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<ol><li>Zhang, S., Sheng, H., Xu, B., Lao, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+external+iliac+artery+thrombosis+following+pelvic+fractures%3A+Two+case+reports%5BTitle%5D)+AND+%22Medicine+%28Baltimore%29%22%5BJournal%5D)">Acute external iliac artery thrombosis following pelvic fractures: Two case reports.</a> Medicine (Baltimore). 100 (6), e24710(2021).</li>
<li>Szczesny, G., Olszewski, W. L., Gewartowska, M., Zaleska, M., Gorecki, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+healing+of+tibial+fracture+and+response+of+the+local+lymphatic+system%5BTitle%5D)+AND+%22J+Trauma%22%5BJournal%5D)">The healing of tibial fracture and response of the local lymphatic system.</a> J Trauma. 63 (4), 849-854 (2007).</li>
<li>Zheng, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+therapy+for+fracture+healing+by+increasing+lymphatic+drainage%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Translat%22%5BJournal%5D)">A novel therapy for fracture healing by increasing lymphatic drainage.</a> J Orthop Translat. 45, 66-74 (2024).</li>
<li>Thomas, C., Le, J. T., Benson, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Managing+lymphedema+in+fracture+care%3A+Current+concepts+and+treatment+principles%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Acad+Orthop+Surg%22%5BJournal%5D)">Managing lymphedema in fracture care: Current concepts and treatment principles.</a> J Am Acad Orthop Surg. 28 (18), 737-741 (2020).</li>
<li>Jiang, X., Nicolls, M. R., Tian, W., Rockson, S. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymphatic+dysfunction%2C+leukotrienes%2C+and+lymphedema%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Physiol%22%5BJournal%5D)">Lymphatic dysfunction, leukotrienes, and lymphedema.</a> Annu Rev Physiol. 80, 49-70 (2018).</li>
<li>Biswas, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymphatic+vessels+in+bone+support+regeneration+after+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Lymphatic vessels in bone support regeneration after injury.</a> Cell. 186 (2), 382-397.e24 (2023).</li>
<li>Dimitriou, R., Tsiridis, E., Giannoudis, P. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+concepts+of+molecular+aspects+of+bone+healing%5BTitle%5D)+AND+%22Injury%22%5BJournal%5D)">Current concepts of molecular aspects of bone healing.</a> Injury. 36 (12), 1392-1404 (2005).</li>
<li>Arslan, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+lymphedema+on+the+recovery+of+fractures%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Sci%22%5BJournal%5D)">Effect of lymphedema on the recovery of fractures.</a> J Orthop Sci. 12 (6), 578-584 (2007).</li>
<li>Cheon, H., Kim, S. A., Kim, B., Jeon, J. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Investigation+of+optimizing+indocyanine+green+solution+for+in+vivo+lymphatic+research+using+near-infrared+fluorescence+indocyanine+green+lymphangiography%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Investigation of optimizing indocyanine green solution for in vivo lymphatic research using near-infrared fluorescence indocyanine green lymphangiography.</a> Sci Rep. 13 (1), 14966(2023).</li>
<li>Polomska, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Minimally+invasive+method+for+the+point-of-care+quantification+of+lymphatic+vessel+function%5BTitle%5D)+AND+%22JCI+Insight%22%5BJournal%5D)">Minimally invasive method for the point-of-care quantification of lymphatic vessel function.</a> JCI Insight. 4 (4), e126515(2019).</li>
<li>Wang, F., Weng, Y., Geng, J., Zhu, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+narrative+review+of+indocyanine+green+near-infrared+fluorescence+imaging+technique%3A+A+new+application+in+thoracic+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Challenges+Thorac+Surg%22%5BJournal%5D)">A narrative review of indocyanine green near-infrared fluorescence imaging technique: A new application in thoracic surgery.</a> Curr Challenges Thorac Surg. 3, 35-35 (2021).</li>
<li>Zheng, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymphatic+platelet+thrombosis+limits+bone+repair+by+precluding+lymphatic+transporting+damps%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Lymphatic platelet thrombosis limits bone repair by precluding lymphatic transporting damps.</a> Nat Commun. 16 (1), 829(2025).</li>
<li>Kim, K. M., Kim, K. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymphangiogenesis+after+nonvascularized+lymph+node+transplantation%3A+Lymphangiographic+findings+in+mice+and+minipigs%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Lymphangiogenesis after nonvascularized lymph node transplantation: Lymphangiographic findings in mice and minipigs.</a> PLoS One. 18 (12), e0295836(2023).</li>
