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<table><tbody><tr><td>Saliva artificielle</td><td>Solarbio, Chine</td><td>A7990</td><td></td></tr><tr><td>Réactif de colorant d'analyse des protéines Bio-Rad</td><td>Bio-Rad, États-Unis</td><td>5000006</td><td>Pour l'analyse Bradford</td></tr><tr><td>Bleu de Coomassie</td><td>Abcam, Royaume-Uni</td><td>ab119211</td><td>Pour la visualisation des bandes de protéines</td></tr><tr><td>Kit ELISA pour le cortisol</td><td>Abcam, Royaume-Uni</td><td>ab154996</td><td></td></tr><tr><td>LFA pour le cortisol</td><td>Interne</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Planche chauffante</td><td>Daihan Scientific, République de Corée)</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Hydrocortisone (cortisol)</td><td>Sigma-Aldrich, États-Unis</td><td>PHR1014</td><td></td></tr><tr><td>Tampon d'échantillon Laemmli</td><td>GenDEPOT, États-Unis</td><td>L1200-001</td><td>Pour la dénaturation des protéines avant la SDS-PAGE</td></tr><tr><td>Porte-membrane</td><td>GVS Filter Technology</td><td>1220950</td><td>Porte-membrane de 13 mm de diamètre</td></tr><tr><td>Mini-PROTEAN&reg; Tetra Cell pour gels de 0,75 mm</td><td>Bio-Rad, États-Unis</td><td>1658000</td><td>Pour l'électrophorèse sur gel</td></tr><tr><td>Mucine</td><td>Sigma-Aldrich, États-Unis</td><td>M2378</td><td></td></tr><tr><td>Spectrophotomètre NanoDrop 2000</td><td>Thermo Fisher Scientific, États-Unis</td><td></td><td>Pour l'analyse des protéines</td></tr><tr><td>Membranes PES</td><td>STERLITECH, États-Unis</td><td>PES00313100</td><td>Membrane PES de 0,03 micron, 13 mm</td></tr><tr><td>Tampon phosphate (PBS)</td><td>DUKSAN, République de Corée</td><td>LB004</td><td></td></tr><tr><td>Saliva humaine poolée</td><td>Innovative Research Inc., États-Unis</td><td>IRHUSL5ML</td><td></td></tr><tr><td>RBCM</td><td>Interne</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tampon de gel de résolution pour PAGE</td><td>Bio-Rad, États-Unis</td><td>1610798</td><td>Pour la préparation du gel de résolution</td></tr><tr><td>Salivette Cortisol</td><td>SARSTEDT, Allemagne</td><td>51.1534.500</td><td>Kit de collecte de salive</td></tr><tr><td>Tampon de gel de concentration pour PAGE</td><td>Bio-Rad, États-Unis</td><td>1610799</td><td>Pour la préparation du gel de concentration</td></tr><tr><td>Super&bull;SAL&trade;</td><td>Oasis Diagnostics, États-Unis</td><td>SSAL-601</td><td>Kit de collecte de salive</td></tr><tr><td>Seringue</td><td>koreavaccine, République de Corée)</td><td></td><td>Volume de 1 mL</td></tr><tr><td>TEMED</td><td>Bio-Rad, États-Unis</td><td>1610800</td><td>Pour la polymérisation de l'acrylamide</td></tr></tbody></table>

dispositif portatif pour le prétraitement de la salive afin d’améliorer la détection du cortisol

Handheld Device for Saliva Pretreatment to Improve Cortisol Detection

Dispositif portatif pour le prétraitement de la salive afin d’améliorer la détection du cortisol

Salivary cortisol detection offers a noninvasive alternative to blood-based analysis. However, its practical implementation remains limited by the ...

