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<table><tbody><tr><td>100 mm plate</td><td>SPL Life Science</td><td>10101SPL</td><td></td></tr><tr><td>10x Tris/Glycine Buffer</td><td>BioRad</td><td>1610734</td><td></td></tr><tr><td>12 mm glass coverslips</td><td>Marienfeld</td><td>111520</td><td></td></tr><tr><td>12-well plate</td><td>SPL Life Science</td><td>30012SPL</td><td></td></tr><tr><td>16% Paraformaldehyde Aqueous Solution</td><td>Invitrogen</td><td>28908</td><td></td></tr><tr><td>18 mm glass coverslips</td><td>HART</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>24-well plate</td><td>SPL Life Science</td><td>30024SPL</td><td></td></tr><tr><td>3,3&prime;,5-Triiodo-L-thyronine sodium salt (T3)</td><td>Sigma</td><td>T6397</td><td></td></tr><tr><td>3-Isobutyl-1-methylxanthine (IBMX)</td><td>Calbiochem</td><td>410957</td><td></td></tr><tr><td>30% Acrylamide/Bis Solution, 37.5:1</td><td>BioRad</td><td>1610158</td><td></td></tr><tr><td>35 mm plate</td><td>SPL Life Science</td><td>20035SPL</td><td></td></tr><tr><td>6-well plate</td><td>SPL Life Science</td><td>30006SPL</td><td></td></tr><tr><td>60 mm culture dish</td><td>SPL Life Science</td><td>20060SPL</td><td>Utilisé pour les expériences de préadipocytes primaires et d'ADN/qPCR ; fournisseur/référence non fournis</td></tr><tr><td>AccuRuler RGB Plus Pre-stained Protein Ladder</td><td>Maestrogen</td><td>02102-250</td><td></td></tr><tr><td>ACK lysing buffer</td><td>Gibco</td><td>A10492-01</td><td></td></tr><tr><td>Actrapid 100 UI/mL (Insulin)</td><td>Novo Nordisk</td><td>A10AB01</td><td></td></tr><tr><td>ADP</td><td>Merck</td><td>117105</td><td></td></tr><tr><td>Agarose</td><td>FERMELO BIOTEC</td><td>FER00AL200G</td><td>Utilisé pour la vérification de l'intégrité de l'ARN ; fournisseur/référence non fournis</td></tr><tr><td>Ammonium Persulfate</td><td>BioRad</td><td>1610700</td><td></td></tr><tr><td>Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody</td><td>Cell Signaling</td><td>7074</td><td></td></tr><tr><td>Anti-rat IgG, HRP-linked Antibody</td><td>Cell Signaling</td><td>7077</td><td></td></tr><tr><td>Antibiotic-antimycotic</td><td>Gibco</td><td>15240062</td><td></td></tr><tr><td>Axio Observer inverted microscope stand</td><td>Carl Zeiss</td><td>431007-9901-000</td><td>Ajouté à partir des méthodes supplémentaires</td></tr><tr><td>BCA Protein Assay Kit</td><td>Thermo Scientific</td><td>D49328</td><td></td></tr><tr><td>BD Cytometer Setup and Tracking beads</td><td>BD Biosciences</td><td>-</td><td>Ajouté à partir des méthodes supplémentaires ; référence non fournie</td></tr><tr><td>BD FACSDiva Software v8.0.3</td><td>BD Biosciences</td><td>-</td><td>Ajouté à partir des méthodes supplémentaires</td></tr><tr><td>BD LSRFortessa X-20 cell analyzer</td><td>BD Biosciences</td><td>-</td><td>Entrée existante standardisée pour correspondre au fichier supplémentaire</td></tr><tr><td>BioRender</td><td>BioRender</td><td>-</td><td>Utilisé pour créer le flux de travail de la Figure 1</td></tr><tr><td>Blotting-grade blocker</td><td>BioRad</td><td>170-6404</td><td></td></tr><tr><td>BODIPY 493/503</td><td>Invitrogen</td><td>D3922</td><td></td></tr><tr><td>Bovine Serum Albumin (BSA)</td><td>Sigma</td><td>A1470</td><td></td></tr><tr><td>CaCl2</td><td>Calbiochem</td><td>208291</td><td></td></tr><tr><td>cDNA Reverse Transcription Kit</td><td>Invitrogen</td><td>4374966</td><td></td></tr><tr><td>Cell