<li>Zhang, P. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+pulmonary+lymphatic+drainage+is+necessary+for+inflammation+resolution+in+ARDS%5BTitle%5D)+AND+%22JCI+Insight%22%5BJournal%5D)">Efficient pulmonary lymphatic drainage is necessary for inflammation resolution in ARDS.</a> JCI Insight. 9 (1), e173440(2024).</li>
<li>Kenney, H. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Persistent+popliteal+lymphatic+muscle+cell+coverage+defects+despite+amelioration+of+arthritis+and+recovery+of+popliteal+lymphatic+vessel+function+in+TNF-TG+mice+following+anti-TNF+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Persistent popliteal lymphatic muscle cell coverage defects despite amelioration of arthritis and recovery of popliteal lymphatic vessel function in TNF-TG mice following anti-TNF therapy.</a> Sci Rep. 12 (1), 12751(2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>10 Microliter Microsyringe</td><td>Hamilton Company</td><td>80330/00</td><td>La microseringue Hamilton 80330/00 est un instrument de précision avec une capacité de 10<img alt="Équation 1" src="/files/ftp_upload/70466/70466eq1.jpg" style="margin: auto;"/>L, dotée d'une aiguille de calibre 26s, d'une longueur de 51 mm et d'un style de point 2. Elle est conçue pour une distribution précise de petits volumes dans les applications de chromatographie, d'injection d'échantillons et de chimie analytique.</td></tr><tr><td>3D Ultrasound Vevo 3100 Imaging System</td><td></td><td>Vevo 2100</td><td>Le Vevo 2100 est un système d'imagerie par ultrasons haute fréquence pour la recherche préclinique, offrant une visualisation 3D en temps réel des petits animaux. Il offre une résolution supérieure pour les études cardiovasculaires, oncologiques et de biologie du développement, intégrée au logiciel Vevo LAB pour l'analyse des données.</td></tr><tr><td>75% Ethanol</td><td>Shanghai Titan Scientific Co., Ltd.</td><td>G73537O</td><td>L'éthanol à 75% est une solution désinfectante largement utilisée dans les laboratoires pour la stérilisation des surfaces, le nettoyage des équipements et l'antisepsie. Il tue efficacement les bactéries, les virus et les champignons par dénaturation des protéines et est couramment utilisé dans les milieux biologiques et cliniques.</td></tr><tr><td>Cotton Swab</td><td>Hebei Kangji Medical Equipment Co., Ltd.</td><td>20250303</td><td>Les tampons en coton sont des applicateurs stériles et absorbants utilisés pour la collecte précise d'échantillons, l'application de solutions ou le nettoyage dans les procédures médicales, diagnostiques et de laboratoire. Ils comportent des bâtonnets en bois ou en plastique avec des embouts en coton pour une manipulation hygiénique.</td></tr><tr><td>Coupling Agent</td><td>Tianjin Jinya Technology Development Co., Ltd.</td><td>20241029</td><td>L'agent de couplage, communément appelé gel pour ultrasons, est un milieu à base d'eau utilisé pour améliorer la transmission acoustique entre le transducteur à ultrasons et la peau. Il élimine les poches d'air pour une imagerie claire, est non irritant et fourni dans un contenant de 250 mL pour un usage médical et diagnostique.</td></tr><tr><td>Graphpad Prism</td><td>GraphPad Software</td><td>Prism 10</td><td>Un logiciel de graphiques scientifiques et d'analyse statistique utilisé pour l'analyse, la visualisation et la présentation des données.</td></tr><tr><td>Image J</td><td>National Institutes of Health</td><td>ImageJ 1.54d</td><td>Un programme d'analyse et de traitement d'images basé sur Java et de domaine public, largement utilisé pour l'analyse d'images biologiques et médicales.</td></tr><tr><td>indocyanine green</td><td>Dandong Yichuang Pharmaceutical Co., Ltd.</td><td>8305128</td><td>L'indocyanine verte est un colorant anionique hydrosoluble utilisé dans les diagnostics médicaux pour déterminer le débit cardiaque, la fonction hépatique, le flux sanguin hépatique et l'angiographie ophtalmique. Il est fourni en flacons de 25 mg pour une administration intraveineuse et présente une fluorescence dans le spectre proche infrarouge à des fins d'imagerie.</td></tr><tr><td>isoflurance&nbsp;</td><td>RWD&nbsp;</td><td>R650-IE</td><td>L'isoflurane est un anesthésique général inhalé. Il a un petit coefficient de partage sang/gaz. Lorsqu'il est utilisé pour l'anesthésie animale, il peut induire une anesthésie en douceur, rapidement et confortablement, avec un rétablissement rapide, une bonne relaxation musculaire et aucun effet excitateur sur le système nerveux sympathique. Le taux métabolique de l'isoflurane dans le foie est faible, il a donc peu de toxicité pour le foie, et il n'y a pas d'effets secondaires évidents même en cas d'utilisation répétée. Pour éviter les effets néfastes des gaz anesthésiques sur l'environnement et le personnel de laboratoire, il est recommandé de l'utiliser avec un système de récupération des gaz.