Name: Isolement et culture des cellules endothéliales microvasculaires du cerveau de souris (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-07-17T12:40:00.000+00:00
Duration: 10 min 11 s
Description: Apprenez à isoler et cultiver des cellules endothéliales microvasculaires cérébrales de souris pour étudier la barrière hémato-encéphalique. Cette méthode fournit un modèle in vitro fiable pour la recherche neurovasculaire.

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</ol>

<table><tbody><tr><td>60 mm culture plates</td><td>Corning</td><td>430166</td><td></td></tr><tr><td>96 Well culture plates</td><td>Corning</td><td>41122107</td><td></td></tr><tr><td>Acide acétique</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A6283</td><td></td></tr><tr><td>Antibiotique-antimycotique (facultatif)</td><td>Gibco</td><td>15240062</td><td></td></tr><tr><td>Anti-CD31</td><td>Santa Cruz&nbsp;</td><td>sc-46694</td><td>1:100</td></tr><tr><td>Anti-GFAP</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>13-0300</td><td>1:500</td></tr><tr><td>Anti-GLUT1</td><td>Abcam</td><td>ab115730</td><td>1:200</td></tr><tr><td>Anti-Iba1</td><td>Santa Cruz</td><td>sc-32725</td><td>1:500</td></tr><tr><td>Anti-mouse IgG Alexa Fluor (594 Dye)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>A-11005</td><td>1:500</td></tr><tr><td>Anti-rabbit IgG Alexa Fluor&nbsp; (488 Dye)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>A-11008</td><td>1:500</td></tr><tr><td>Pipettes automatiques et sérologiques</td><td>&nbsp;Oxford LP&nbsp;</td><td>&nbsp;OXL.OXL.OSP-5C</td><td></td></tr><tr><td>Milieu basal (pour la solution de collagène)</td><td>Gibco (DMEM)</td><td>11965092</td><td></td></tr><tr><td>Albumine sérique bovine (BSA)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A9647</td><td></td></tr><tr><td>Collagénase de type II</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C6885</td><td></td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>62248</td><td>1 &micro;g/mL</td></tr><tr><td>DMEM (glucose élevé)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>11965092</td><td></td></tr><tr><td>EndoGRO-MV Complete Medium</td><td>Merck Millipore</td><td>SCME004</td><td>Milieu de croissance pour cellules endothéliales</td></tr><tr><td>Tubes Falcon (15 &amp; 50 mL)</td><td>Corning&reg;</td><td>352096 / 352070</td><td></td></tr><tr><td>Sérum bovin foetal (FBS)</td><td>Gibco (Thermo Fisher)</td><td>16000044</td><td></td></tr><tr><td>Microscope à fluorescence</td><td>Motic</td><td>BA410</td><td></td></tr><tr><td>Gants, masques, consommables de laboratoire</td><td>Divers fournisseurs</td><td>&mdash;</td><td></td></tr><tr><td>Héparine (100 U/mL)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H3393</td><td></td></tr><tr><td>Microscope inversé</td><td>Olympus&nbsp;</td><td>CKX41</td><td></td></tr><tr><td>Aimant de séparation magnétique</td><td>EasySep&nbsp;</td><td>&nbsp;NC9284020</td><td></td></tr><tr><td>Agitateur orbital (37 &deg;C)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>SK-0180-S</td><td></td></tr><tr><td>Parafilm</td><td>Bemis</td><td>PM996</td><td></td></tr><tr><td>PBS (1&times;)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>10010023</td><td></td></tr><tr><td>Centrifugeuse réfrigérée</td><td>HITACHI</td><td>CT5RE</td><td></td></tr><tr><td>Scalpel</td><td>Fine Science Tools</td><td>Various</td><td></td></tr><tr><td>Ciseaux et pincettes fines</td><td>Fine Science Tools</td><td>Various</td><td></td></tr><tr><td>Membrane de nitrocellulose stérile</td><td>BIO-RAD</td><td>1620094</td><td></td></tr><tr><td>Collagène de type I</td><td>Corning&nbsp;</td><td>30394</td><td></td></tr></tbody></table>

isolement et culture des cellules endothéliales microvasculaires du cerveau de souris

Isolation and Culture of Mouse Brain Microvascular Endothelial Cells

Isolement et culture des cellules endothéliales microvasculaires du cerveau de souris

Brain microvascular endothelial cells (BMECs) are the main cellular component of the blood-brain barrier (BBB) and play a key role in regulating molecular ...

Notre étude examine comment les cellules endothéliales cérébrales peuvent être isolées et cultivées afin d'explorer la fonction neurovasculaire dans la santé et la maladie. Le protocole peut être utilisé pour étudier l'endothélium cérébral fœtal dans les troubles neurodéveloppementaux et les affections liées à la grossesse.Pour commencer, obtenez cinq souriceaux âgés de cinq jours après la naissance. Après euthanasie des souriceaux, prélèvez leurs cerveaux sous une hotte de sécurité biologique à flux laminaire et placez-les dans un tube conique de 50 millilitres contenant du PBS stérile et froid. Roulez délicatement chaque cerveau sur une membrane de nitrocellulose stérilisée pour séparer les méninges. Transférez les cerveaux dans une plaque de 100 millimètres contenant du PBS froid. À l’aide d’un scalpel stérile, retirez le tronc cérébral, le cervelet, le thalamus et le bulbe olfactif. Après avoir collecté les cortèxes cérébraux dépourvus de méninges, transférez-les immédiatement dans un tube conique de 50 millilitres contenant 5 millilitres de PBS sur de la glace. À l’aide de ciseaux stériles, dissociez mécaniquement le tissu. À l’aide d’une pipette de 1 millilitre, pipetez le ti

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Ici, nous décrivons un protocole pour l'isolement et la culture de cellules endothéliales murines pulmonaires. Cette méthode comprend mécanicien et dissociation enzymatique du tissu pulmonaire ainsi que d'un processus de purification en 2 étapes utilisant des anticorps anti-PECAM-1 et anti-ICAM-2 anticorps conjugués à des billes magnétiques, ce qui produit une population de cellules endothéliales pures d'origine essentiellement microvasculaires.

