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<table><tbody><tr><td>Amphotericin B</td><td>Gibco (Thermo Fisher Scientific)</td><td>15290018</td><td>Concentration finale :&nbsp;1,25&nbsp;&mu;g/mL</td></tr><tr><td>Sérum autologue, lapin (AS)</td><td>Prêt en interne</td><td>-</td><td>Prêt à partir de sang total; filtré par un filtre de&nbsp;0,22 &mu;m&nbsp;PES</td></tr><tr><td>Lampe de durcissement LED bleue</td><td>Woodpecker Medical Instrument Co</td><td>Modèle LED.C</td><td>Longueur d'onde:&nbsp;&lambda;=420&ndash;480&nbsp;nm; Distance:&nbsp;1&ndash;2&nbsp;cm; Puissance lumineuse: 850-1000 mW/cm2</td></tr><tr><td>Buprénorphine (Buprecare)</td><td>Ecuphar</td><td>578950</td><td>Dose:&nbsp;0,05&nbsp;mg/kg, injection sous-cutanée toutes les&nbsp;12&nbsp;h&nbsp;pendant&nbsp;72&nbsp;h</td></tr><tr><td>Caméra</td><td>Panasonic</td><td>LUMIX TZ35</td><td>Caméra équipée d'optique Leica</td></tr><tr><td>Plateau de chauffage à agitation numérique Cimarec</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>SP131320-33</td><td>220-240 V, Température max: 540 &deg;C</td></tr><tr><td>Lame microchirurgicale en croissant</td><td>BVI Medical</td><td>373807</td><td>-</td></tr><tr><td>DMEM (milieu de Dulbecco modifié par Eagle)</td><td>Gibco (Thermo Fisher Scientific)</td><td>11966025</td><td>-</td></tr><tr><td>Tubes Eppendorf (0,2 mL)</td><td>Merck KGaA</td><td>30124707</td><td>Conservés au froid pour la préparation du HAMe; aliquotage</td></tr><tr><td>Tubes Eppendorf (5 mL)</td><td>Merck KGaA</td><td>30119606</td><td>Conservés au froid pour la préparation du HAMe; aliquotage</td></tr><tr><td>Solution de fluorescéine&nbsp;</td><td>Novartis</td><td>Colorcusi Fluotest</td><td>Solution de Fluorescein à 2 %, gouttes pour les yeux de 5 &micro;l</td></tr><tr><td>Gibco Néomycine</td><td>Merck KGaA</td><td>N1142</td><td>Concentration finale:&nbsp;50&nbsp;&mu;g/mL</td></tr><tr><td>Poudre de gélatine</td><td>Sigma Aldrich</td><td>G1890</td><td>Dissoute à&nbsp;80 &deg;C; pH ajusté à 7,0</td></tr><tr><td>Larmes artificielles à l'acide hyaluronique (0,2 %)</td><td>Chem.-pharm. Fabrik GmbH</td><td>Hylo-Tear</td><td>-</td></tr><tr><td>Logiciel de traitement d'image ImageJ</td><td>Institut national de la santé mentale</td><td>-</td><td>Développé par Wayne Rasband à la Direction des services de recherche</td></tr><tr><td>Kétamines (Ketolar)</td><td>Pfizer</td><td>631028.1</td><td></td></tr><tr><td>Lidocaïne</td><td>Vet One</td><td>NDC 13985-222-04</td><td>Injection topique ou sous-cutanée</td></tr><tr><td>Pénicilline-streptomycine</td><td>Gibco (Thermo Fisher Scientific)</td><td>15140-122</td><td>Concentration finale:&nbsp;50&nbsp;&mu;g/mL</td></tr><tr><td>Filtres de seringue PES,&nbsp;0,22&thinsp;&mu;m0,22&mu;m&nbsp;(Millex)</td><td>Merck KGaA</td><td>SLGP033RS</td><td>-</td></tr><tr><td>Tampon de phosphate de sodium (PBS)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P4417-100TAB</td><td>-</td></tr><tr><td>Cocktail d'inhibiteurs de protéase</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P8340</td><td>Ajouté à la quantité de&nbsp;5&nbsp;&mu;L&nbsp;par&nbsp;mg&nbsp;de tissu</td></tr><tr><td>Solution de bétadine</td><td>Meda pharma</td><td>7167204</td><td>Désinfection préopératoire</td></tr><tr><td>Phosphate de riboflavine (RFP)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>R0630000</td><td>Concentration:&nbsp;0,01%&nbsp;p/v&nbsp;(finale);&nbsp;0,02%&nbsp;p/v&nbsp;(stock)</td></tr><tr><td>Sonicateur</td><td>Bandelein electronic</td><td>Sonoplus GM mini20</td><td>-</td></tr><tr><td>Sonde de sonicateur</td><td>Bandelein electronic</td><td>MS 1.5</td><td>Sonde de 1,5 mm de diamètre, 63 mm de longueur.</td></tr><tr><td>Sutures de tarsorraphie (non absorbables)</td><td>Alcon&nbsp;</td><td>8065308001</td><td>1&ndash;2 sutures selon les besoins</td></tr><tr><td>Solution ophtalmique de tobramycine (3 mg/mL)</td><td>Novartis</td><td>Tobrex</td><td>Dosage: deux fois par jour jusqu'à la fermeture</td></tr><tr><td>Tréphine Hessburg-Barron, diamètre de 6,5&nbsp;mm</td><td>Jedmed</td><td>21-8265</td><td>-</td></tr><tr><td>Tubes Vacutainer de prélèvement sanguin avec séparateur de gel polymère</td><td>BD (Becton, Dickinson and Company)</td><td>367704</td><td>-</td></tr><tr><td>Solution de xylazine</td><td>Laboratorios Calier SA</td><td>Xylagesic</td><td>Dose:&nbsp;5&nbsp;mg/kg&nbsp;injection intramusculaire</td></tr></tbody></table>