&nbsp;</td></tr><tr><td>Microbalance</td><td>Shanghai Precision Scientific Instrument Co., Ltd.</td><td>FA1004B</td><td>La microbalance FA1004B est un instrument analytique de haute précision conçu pour la pesée précise de petits échantillons, offrant une lisibilité jusqu'à 0,0001 g et adaptée aux applications de laboratoire nécessitant des mesures précises dans la recherche et le contrôle de qualité.</td></tr><tr><td>Near-Infrared Imaging System</td><td>Olympus</td><td>MVX10</td><td>Le MVX10 d'Olympus est un système de microscope à fluorescence macro zoom optimisé pour l'imagerie proche infrarouge. Il offre une visualisation haute résolution de grands spécimens avec une large plage de zoom, une optique avancée pour une pénétration profonde des tissus et une compatibilité avec les techniques de fluorescence en recherche biologique et sur les matériaux.</td></tr><tr><td>Vevo lab</td><td>\</td><td>Vevo LAB</td><td>Un progiciel d'analyse d'image utilisé pour l'analyse des données d'imagerie Vevo, y compris la mesure, le calcul et la génération de rapports.</td></tr></tbody></table>

l’évaluation du drainage lymphatique à l’aide de l’imagerie icg dans le proche infrarouge et de l’échographie après fracture

The Assessment of Lymphatic Drainage Using ICG Near-Infrared Imaging and Ultrasound After Fracture

L’évaluation du drainage lymphatique à l’aide de l’imagerie ICG dans le proche infrarouge et de l’échographie après fracture

Traumatic fractures are often accompanied by impaired lymphatic drainage function. Reduced lymphatic drainage and lymph node enlargement after fracture ...

Notre recherche évalue le reflux lymphatique après des fractures en utilisant l'imagerie proche infrarouge et l'échographie de type B pour surveiller le drainage, la fonction et le gonflement des ganglions lymphatiques. Les méthodes existantes manquent d'une évaluation dynamique normalisée in vivo, c'est pourquoi notre protocole compare l'imagerie proche infrarouge à l'indocyanine verte avec l'échographie afin d'assurer une surveillance reproductible. Commencez par peser 0,2 milligramme d'indocyanine verte, ou ICG.Transférez-le dans un tube microcentrifuge de 1,5 millilitre et dissolvez-le dans un millilitre de PBS afin de préparer une solution de ICG à 0,2 milligramme par millilitre. Enveloppez le tube avec du papier d’aluminium pour le protéger de la lumière. Ensuite, allumez le système d’imagerie et ouvrez FluoBeam version 1.46.Réglez la hauteur de la caméra selon les besoins. Après avoir anesthésié les souris mâles C57 présentant un modèle de fracture, humidifiez un coton-tige avec de l’éthanol à 75 % et désinfectez la surface plantaire de la patte arrière modélisée. À l’aide d’une microseringue de 10 microlitres, aspirez six microlitres de la solution de ICG.Insérez l'aiguille d'environ un millimètre dans la surface plantaire et injectez la solution à un débit constant jusqu'à ce que le volume total soit administré. Dans le logiciel, activez les fonctions Caméra et Laser. Cliquez sur Modifier pour créer un nouveau dossier et définissez-le comme répertoire de sauvegarde.Placer la souris sous la caméra en position prona avec le membre postérieur modélisé centré dans le champ de vision. Régler le temps d'exposition à 30 millisecondes pour les images à zéro et à 24 heures. Acquérir des images de la même région d'intérêt correspondant à l'injection plantaire à zéro et 24 heures après l'injection afin de mesurer l'intensité du signal ICG.Lorsque les vaisseaux lymphatiques de la patte postérieure sont clairement visibles dans le champ de vision, cliquez sur Photo pour capturer les images. Après l'acquisition des images, exportez les données. Ouvrez le logiciel d'analyse d'image et importez les images de fluorescence en cliquant sur Fichier puis en sélectionnant Ouvrir.Ouvrez l'image plantaire à l'heure zéro correspondant au même animal et au même jour d'examen. Ensuite, sélectionnez Ovale, cliquez sur Éditer, choisissez Sélection, puis sélectionnez Spécifier. Réglez la Largeur et la Hauteur sur 30, choisissez ensuite Ovale, puis cliquez sur OK. Placez le cercle sur une zone de fond.Cliquez sur Analyser et sélectionnez Mesurer. Enregistrez la valeur moyenne dans la fenêtre Résultats comme intensité de fluorescence du fond à zéro heure. Placez ensuite le cercle sur le site d'observation cible et enregistrez la valeur moyenne comme indiqué précédemment.Calculez l'intensité de fluorescence corrigée à zéro heure comme FI0 heure. Ouvrez l'image correspondante à 24 heures et répétez