Strainer 100 µm, nylon</td><td>Falcon</td><td>352360</td><td></td></tr><tr><td>Cell Strainer 40 µm, nylon</td><td>Falcon</td><td>352340</td><td></td></tr><tr><td>Collagenase type II</td><td>Gibco</td><td>17101-015</td><td></td></tr><tr><td>Dexamethasone</td><td>Sigma</td><td>D4902</td><td></td></tr><tr><td>DMEM Powder, High Glucose, Pyruvate</td><td>Thermo Scientific</td><td>12800017</td><td></td></tr><tr><td>DMEM/F-12, no phenol red</td><td>Thermo Scientific</td><td>21041025</td><td></td></tr><tr><td>DMEM/F-12, powder</td><td>Gibco</td><td>12500062</td><td></td></tr><tr><td>DMSO</td><td>Sigma</td><td>D8418</td><td>Solvant pour le milieu d'induction ; fournisseur/référence non fournis</td></tr><tr><td>EMBed-812 EMBEDDING KIT (Epon)</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>14120</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol absolute</td><td>Merck</td><td>100983</td><td></td></tr><tr><td>Ethylene glycol-bis(β-aminoethyl ether)-N,N,N',N'-tetraacetic acid tetrasodium salt (EGTA)</td><td>Merck</td><td>324626</td><td></td></tr><tr><td>FAST SYBR MASTER MIX</td><td>Thermo Scientific</td><td>4385612</td><td></td></tr><tr><td>FCCP</td><td>Sigma</td><td>C2920</td><td></td></tr><tr><td>Fetal bovine serum</td><td>Capricorn Scientific</td><td>BS-16A</td><td></td></tr><tr><td>Floreada.io</td><td>Floreada.io</td><td>-</td><td>Logiciel d'analyse de cytométrie en flux</td></tr><tr><td>Fluoromount-G</td><td>Thermo Scientific</td><td>7984-25</td><td></td></tr><tr><td>GAPDH Antibody</td><td>Santa Cruz</td><td>sc-32233</td><td></td></tr><tr><td>Glucose</td><td>Gibco</td><td>15023-021</td><td></td></tr><tr><td>Glutamate</td><td>Sigma</td><td>G1626</td><td></td></tr><tr><td>Glutaraldehyde 25% Aqueous Solution</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>16210</td><td></td></tr><tr><td>Goat anti-Mouse IgG (H+L) Secondary Antibody, HRP</td><td>Invitrogen</td><td>62-6520</td><td></td></tr><tr><td>GraphPad Prism v10.6.1</td><td>GraphPad Software</td><td>-</td><td>Logiciel d'analyse statistique/régression logarithmique</td></tr><tr><td>Halt Protease and Phosphatase Inhibitor Cocktail 100X</td><td>Thermo Scientific</td><td>78442</td><td></td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Biological Industries</td><td>41-122-100</td><td></td></tr><tr><td>Histone H3 (1G1)</td><td>Santa Cruz</td><td>sc-517576</td><td></td></tr><tr><td>Hoechst 33342</td><td>Life Technologies</td><td>H3570</td><td></td></tr><tr><td>ImageJ v1.54s</td><td>NIH</td><td>-</td><td>Logiciel d'analyse d'images de gouttelettes lipidiques</td></tr><tr><td>Immun-Blot PVDF Membrane</td><td>BioRad</td><td>1620177</td><td></td></tr><tr><td>Indomethacin</td><td>Sigma</td><td>I7378</td><td></td></tr><tr><td>Insulin syringe</td><td>Cranberry</td><td>AAJECIN3</td><td>Utilisé pour l'homogénéisation cellulaire ; fournisseur/référence non fournis</td></tr><tr><td>KCl</td><td>Calbiochem</td><td>529552</td><td></td></tr><tr><td>KH2PO4</td><td>Calbiochem</td><td>529568</td><td></td></tr><tr><td>KHCO3</td><td>Sigma</td><td>60339</td><td></td></tr><tr><td>LAMP-1 Antibody</td><td>Abcam</td><td>ab25245</td><td></td></tr><tr><td>Lane Marker Reducing Sample Buffer</td><td>Thermo Scientific</td><td>39000</td><td></td></tr><tr><td>Malate</td><td>Sigma</td><td>M1000</td><td></td></tr><tr><td>MgCl2</td><td>Calbiochem</td><td>208291</td>