fabrication et application chirurgicale d’hydrogels enrichis photo-reticulés gélatine-riboflavine pour la réparation des plaies cornéennes chez les lapins

Fabrication and Surgical Application of Enriched Photo-crosslinked Gelatin&#8211;Riboflavin Hydrogels for Corneal Wound Repair in Rabbits

Fabrication et application chirurgicale d’hydrogels enrichis photo-reticulés gélatine-riboflavine pour la réparation des plaies cornéennes chez les lapins

This article presents a step&#8209;by&#8209;step protocol to fabricate, supplement, and surgically apply an in situ blue&#8209;light&#8211;crosslinkable ...

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Research

Recherche

JoVE Journal

Bioengineering

Bioingénierie

Nous rapportons une technique pour la fabrication de micropoches dans les membranes électrofilées dans lequel étudient le comportement des cellules. Plus précisément, nous décrivons une combinaison de microstéréolithographie électrofilage et pour la production de PLGA (poly (lactide-co-glycolide)), des dispositifs de biomatériaux équipés de micro-caractéristiques de la cornée.

Combinaison de Microstéréolithographie et Électrofilage à produire des membranes Equipé Niches pour la régénération de la cornée

La réticulation du collagène cornéen (CXL) est le seul traitement conservateur actuellement disponible pour arrêter la progression du kératocône en améliorant la rigidité biomécanique du stroma cornéen. L’objectif de ce manuscrit est de mettre en évidence les méthodes de trois protocoles différents de CXL : le CXL CONVENTIONNEL (C-CXL), le CXL ACCÉLÉRÉ (A-CXL) et l’ionophorèse CXL (I-CXL).

Trois différents protocoles de réticulation du collagène cornéen dans kératocône: conventionnel, accélérée et Iontophorèse

On démontre l'effet de la réticulation scléral avec la riboflavine et des UVA sur un oeil de lapin élongation axiale. allongement axial a été induite chez 13 jours d'âge des lapins de Nouvelle-Zélande (mâle et femelle) en suturant les paupières de l'oeil droite (tarsorraphie).