les étapes précédentes pour obtenir l'intensité de fluorescence corrigée à 24 heures. Calculez le taux d'élimination en utilisant l'intensité de fluorescence corrigée du fond comme indiqué ici.Allumez le système d'échographie, connectez le transducteur, puis positionnez la souris de manière à visualiser clairement le membre postérieur. Sous anesthésie continue, placez la souris en position prona sur la plateforme d'imagerie, la tête orientée vers l'opérateur et la queue vers l'opérateur. Fléchissez le genou afin que la fosse poplitée soit orientée vers le haut et légèrement en latéral.Maintenant, positionnez le transducteur au-dessus de la dépression de la fosse poplitée. Appliquez du gel de couplage à ultrasons sur le membre postérieur modélisé et faites pivoter le transducteur de manière à ce que son angle reste parallèle à l'axe longitudinal du membre postérieur. Réglez la Distance de balayage sur quatre millimètres et la Taille du pas sur 0,04 millimètre.Repérez le ganglion lymphatique poplité sur l'image en fonction de sa localisation anatomique. Stabilisez la souris en tenant la queue et le membre postérieur modélisé avec les deux mains, en évitant tout mouvement pendant le balayage par le transducteur. Acquérez les images et identifiez le ganglion lymphatique poplité comme une structure petite, ovale ou en forme de haricot, présentant une échogénicité intermédiaire à faible.Exporter les images vers le logiciel de reconstruction tridimensionnelle pour le traitement d'images en trois dimensions. Enregistrer l'identification de l'animal, le code du groupe et le point temporel à zéro heure ou 24 heures. Ouvrir le logiciel de reconstruction tridimensionnelle.Cliquez sur Étude pour accéder au module et sélectionnez Importer. Ensuite, cliquez sur le dossier de données, cochez les données à importer, puis double-cliquez pour l'ouvrir. En mode Affichage, sélectionnez Traitement d'image.Ensuite, choisissez Charger dans 3D. Sélectionnez la vue transversale. Choisissez Mesure du volume et cliquez sur Démarrer.Vérifiez que l'orientation des coupes et les paramètres de pas sont compatibles avec les paramètres d'acquisition. Utilisez ensuite la molette de la souris ou le curseur de coupe pour parcourir de l'extrémité proximale à l'extrémité distale et identifiez la première coupe dans laquelle le ganglion lymphatique poplité apparaît. Commencez le tracé sur la première coupe où apparaît le ganglion lymphatique poplité en cliquant avec le bouton gauche pour démarrer le contour.Tracez point par point un contour fermé le long du bord du ganglion lymphatique, en restant proche de la capsule externe et en excluant la graisse environnante et la lumière vasculaire. Utilisez la molette de la souris pour passer à la coupe montrant la surface transversale maximale du ganglion lymphatique poplité, puis répétez l'étape précédente de traçage du contour afin de compléter le deuxième contour. Ensuite, rendez-vous sur la coupe juste antérieure à la disparition du ganglion lymphatique poplité et répétez l'étape de traçage du contour pour compléter le troisième contour.Ensuite, cliquez sur Terminer pour générer le volume segmenté tridimensionnel et obtenir la mesure du volume. Enregistrez le volume du ganglion lymphatique poplité en millimètres cubes dans le panneau Résultats. Dans le panneau Résultats des mesures, sélectionnez Exporter, puis exportez les résultats sous forme de fichier CSV ou XLS.Sélectionnez le type de fichier et exportez l'image en tant que zone d'image TIFF. À la fin de l'expérience, placez la souris sur un coussin chauffant et laissez-la se remettre de l'anesthésie. Aux jours un, sept et quatorze après la mise en place du modèle de fracture, l'intensité de fluorescence ICG plantaire sur 24 heures a été constamment plus élevée dans le groupe fracture que dans le groupe chirurgie factice.Le taux d'élimination lymphatique de l'ICG dans le groupe fracture était significativement inférieur à celui du groupe chirurgie factice. Le volume des ganglions lymphatiques poplités chez les souris du groupe fracture était significativement plus élevé que dans le groupe témoin aux jours un, sept et quatorze. Ce protocole mesure l'efficacité du drainage lymphatique et l'augmentation du volume du ganglion lymphatique poplité après fracture chez la souris.Le défi principal consiste à maintenir des paramètres d'imagerie constants, une précision du positionnement de l'injection et une stabilité du positionnement de la lampe pendant l'échographie. De futures études pourront combiner des marqueurs immunologiques et l'histologie afin de valider les mécanismes lymphatiques durant la cicatrisation osseuse.

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