Name: Détection de la sénescence à l’aide de la lumière réfléchie dans la fraction vasculaire stromale adipeuse (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-06-05T13:15:00.000+00:00
Duration: 10 min 8 s
Description: Découvrez une méthode de microscopie confocale en lumière réfléchie pour détecter quantitativement la sénescence dans les cellules SVF humaines. Cette approche permet une analyse objective à cellule unique et le multiplexage d'immunocytochimie.

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<ol><li>Wang, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Senescent+human+fibroblasts+resist+programmed+cell+death%2C+and+failure+to+suppress+bcl2+is+involved%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Senescent human fibroblasts resist programmed cell death, and failure to suppress bcl2 is involved.</a> Cancer Res. 55 (10), 2284-2292 (1995).</li>
<li>Yosef, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Directed+elimination+of+senescent+cells+by+inhibition+of+BCL-W+and+BCL-XL%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Directed elimination of senescent cells by inhibition of BCL-W and BCL-XL.</a> Nat Commun. 7 (1), 11190(2016).</li>
<li>Jun, J. -I., Lau, L. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+matricellular+protein+CCN1+induces+fibroblast+senescence+and+restricts+fibrosis+in+cutaneous+wound+healing%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">The matricellular protein CCN1 induces fibroblast senescence and restricts fibrosis in cutaneous wound healing.</a> Nat Cell Biol. 12 (7), 676-685 (2010).</li>
<li>Krizhanovsky, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Senescence+of+activated+stellate+cells+limits+liver+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Senescence of activated stellate cells limits liver fibrosis.</a> Cell. 134 (4), 657-667 (2008).</li>
<li>Storer, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Senescence+is+a+developmental+mechanism+that+contributes+to+embryonic+growth+and+patterning%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Senescence is a developmental mechanism that contributes to embryonic growth and patterning.</a> Cell. 155 (5), 1119-1130 (2013).</li>
<li>Muñoz-Espín, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Programmed+cell+senescence+during+mammalian+embryonic+development%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Programmed cell senescence during mammalian embryonic development.</a> Cell. 155 (5), 1104-1118 (2013).</li>
<li>Eggert, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+functions+of+senescence-associated+immune+responses+in+liver+tumor+surveillance+and+tumor+progression%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell%22%5BJournal%5D)">Distinct functions of senescence-associated immune responses in liver tumor surveillance and tumor progression.</a> Cancer Cell. 30 (4), 533-547 (2016).</li>
<li>Feldser, D. M., Greider, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short+telomeres+limit+tumor+progression+in+vivo+by+inducing+senescence%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell%22%5BJournal%5D)">Short telomeres limit tumor progression in vivo by inducing senescence.</a> Cancer Cell. 11 (5), 461-469 (2007).</li>
<li>Xue, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Senescence+and+tumour+clearance+is+triggered+by+p53+restoration+in+murine+liver+carcinomas%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Senescence and tumour clearance is triggered by p53 restoration in murine liver carcinomas.</a> Nature. 445 (7128), 656-660 (2007).</li>
<li>Acosta, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+complex+secretory+program+orchestrated+by+the+inflammasome+controls+paracrine+senescence%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">A complex secretory program orchestrated by the inflammasome controls paracrine senescence.</a> Nat Cell Biol. 15 (8), 978-990 (2013).</li>
<li>Coppé, J. -P., Desprez, P. -Y., Krtolica, A., Campisi, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+senescence-associated+secretory+phenotype%3A+the+dark+side+of+tumor+suppression%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Pathol+Mech+Dis%22%5BJournal%5D)">The senescence-associated secretory phenotype: the dark side of tumor suppression.</a> Annu Rev Pathol Mech Dis. 5 (1), 99-118 (2010).</li>
<li>Xu, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+senescent+cells+enhances+adipogenesis+and+metabolic+function+in+old+age%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Targeting senescent cells enhances adipogenesis and metabolic function in old age.</a> eLife. 4 (1), e12997(2015).</li>
<li>Xu, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Senolytics+improve+physical+function+and+increase+lifespan+in+old+age%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">Senolytics improve physical function and increase lifespan in old age.</a> Nat Med. 24 (8), 1246-1256 (2018).</li>
<li>Li, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FBP1+loss+disrupts+liver+metabolism+and+promotes+tumorigenesis+through+a+hepatic+stellate+cell+senescence+secretome%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">FBP1 loss disrupts liver metabolism and promotes tumorigenesis through a hepatic stellate cell senescence secretome.</a> Nat Cell Biol. 22 (6), 728-739 (2020).</li>