Scléral Cross-linking Utilisation de la riboflavine et Ultraviolet-A rayonnement pour la prévention des Axial Myopie dans un modèle de lapin

Ce protocole décrit les techniques d’évaluation de réticulation chimique de la sclérotique de lapin à l’aide de l’imagerie de la génération de seconde harmonique et calorimétrie différentielle à balayage.

Deuxième génération d’harmoniques signaux dans la sclérotique de lapin comme un outil pour l’évaluation des thérapeutiques tissulaires réticulation (TXL) pour la myopie

Un protocole pour un ancien modèle de culture de cornée orgue vivo utile pour la cicatrisation des études est exposée. Ce système de modèle peut servir à évaluer les effets des agents pour favoriser la guérison régénératrice ou toxicité des médicaments dans un environnement 3D organisé de multicellulaire.

Ex Vivo, modèle de Culture d’organes cornéenne pour la cicatrisation des études

Ici, des modèles animaux basés sur la souris et le lapin sont développés pour les lésions mécaniques et chimiques de l’épithélium cornéen afin de cribler de nouveaux traitements et le mécanisme sous-jacent.

Modèles animaux ex vivo et in vivo pour les lésions mécaniques et chimiques de l’épithélium cornéen

Cet article décrit un nouveau modèle animal développé pour étudier l’anatomie et l’histologie de la cornée et ses processus de guérison. Ce nouveau modèle animal utilise la gerbille de Mongolie, qui a une cornée présentant de nombreuses similitudes avec la cornée humaine.

Les gerbilles de Mongolie comme modèle animal de cicatrisation des plaies

Le Stripping Only de Descemet est une procédure expérimentale dans laquelle les patients atteints de guttase cornéenne centrale résultant d’une dystrophie cornéenne endothéliale de Fuchs ont la membrane de Descemet dépouillée pour que les cellules périphériques régénèrent la couche endothéliale. Nous présentons une nouvelle méthodologie simulant le DSO dans les cornées humaines dystrophiques ex vivo avec une guérison accélérée stimulée par eFGF1 (NM141).

Un modèle de culture d’organes cornéens humains du décapage de Descemet uniquement avec une guérison accélérée stimulée par le facteur de croissance des fibroblastes 1

Le présent protocole décrit l’extraction du lumican de la membrane amniotique (AM) et leurs conditions de stockage sous forme d’extrait de MA (AME) à -20 °C, 4 °C et à température ambiante (RT) pendant 6, 12, 20 et 32 jours pour quantifier ses protéines et sa concentration en lumicane.

Extraction de lumican à partir d’une membrane amniotique et détermination de sa température de stockage

Le protocole présenté ici montre la synthèse d’un hydrogel adhésif fort gélatine o-nitrosobenzaldéhyde (gélatine-NB). La gélatine-NB a une capacité d’adhérence tissulaire rapide et efficace, qui peut former une barrière physique solide pour protéger les surfaces des plaies, de sorte qu’elle devrait être appliquée au domaine de la biotechnologie de réparation des blessures.

Synthèse d’hydrogel adhésif fort, de gélatine O-nitrosobenzaldéhyde

La fraction vasculaire stromale (SVF) isolée mécaniquement associée à un hydrogel de fibrine offre un support facile et efficace pour des cellules stromales viables dérivées du tissu adipeux pour diverses indications, y compris l’ingénierie tissulaire et/ou la cicatrisation des plaies. Ici, nous présentons la préparation d’une construction mécanique d’hydrogel SVF (mSVF)-fibrine pour la recherche translationnelle et l’application clinique.

La combinaison d’une fraction vasculaire stromale isolée mécaniquement et d’un hydrogel de fibrine : un protocole de traitement

University of the Basque Country UPV/EHU.  Un protocole reproductible est présenté pour la préparation, l’enrichissement et l’application d’un hydrogel in situ à lumière bleue-réticule gélatine-riboflavine pour la réparation de la plaie stromale cornéenne chez les lapins, incluant des étapes procédurales pour la manipulation chirurgicale, la tarsorrhafie partielle et les soins postopératoires.

Fabrication et application chirurgicale d’hydrogels enrichis photo-reticulés gélatine-riboflavine pour la réparation des plaies cornéennes chez les lapins

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