Name: Manipulation physique pour générer des embryons miniatures Xenopus (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-04-10T13:20:00.000+00:00
Duration: 4 min 9 s
Description: Découvrez comment générer des embryons miniatures de Xenopus laevis par constriction physique avec des nœuds de cheveux. Cette méthode permet d'étudier l'activation précoce du génome zygotique et les mécanismes de régulation par la taille cellulaire.

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<ol><li>Newport, J., Kirschner, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+major+developmental+transition+in+early+Xenopus+embryos%3A+I.+Characterization+and+timing+of+cellular+changes+at+the+midblastula+stage%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">A major developmental transition in early Xenopus embryos: I. Characterization and timing of cellular changes at the midblastula stage.</a> Cell. 30 (3), 675-686 (1982).</li>
<li>Newport, J., Kirschner, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+major+developmental+transition+in+early+Xenopus+embryos%3A+II.+Control+of+the+onset+of+transcription%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">A major developmental transition in early Xenopus embryos: II. Control of the onset of transcription.</a> Cell. 30 (3), 687-696 (1982).</li>
<li>Kane, D. A., Kimmel, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+zebrafish+midblastula+transition%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">The zebrafish midblastula transition.</a> Development. 119 (2), 447-456 (1993).</li>
<li>Lu, X., Li, J. M., Elemento, O., Tavazoie, S., Wieschaus, E. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coupling+of+zygotic+transcription+to+mitotic+control+at+the+Drosophila+mid-blastula+transition%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Coupling of zygotic transcription to mitotic control at the Drosophila mid-blastula transition.</a> Development. 136 (12), 2101-2110 (2009).</li>
<li>Jevtic, P., Levy, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Both+nuclear+size+and+DNA+amount+contribute+to+midblastula+transition+timing+in+Xenopus+laevis%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Both nuclear size and DNA amount contribute to midblastula transition timing in Xenopus laevis.</a> Sci Rep. 7 (1), 7908(2017).</li>
<li>Edgar, B. A., Kiehle, C. P., Schubiger, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+cycle+control+by+the+nucleo-cytoplasmic+ratio+in+early+Drosophila+development%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Cell cycle control by the nucleo-cytoplasmic ratio in early Drosophila development.</a> Cell. 44 (2), 365-372 (1986).</li>
<li>Chen, H., Qian, W., Good, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrating+cellular+dimensions+with+cell+differentiation+during+early+development%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Integrating cellular dimensions with cell differentiation during early development.</a> Curr Opin Cell Biol. 67, 109-117 (2020).</li>
<li>Lee, D. R., Lee, J. E., Yoon, H. S., Roh, S. I., Kim, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Compaction+in+preimplantation+mouse+embryos+is+regulated+by+a+cytoplasmic+regulatory+factor+that+alters+between+1-+and+2-cell+stages+in+a+concentration-dependent+manner%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Zool%22%5BJournal%5D)">Compaction in preimplantation mouse embryos is regulated by a cytoplasmic regulatory factor that alters between 1- and 2-cell stages in a concentration-dependent manner.</a> J Exp Zool. 290 (1), 61-71 (2001).</li>
<li>Ishimatsu, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Size-reduced+embryos+reveal+a+gradient+scaling-based+mechanism+for+zebrafish+somite+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Size-reduced embryos reveal a gradient scaling-based mechanism for zebrafish somite formation.</a> Development. 145 (11), dev161257(2018).</li>
<li>Clute, P., Masui, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+the+appearance+of+division+asynchrony+and+microtubule-dependent+chromosome+cycles+in+Xenopus+laevis+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Regulation of the appearance of division asynchrony and microtubule-dependent chromosome cycles in Xenopus laevis embryos.</a> Dev Biol. 171 (2), 273-285 (1995).</li>
<li>Chen, H., Einstein, L. C., Little, S. C., Good, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatiotemporal+patterning+of+zygotic+genome+activation+in+a+model+vertebrate+embryo%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Cell%22%5BJournal%5D)">Spatiotemporal patterning of zygotic genome activation in a model vertebrate embryo.</a> Dev Cell. 49 (6), 852-866.e7 (2019).</li>
<li>Sive, H. L., Grainger, R. M., Harland, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Xenopus+laevis+in+vitro+fertilization+and+natural+mating+methods%5BTitle%5D)+AND+%22CSH+Protoc%22%5BJournal%5D)">Xenopus laevis in vitro fertilization and natural mating methods.</a> CSH Protoc. 2007, pdb prot4737(2007).</li>
<li>Chen, H., Good, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+nascent+transcription+in+wholemount+vertebrate+embryos+to+characterize+zygotic+genome+activation%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Enzymol%22%5BJournal%5D)">Imaging nascent transcription in wholemount vertebrate embryos to characterize zygotic genome activation.</a> Methods Enzymol. 638, 139-165 (2020).</li>
<li>Meaders, J. L., Burgess, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microtubule-based+mechanisms+of+pronuclear+positioning%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Microtubule-based mechanisms of pronuclear positioning.</a> Cells. 9 (2), 505(2020).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Aiguille 30-G</td><td>BD Médecine</td><td>305128</td><td>Pour la perforation des embryons</td></tr><tr><td>Plaques de Petri jetables de 60 mm</td><td>VWR</td><td>25384-092</td><td>Pour incuber des embryons</td></tr><tr><td>Stereoscopes à zoom ACCU-SCOPE 3075</td><td>VWR</td><td>470351-130</td><td>Pour visualiser les embryons</td></tr><tr><td>Agarose</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A-9414</td><td>Pour revêtements de boîtes de Petri</td></tr><tr><td>Pince à épiler Dumont, Style 5</td><td>Sciences de la microscopie électronique</td><td>72701-D</td><td>Pour ajuster et conserver des embryons</td></tr><tr><td>Ficoll 400</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>GE17-0300-10</td><td>Pour incuber des embryons</td></tr><tr><td>Pointe de pipette TipOne, 10 & micro ; L</td><td>USA Scientific</td><td>1111-3700</td><td>Pour monter les nœuds à cheveux</td></tr><tr><td>Bloc de cire, noir</td><td>Carolina Biological Supply Co.</td><td>974228</td><td>Pour monter les nœuds à cheveux</td></tr></tbody></table>