<li>Yoshimoto, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Obesity-induced+gut+microbial+metabolite+promotes+liver+cancer+through+senescence+secretome%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Obesity-induced gut microbial metabolite promotes liver cancer through senescence secretome.</a> Nature. 499 (7456), 97-101 (2013).</li>
<li>Aravinthan, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hepatocyte+senescence+predicts+progression+in+non-alcohol-related+fatty+liver+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Hepatocyte senescence predicts progression in non-alcohol-related fatty liver disease.</a> J Hepatol. 58 (3), 549-556 (2013).</li>
<li>Baboota, R. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((BMP4+and+Gremlin+1+regulate+hepatic+cell+senescence+during+clinical+progression+of+NAFLD%2FNASH%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Metab%22%5BJournal%5D)">BMP4 and Gremlin 1 regulate hepatic cell senescence during clinical progression of NAFLD/NASH.</a> Nat Metab. 4 (8), 1007-1021 (2022).</li>
<li>Chen, Y. -W., Harris, R. A., Hatahet, Z., Chou, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ablation+of+XP-V+gene+causes+adipose+tissue+senescence+and+metabolic+abnormalities%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Ablation of XP-V gene causes adipose tissue senescence and metabolic abnormalities.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 112 (45), E4556-E4564 (2015).</li>
<li>Gustafson, B., Nerstedt, A., Spinelli, R., Beguinot, F., Smith, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Type+2+diabetes%2C+independent+of+obesity+and+age%2C+is+characterized+by+senescent+and+dysfunctional+mature+human+adipose+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Type 2 diabetes, independent of obesity and age, is characterized by senescent and dysfunctional mature human adipose cells.</a> Diabetes. 71 (11), 2372-2383 (2022).</li>
<li>Li, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Obesity+and+hyperinsulinemia+drive+adipocytes+to+activate+a+cell+cycle+program+and+senesce%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">Obesity and hyperinsulinemia drive adipocytes to activate a cell cycle program and senesce.</a> Nat Med. 27 (11), 1941-1953 (2021).</li>
<li>Minamino, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+crucial+role+for+adipose+tissue+p53+in+the+regulation+of+insulin+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">A crucial role for adipose tissue p53 in the regulation of insulin resistance.</a> Nat Med. 15 (9), 1082-1087 (2009).</li>
<li>Shi, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photoactivatable+senolysis+with+single-cell+resolution+delays+aging%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Aging%22%5BJournal%5D)">Photoactivatable senolysis with single-cell resolution delays aging.</a> Nat Aging. 3 (3), 297-312 (2023).</li>
<li>Dimri, G. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+biomarker+that+identifies+senescent+human+cells+in+culture+and+in+aging+skin+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">A biomarker that identifies senescent human cells in culture and in aging skin in vivo.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 92 (20), 9363-9367 (1995).</li>
<li>Horwitz, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Substrates+for+cytochemical+demonstration+of+enzyme+activity%3AI.+some+substituted+3-indolyl-%CE%B2-D-glycopyranosides1a%5BTitle%5D)+AND+%22J+Med+Chem%22%5BJournal%5D)">Substrates for cytochemical demonstration of enzyme activity:I. some substituted 3-indolyl-β-D-glycopyranosides1a.</a> J Med Chem. 7 (5), 574-575 (1964).</li>
<li>Lv, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+engineering+development+of+%CE%B2-galactosidase-activatable+fluorogenic+probes+for+precise+senescence+tracking+in+cells%2C+tissues+and+a+mouse+model+of+psoriasis%5BTitle%5D)+AND+%22Sens+Actuators+B+Chem%22%5BJournal%5D)">Molecular engineering development of β-galactosidase-activatable fluorogenic probes for precise senescence tracking in cells, tissues and a mouse model of psoriasis.</a> Sens Actuators B Chem. 444 (1), 138406(2025).</li>
<li>Dedic, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Senescence+detection+using+reflected+light%5BTitle%5D)+AND+%22Aging+Cell%22%5BJournal%5D)">Senescence detection using reflected light.</a> Aging Cell. 23 (1), e14295(2024).</li>
<li>Alcorta, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Involvement+of+the+cyclin-dependent+kinase+inhibitor+p16+%28INK4a%29+in+replicative+senescence+of+normal+human+fibroblasts%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Involvement of the cyclin-dependent kinase inhibitor p16 (INK4a) in replicative senescence of normal human fibroblasts.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 93 (24), 13742-13747 (1996).</li>
<li>Hara, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+p16CDKN2+expression+and+its+implications+for+cell+immortalization+and+senescence%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Regulation of p16CDKN2 expression and its implications for cell immortalization and senescence.</a> Mol Cell Biol. 16 (3), 859-867 (1996).</li>