transfert mitochondrial exogène dans les adipocytes bruns différenciés et les préadipocytes déficients en agpat2

Exogenous Mitochondrial Transfer in Differentiating Brown Adipocytes and AGPAT2-Deficient Preadipocytes

Transfert mitochondrial exogène dans les adipocytes bruns différenciés et les préadipocytes déficients en AGPAT2

Mitochondria are key signaling hubs; however, whether mitochondrial mass expansion is mechanistically required for differentiation remains an open ...

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JoVE Journal

Biology

Biologie

Préadipocytes primaires blanches isolées à partir de tissus adipeux blancs chez la souris peuvent être différenciées en cellules beige / brite. Présenté ici est un système modèle cellulaire fiable pour étudier la régulation moléculaire de "brunissement" de graisse blanche.

L&#39;isolement et la différenciation des cellules stromales vasculaires de cellules Beige / Brite

Ici, un protocole (MitoCeption) est présenté pour transférer les mitochondries, isolées à partir de cellules souches mésenchymateuses humaines (MSC), des cellules souches de glioblastome (CGC), dans le but d'étudier leurs effets biologiques sur le métabolisme et les fonctions CGC. Un protocole similaire peut être adapté pour transférer des mitochondries entre les autres types de cellules.

MitoCeption: Transfert humain isolé MSC mitochondries à glioblastome cellules souches

Ce rapport décrit un protocole pour l’isolement simultané des preadipocytes bruns et blancs primaires des souris nouveau-nées. Les cellules isolées peuvent être cultivées en culture et induites pour se différencier en adipocytes blancs et bruns complètement matures. La méthode permet la caractérisation génétique, moléculaire et fonctionnelle des cellules graisseuses primaires en culture.

Isolement et différenciation des préadipocytes primaires blancs et bruns de souris nouveau-nées

Cette étude décrit une nouvelle méthode d’isolement des adipocytes bruns murins pour l’analyse de l’expression des gènes et des protéines.

Isolement des adipocytes bruns du tissu adipeux brun interscapulaire murin pour l’analyse de l’expression génique et protéique

Imagerie fonctionnelle et quantification des dépôts adipeux thermogéniques chez la souris à l’aide d’une approche basée sur l’imagerie micro-TEP/IRM.

Visualisation et quantification des tissus adipeux bruns et beiges chez la souris à l’aide de l’imagerie micro-PET/MR [18F]FDG

Les préadipocytes sont isolés de la fraction vasculaire stromale du tissu adipeux brun interscapulaire de souris nouveau-nées et différenciés en cellules qui accumulent des gouttelettes lipidiques, expriment des marqueurs moléculaires et montrent la morphologie mitochondriale des adipocytes bruns matures. Ces cellules sont analysées par immunofluorescence et microscopie électronique à transmission.

Différenciation et imagerie des adipocytes bruns de la fraction vasculaire stromale du tissu adipeux interscapulaire de souris nouveau-nées

Ce protocole décrit l’isolement semi-automatisé de la fraction vasculaire stromale (SVF) du tissu adipeux murin pour obtenir des préadipocytes et obtenir une différenciation adipocytaire in vitro. L’utilisation d’un dissociateur tissulaire pour la digestion de la collagénase réduit la variation expérimentale et augmente la reproductibilité.

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Cartographie génétique inductible Fate (GIFM) les marques et les cellules des pistes avec un contrôle spatial et temporel...

Une approche pratique de la cartographie inductible destin génétique: un guide visuel à Mark et Track Cellules In Vivo</em

Visualisation de localisation de l&#39;ARN Xenopus Les ovocytes

Ici, nous rapportons des protocoles pour détecter les protéines centromères-kinétochores endogènes et exogènes dans les cellules humaines et quantifions ces niveaux de protéines au niveau des centromères-kinétochores par coloration immunofluorescente indirecte par l’utilisation de la fixation (fixation du paraformaldéhyde, de l’acétone ou du méthanol).

Protéines immunofluorescence Analyse des endogènes et exogènes Centromere-kinétochoriens

Pontificia Universidad Católica de Chile.  Les mitochondries exogènes d’origine humaine et murine peuvent être intériorisées en différenciant les préadipocytes et suivies tout au long de la différenciation adipogénique à l’aide d’outils d’imagerie et génétiques. Bien que ces mitochondries interagissent physiquement avec le réseau mitochondrial endogène, elles n’augmentent pas l’expression des marqueurs associés aux adipocytes bruns matures.

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