manipulation physique pour générer des embryons miniatures xenopus

Physical Manipulation to Generate Xenopus Mini Embryos

Manipulation physique pour générer des embryons miniatures Xenopus

A defining characteristic of early embryogenesis is the rapid, exponential decrease in individual cell size while the overall embryo volume remains ...

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Research

Recherche

JoVE Journal

Developmental Biology

Biologie du développement

Xenopus embryonnaire ectoderme est devenu un modèle attractif pour les études de la polarité cellulaire. Un essai est décrit, dans lequel la distribution subcellulaire des protéines fluorescentes dans les cellules est évaluée ectoderme. Ce protocole aidera aborder les questions relatives au contrôle spatial de la signalisation.

Translocation polarisée des protéines fluorescentes dans les Xenopus</emEctoderme> en réponse à la signalisation Wnt

Cette vidéo montre les procédures utilisées pour cultiver des cultures primaires d'embryon...

Simultanée pré-et post-synaptique enregistrement électrophysiologique de<em&gt; Xenopus</em&gt; Nerf-muscle co-cultures

Une technique de transplantation de "Extreme antérieur domaine" mouchoirs entre les embryons de Xenopus laevis a été développé. Tissu peut être déplacé d'un gène expression fond dans un autre, ce qui permet l'étude des besoins locaux pour le développement cranio-facial et d'interactions entre les régions du visage de signalisation.

Transplantations faciales<em&gt; Xenopus laevis</em&gt; Embryons

Procédé pour quantifier la taille et la forme de orofaciale embryons de Xenopus laevis a été développé. Dans ce protocole, les mesures traditionnelles de taille sont combinés avec la morphométrie géométrique pour permettre des analyses plus poussées de développement oro-faciale et des anomalies.