<li>Lin, A. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Premature+senescence+involving+p53+and+p16+is+activated+in+response+to+constitutive+MEK%2FMAPK+mitogenic+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Dev%22%5BJournal%5D)">Premature senescence involving p53 and p16 is activated in response to constitutive MEK/MAPK mitogenic signaling.</a> Genes Dev. 12 (19), 3008-3019 (1998).</li>
<li>Okamoto, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mutations+and+altered+expression+of+p16INK4+in+human+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Mutations and altered expression of p16INK4 in human cancer.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 91 (23), 11045-11049 (1994).</li>
<li>Serrano, M., Hannon, G. J., Beach, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+regulatory+motif+in+cell-cycle+control+causing+specific+inhibition+of+cyclin+D%2FCDK4%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A new regulatory motif in cell-cycle control causing specific inhibition of cyclin D/CDK4.</a> Nature. 366 (6456), 704-707 (1993).</li>
<li>Serrano, M., Lin, A. W., McCurrach, M. E., Beach, D., Lowe, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oncogenic+ras+provokes+premature+cell+senescence+associated+with+accumulation+of+p53+and+p16INK4a%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Oncogenic ras provokes premature cell senescence associated with accumulation of p53 and p16INK4a.</a> Cell. 88 (5), 593-602 (1997).</li>
<li>Wong, H., Riabowol, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+CDK-inhibitor+gene+expression+in+aging+human+diploid+fibroblasts%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Gerontol%22%5BJournal%5D)">Differential CDK-inhibitor gene expression in aging human diploid fibroblasts.</a> Exp Gerontol. 31 (3), 311-325 (1996).</li>
<li>Gustafson, B., Nerstedt, A., Smith, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reduced+subcutaneous+adipogenesis+in+human+hypertrophic+obesity+is+linked+to+senescent+precursor+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Reduced subcutaneous adipogenesis in human hypertrophic obesity is linked to senescent precursor cells.</a> Nat Commun. 10 (1), 2757(2019).</li>
<li>Barinda, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+progeria+induces+adipose+tissue+senescence+and+impairs+insulin+sensitivity+through+senescence+associated+secretory+phenotype%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Endothelial progeria induces adipose tissue senescence and impairs insulin sensitivity through senescence associated secretory phenotype.</a> Nat Commun. 11 (1), 481(2020).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1.5 mL tubes</td><td>BioSphere</td><td>72.706.200</td><td>Biosphere safeseal tube 1.5 mL, 250 PC</td></tr><tr><td>5 mL tubes</td><td>Eppendorf</td><td>30119401</td><td>Eppendorf&nbsp;tubes&nbsp;5.0&nbsp;mL microtube</td></tr><tr><td>96-well plate</td><td>Corning</td><td>4680</td><td>Corning 96-well high content ccreening microplates with film bottom</td></tr><tr><td>CD31 primary antibody</td><td>Abcam</td><td>Ab9498</td><td>Anti-CD31 antibody clone JC/70A</td></tr><tr><td>Confocal microscope with reflected light capabilities</td><td>Evident</td><td>FV-4000</td><td></td></tr><tr><td>Coverslips</td><td>Epredia</td><td>BB02400500A113MNZO</td><td>Coverslips 24 mm x 50 mm, #1.5 thickness (0.13-0.16 mm)&nbsp;</td></tr><tr><td>DPBS</td><td>Gibco</td><td>14190-136</td><td>DPBS, no calcium, no magnesium</td></tr><tr><td>Fixation buffer</td><td>Sigma Aldrich</td><td>1.00496.5000</td><td>Formaldehyde solution 4%, buffered, pH 6.9&nbsp;</td></tr><tr><td>HCl</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>320331-500mL</td><td>Hydrochloric acid (37%)</td></tr><tr><td>Incubator</td><td>Stuart</td><td>S130H</td><td>Hybridization oven/shaker</td></tr><tr><td>Microscopy slides</td><td>Avantor VWR</td><td>631-1560</td><td>Single-frosted slides, coloured ends</td></tr><tr><td>Mounting media</td><td>Invitrogen</td><td>P36984</td><td>ProLong glass antifade mountant excitation/emission max 361/497 nm</td></tr><tr><td>Mouse IgG1&nbsp;isotype control</td><td>R&amp;D Systems</td><td>MAB002</td><td></td></tr><tr><td>NaOH</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S8045-500G</td><td>Sodium hydroxide &ge; 98%</td></tr><tr><td>Normal donkey serum</td><td>Jackson ImmunoResearch Labs</td><td>017-000-121</td><td></td></tr><tr><td>pH meter</td><td>MeterLab</td><td>R21M002&nbsp;</td><td>PHM210 standard pH meter&nbsp;</td></tr><tr><td>Pipette tips (1000 &micro;L)</td><td>Biosphere</td><td>70.1186.210</td><td>1250&micro;L filtered pipette tips</td></tr><tr><td>Pipette tips (200 &micro;L)</td><td>Corning</td><td>4823</td><td>200&micro;L filtered pipette tips</td></tr><tr><td>SABG Kit</td><td>Cell signaling</td><td>9860S</td><td>Senescence beta-galactosidase staining kit</td></tr><tr><td>Secondary antibody, Alexa Fluor 555</td><td>Invitrogen</td><td>A31570</td><td>Donkey anti-mouse IgG (H+L) highly cross-adsorbed excitation/emission max 553/568 nm</td></tr><tr><td>Tween-20</td><td>Fisher Scientific</td><td>10419000</td><td>Pure, Fisher chemical</td></tr><tr><td>Water bath</td><td>Rowe Scientific</td><td>SWB20D</td><td>Standard water bath</td></tr><tr><td>WGA</td><td>Invitrogen</td><td>W11261</td><td>Wheat Germ Agglutinin (WGA) Alexa Fluor 488 conjugate: Excitation/emission max 495/519 nm</td></tr></tbody></table>