Isolement et culture de cellules endothéliales pulmonaires des souris néonatales

Cette méthode décrit comment isoler et d'immortaliser les cellules endothéliales microvasculaires du cerveau de souris. Nous décrivons un protocole étape par étape à partir de l'homogénéisation du tissu cérébral, phases de digestion, l'ensemencement et l'immortalisation des cellules. Habituellement, cela prend environ cinq semaines pour obtenir un ensemble homogène, immortalisé ligne de cellules endothéliales microvasculaires.

Génération d&#39;une ligne Immortalisé microvasculaire murin des cellules endothéliales du cerveau comme un<em&gt; In Vitro</em&gt; Modèle barrière hémato-encéphalique

Cette vidéo présente l’isolement des microvaisseaux d’un cerveau de rat à l’aide d’une combinaison de centrifugation à gradient de densité et de méthodes de digestion enzymatique. Les microvaisseaux isolés peuvent être cultivés dans un flacon de culture pré-enrobé de matrice de collagène et de fibronectine pour obtenir des colonies de cellules endothéliales.

Culture de cellules endothéliales à partir de microvaisseaux cérébraux de rat : une procédure pour isoler et cultiver des cellules endothéliales à partir de microvaisseaux de cerveau de rat

Cette vidéo montre une méthode pour isoler les péricytes cérébraux du cerveau d’une souris. Les cellules isolées sont cultivées dans des milieux spécifiques aux péricytes pour favoriser la prolifération des péricytes.

Isolement et culture de péricytes cérébraux de souris

Cette vidéo montre une méthode pour isoler les tubes endothéliales du parenchyme cérébral de souris. Grâce à une combinaison de digestion enzymatique et de dissociation mécanique, le processus produit un tube intact avec des cellules endothéliales.

Préparation de tubes endothéliales cérébraux à partir d’artérioles parenchymateuses de souris

Les cellules endothéliales microvasculaires cérébrales (BMEC) sont interconnectées par des protéines jonctionnelles spécifiques formant une barrière hautement régulée séparant le sang et le système nerveux central (SNC), ce que l’on appelle la barrière hémato-encéphalique (BHE). L’isolement des cellules endothéliales microvasculaires cérébrales primaires murines, comme nous l’avons vu dans ce protocole, permet des études in vitro détaillées de la BHE.

Isolement de cellules primaires murins cerveau endothéliales microvasculaires

Les cellules endothéliales vasculaires jouent un rôle important dans de nombreux troubles cardiovasculaires importants. Cet article décrit une méthode simple pour isoler et étendre les cellules endothéliales de l’aorte de souris sans utiliser d’équipement spécial. Notre protocole fournit un moyen efficace d’identifier les mécanismes de la physiopathologie des cellules endothéliales.

L&#39;isolement et la culture primaire de cellules endothéliales aortiques de souris

Nous décrivons un protocole permettant la purification du compartiment vasculaire du cerveau de la souris. Les vaisseaux cérébraux isolés comprennent des cellules endothéliales reliées par des jonctions serrées et entourées d’une lame basale continue, des péricytes, des cellules musculaires lisses vasculaires, ainsi que des membranes astrogliales périvasculaires.

Purification de souris vaisseaux cérébraux

Le maintien de la couverture de la barrière hémato-encéphalique est la clé de l'homéostasie du système nerveux central. Ce protocole décrit des techniques in vitro pour délimiter les processus fondamentaux et pathologiques qui modulent la couverture de la barrière hémato-encéphalique.

Essais in vitro pour évaluer la formation et la perturbation du vaisseau en forme de barrière de sang-cerveau

Les cellules endothéliales microvasculaires des muscles squelettiques (CEMG) forme la paroi des capillaires musculaires et réglementer les deux, échange de fluides/molécules et la migration des cellules (système immunitaires) entre le sang et les tissus musculaires. Isolement des primaire murine CEMG, comme décrit ici, permet des études in vitro complètes de l’unité « myovascular ».

Isolement de cellules endothéliales microvasculaires primaires murines Muscle squelettique

La préparation intensive de « tubes » endothéliaux cérébraux intacts de souris à partir d’artérioles parenchymateuses cérébrales est illustrée pour étudier la régulation du flux sanguin cérébral. De plus, nous démontrons les forces expérimentales de ce modèle d’étude endothéliale pour l’imagerie par fluorescence et la mesure électrophysiologique des principales voies de signalisation cellulaire, y compris les changements dans le potentiel intracellulaire [Ca2+] et membranaire.

Isolement et analyse fonctionnelle de l’endothélium artériolaire du parenchyme cérébral de souris

Apprenez à isoler et cultiver des cellules endothéliales microvasculaires cérébrales de souris pour étudier la barrière hémato-encéphalique. Cette méthode fournit un modèle in vitro fiable pour la recherche neurovasculaire.

Isolement et culture des cellules endothéliales microvasculaires du cerveau de souris

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