Quantification de Orofacial phénotypes dans Xenopus

Nous décrivons les méthodes de manipulation des ovocytes immatures de Xenopus laevis, de maturation in vitro des ovocytes en ovules et d’injection intracytoplasmique de spermatozoïdes. Ce protocole permet la dégradation de certaines protéines maternelles et la surexpression des gènes d’intérêt lors de la fécondation, et est donc précieux pour étudier les rôles de facteurs spécifiques dans le développement embryonnaire précoce.

Manipulation et<em&gt; In Vitro</em&gt; Maturation du<em&gt; Xenopus laevis</em&gt; ovocytes, Suivi par injection intracytoplasmique de spermatozoïdes, pour étudier le développement embryonnaire

Le manuscrit ici fournit un jeu simple de méthodes pour analyser la sécrétion et la diffusion de ligands marqués par fluorescence dans Xenopus. Ceci permet d'obtenir un contexte pour tester la capacité des autres protéines de modifier la distribution de ligand et en permettant des expériences qui peuvent donner un aperçu des mécanismes de régulation des gradients de morphogènes.

Utilisation de l&#39;analyse confocale<em&gt; Xenopus laevis</em&gt; Chargé d&#39;enquêter sur les modulateurs de Wnt et Shh morphogène Dégradés

Nous décrivons un système d’ovocytes et de coiffes animales de xénope pour le clonage d’expression de gènes capables d’induire une réponse chez l’ectoderme compétent, et discutons des techniques pour l’analyse ultérieure de ces gènes. Ce système est utile dans l’identification fonctionnelle d’un large éventail de produits géniques.

Clonage fonctionnelle en utilisant un<em&gt; Xenopus</em&gt; Système d&#39;expression de l&#39;ovocyte

Ici, nous présentons un protocole pour utiliser des cartes de destin et des traceurs de lignées pour cibler les injections dans des blastomères individuels qui donnent naissance au rein d’embryons de Xenopus laevis.

Technique à la cible microinjection du Developing<em&gt; Xenopus</em&gt; Kidney

Ce protocole démontre une méthode à base de fluorescence pour visualiser le système vasculaire et pour quantifier sa complexité chez Xenopus tropicalis . Les vaisseaux sanguins peuvent être imagés quelques minutes après l'injection d'un colorant fluorescent dans le coeur battant d'un embryon après des manipulations génétiques et / ou pharmacologiques pour étudier le développement cardiovasculaire in vivo .

Visualisation et analyse quantitative de l&#39;angiogenèse embryonnaire dans<em&gt; Xenopus tropicalis</em

Ce protocole décrit une stratégie opto-génétique pour moduler l'activité de la protéine kinase activée par mitogène (MAPK) pendant la différenciation cellulaire et le développement embryonnaire de Xenopus . Cette méthode permet l'activation réversible de la voie de signalisation MAPK dans la culture de cellules de mammifères et dans les organismes vivants multicellulaires, comme les embryons de Xenopus , avec une résolution spatiale et temporelle élevée.

Modulation réversible médiée par la lumière du pathogène protéinique Kinase activé par Mitogen pendant la différenciation cellulaire et<em&gt; Xenopus</em&gt; Développement embryonnaire

Ce protocole vise à démontrer comment microinjecter un mélange ADN/DOTAP dans les œilcs d'embryons de Xenopus laevis d'un jour, et comment imager et reconstruire la protéine fluorescente verte individuelle (GFP) exprimant des arborescences axonales optiques dans les midbrains tectal de intacts, les têtards Xenopus vivants.

Microinjection d'ADN dans eyebuds in Xenopus laevis Embryos and Imaging of GFP Expressing Optic Axonal Arbors in Intact, Living Xenopus Tadpoles

Découvrez comment générer des embryons miniatures de Xenopus laevis par constriction physique avec des nœuds de cheveux. Cette méthode permet d'étudier l'activation précoce du génome zygotique et les mécanismes de régulation par la taille cellulaire.

Manipulation physique pour générer des embryons miniatures Xenopus

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