détection de la sénescence à l’aide de la lumière réfléchie dans la fraction vasculaire stromale adipeuse

Senescence Detection Using Reflected Light in Adipose Stromal Vascular Fraction

Détection de la sénescence à l’aide de la lumière réfléchie dans la fraction vasculaire stromale adipeuse

Cellular senescence is a stress-induced state characterized by permanent cell-cycle arrest and the development of a distinctive secretory profile that ...

senescence-detection-using-reflected-light-adipose-stromal-vascular

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Les méthodes traditionnelles d’évaluation de la différenciation adipocytaire sont bon marché et facile à utiliser, mais ne sont pas spécifiques aux changements dans l’expression des gènes. Nous avons développé un test afin de quantifier la différenciation des cellules mésenchymateuses en adipocytes matures à l’aide d’un marqueur spécifique de la lignée. Ce dosage a diverses applications dans la recherche fondamentale et de la médecine clinique.

Visualisation et la Quantification du potentiel de différenciation des cellules mésenchymateuses adipocytaire avec un marqueur spécifique de la lignée

En raison de la teneur élevée en lipides, le tissu adipeux a été difficile à visualiser à l’aide des méthodes histologiques traditionnelles. Adipo-Clear est un tissu technique qui permet l’étiquetage robuste et une imagerie de fluorescence volumétrique du tissu adipeux de compensation. Nous décrivons ici les méthodes de préparation des échantillons, prétraitement, la coloration, la compensation et montage pour l’imagerie.

