans un modèle murin qui entraîne une létalité postopératoire d’environ 50 % chez des souris saines.

Hpatectomie prolongée à 78 % dans un modèle chirurgical de souris

Modèle murin de maladie hépatique stéatotique associée à un dysfonctionnement métabolique (MASLD) avec dysfonctionnement métabolique, modifications de l’expression génique hépatique et altérations histopathologiques hépatiques ressemblant à la MASLD humaine, y compris une fibrose qui progresse vers le stade 3 de fibrose avancée. Ce modèle peut être utilisé dans les études de physiopathologie du MASLD et dans les études précliniques de nouvelles thérapies.

Modèle murin de maladie hépatique stéatotique associée à un dysfonctionnement métabolique avec fibrose

Découvrez une méthode d'imagerie 3D pour cartographier la morphologie des cellules étoilées hépatiques dans le foie intact de souris. Ce protocole combine marquage fluorescent, clarification tissulaire iDISCO et microscopie confocale pour reconstruire l'architecture cellulaire.

Cartographie de la morphologie des cellules étoilées hépatiques dans des modèles murins de fibrose hépatique

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