Adipo-Clear : Un tissu méthode de compensation pour l’imagerie en trois dimensions du tissu adipeux

L’objectif de la présente étude est de montrer la technique d’immunohistochimie et visualisation entier-montent comme une méthode idéale pour l’imagerie 3D du composant d’architecture et cellulaires du tissu adipeux.

Visualisation de la Structure du tissu adipeux blanc 3D utilisant entier-Montez la souillure

La formation de vaisseaux sanguins et une innervation sympathique jouent un rôle essentiel dans le remodelage du tissu adipeux. Cependant, il reste des aspects techniques de visualisation et de mesurer quantitativement le tissu adipeux. Nous présentons ici un protocole pour étiqueter correctement comparer quantitativement les densités des vaisseaux sanguins et des fibres nerveuses dans différents tissus adipeux.

Coloration des vaisseaux sanguins et des fibres nerveuses dans le tissu adipeux

Ce protocole fournit une méthode efficace de digestion de la collagénase pour isoler des adipocytes viables et des cellules stromales de fraction vasculaire-SVF de la graisse viscérale humaine en un seul processus, y compris une méthodologie pour obtenir un ARN de haute qualité à partir d’adipocytes et la phénotypification des macrophages SVF par coloration de plusieurs marqueurs membranaires pour analyse par cytométrie en flux.

Isolement d’adipocytes viables et d’une fraction vasculaire stromale à partir de tissu adipeux viscéral humain adapté à l’analyse de l’ARN et au phénotypage des macrophages

Les préadipocytes sont isolés de la fraction vasculaire stromale du tissu adipeux brun interscapulaire de souris nouveau-nées et différenciés en cellules qui accumulent des gouttelettes lipidiques, expriment des marqueurs moléculaires et montrent la morphologie mitochondriale des adipocytes bruns matures. Ces cellules sont analysées par immunofluorescence et microscopie électronique à transmission.

Différenciation et imagerie des adipocytes bruns de la fraction vasculaire stromale du tissu adipeux interscapulaire de souris nouveau-nées

Ce protocole décrit une méthodologie pour isoler et identifier les cellules souches mésenchymateuses dérivées du tissu adipeux (CSM) de rats Sprague Dawley.

Isolement et identification de cellules souches mésenchymateuses dérivées du tissu adipeux de rats Sprague Dawley

Ce protocole décrit l’isolement semi-automatisé de la fraction vasculaire stromale (SVF) du tissu adipeux murin pour obtenir des préadipocytes et obtenir une différenciation adipocytaire in vitro. L’utilisation d’un dissociateur tissulaire pour la digestion de la collagénase réduit la variation expérimentale et augmente la reproductibilité.

Isolement semi-automatisé de la fraction vasculaire stromale à partir de tissu adipeux blanc murin à l’aide d’un dissociateur tissulaire

Ici, nous décrivons un protocole pour isoler, cultiver et phénotyper des cellules endothéliales microvasculaires à partir de tissu adipeux sous-cutané humain (hSATMVECs). De plus, nous décrivons un modèle expérimental de diaphonie hSATMVEC-adipocyte.

Étude de la diaphonie entre les cellules endothéliales adipeuses adipeuses et les adipocytes dans le tissu adipeux sous-cutané humain

Ici, nous présentons une méthode standard pour isoler efficacement les cellules souches et les adipocytes dérivés de l’adipos, caractérisée par une réduction de &gt; 90 % du temps de traitement, une forte viabilité cellulaire et une large compatibilité.

Isolation efficace des cellules souches et adipocytes dérivés de l’adipeux à partir du tissu adipeux porcine

Découvrez une méthode de microscopie confocale en lumière réfléchie pour détecter quantitativement la sénescence dans les cellules SVF humaines. Cette approche permet une analyse objective à cellule unique et le multiplexage d'immunocytochimie.

Détection de la sénescence à l’aide de la lumière réfléchie dans la fraction vasculaire stromale adipeuse

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