Notre recherche porte sur le prétraitement de la salive afin d'améliorer la fiabilité de la détection du cortisol. Ce protocole peut être appliqué à l'analyse de biomarqueurs à partir de salive en utilisant un test immunochromatographique. Commencez par mélanger délicatement l'échantillon de salive humaine anonyme et regroupée, obtenu commercialement, avant utilisation afin d'assurer une homogénéité.Conserver les échantillons de salive à quatre degrés Celsius et les utiliser dans le délai de conservation recommandé par le fournisseur. Faire décongeler le culot de membrane des globules rouges de couleur rose pâle, ou culot RBCM, préparé et conservé à 80 degrés Celsius selon un protocole standard. Préparer une membrane de polyéthersulfone ou membrane PES ayant une taille de pore de 30 nanomètres et un diamètre de 13 millimètres.Déposez 100 microlitres d'une solution de globules rouges à 2 % poids par volume sur un côté de la membrane PES. Étendez doucement la solution ou délivrez-la goutte à goutte jusqu'à ce que toute la surface de la membrane soit complètement mouillée. Incubez la membrane à 50 degrés Celsius pendant 30 minutes afin d'assurer un revêtement et un séchage uniformes.Conserver la membrane revêtue à température ambiante et l'utiliser dans les 15 jours suivant sa préparation. Pour fabriquer le dispositif SaliFilter, placer la membrane PES revêtue de RBCM dans le support de filtration désigné. Assembler le dispositif en raccordant fermement les composants d'entrée et de sortie.Fixez une seringue d'un millilitre à l'entrée du dispositif. Chargez 500 microlitres de salive dans la seringue reliée au dispositif SaliFilter. Exercez une pression manuelle douce pour faire passer l'échantillon de salive à travers la membrane pendant environ deux minutes.Recueillir la salive prétraitée à la sortie et l'utiliser immédiatement ou la conserver à quatre degrés Celsius jusqu'à une analyse ultérieure. Après la détection des protéines par électrophorèse SDS-PAGE, appliquer 150 microlitres de salive prétraitée sur la membrane d'échantillonnage de la bandelette d'analyse en flux latéral (LFA) pour la détection du cortisol. Laisser l'échantillon migrer le long de la bandelette pendant 10 minutes.Capturez des images des résultats du test à l’aide d’un smartphone ou d’un système d’imagerie. Glissez et déposez le fichier LFA capturé dans la fenêtre du logiciel ImageJ. Cliquez sur l’image, choisissez la couleur, puis sélectionnez « séparer les canaux » pour diviser les canaux rouge, vert et bleu.Fermez les canaux rouge et bleu et utilisez l’image du canal vert pour l’analyse de l’intensité de la ligne de test. Utilisez l’outil rectangle pour sélectionner la région d’intérêt (ROI) de 100 par 10 pixels couvrant la ligne de test. Ouvrez les autres images de bandelettes de test immunochromatographique (LFA) et appliquez la même taille de ROI à tous les échantillons.Cliquez sur analyser et choisissez mesurer pour obtenir la valeur moyenne de l'intensité de la région d'intérêt (ROI) de la ligne de test. Ensuite, sélectionnez une région adjacente de la membrane vierge de la même taille de ROI et mesurez l'intensité du fond. Exportez les valeurs vers un classeur Excel et calculez l'intensité normalisée de la ligne de test en soustrayant l'intensité du fond de l'intensité de la ligne de test.Évaluation de la capacité de filtration du SaliFilter en comparant les variations de turbidité avec des kits commerciaux de prélèvement de salive, montrant une turbidité élevée dans la salive non traitée, tandis que les échantillons traités avec le SaliFilter apparaissaient clairement limpides. Les échantillons traités à l’aide de kits commerciaux présentaient une amélioration limitée de la clarté. La quantification des protéines salivaires par mesure d’absorbance à 280 nanomètres a révélé une réduction d’environ 69 % après filtration.Un dosage de Bradford a montré une diminution marquée de l'intensité de la couleur dans les échantillons traités par SaliFilter, correspondant à une réduction d'environ 80 % de la concentration totale en protéines. Une analyse du flux capillaire a démontré que l'élimination des mucines restaurait la performance d'écoulement dans la salive prétraitée. Une analyse par électrophorèse SDS-PAGE a confirmé que les mucines étaient retenues en amont de la membrane et absentes des échantillons traités.Ce protocole permet aux chercheurs d'évaluer le cortisol soluble après élimination des protéines et des mucines. Après filtration, les échantillons peuvent être analysés par électrophorèse sur gel de polyacrylamide en présence de dodécylsulfate de sodium (SDS-PAGE), par des dosages protéiques, par ELISA, ou par d'autres méthodes. De futures études pourront valider cette plateforme à l'aide d'échantillons salivaires cliniques présentant différentes concentrations de cortisol.

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Research

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JoVE Journal

Bioengineering

Bioingénierie

Nous démontrons : (1) des procédures de collecte d’échantillons salivaires chez des personnes âgées atteintes de troubles cognitifs par des aidants familiaux à domicile, (2) des procédures de mesure de l’activité de stress via le cortisol salivaire et l’alpha-amylase, et (3) des profils représentatifs. Les protocoles qui permettent aux chercheurs d’étudier les processus liés au stress font progresser notre compréhension de la sensibilité et de la susceptibilité biologiques.

Collecte de salive et de mesure du cortisol salivaire et l&#39;alpha-amylase dans Frail communautaires résidant personnes âgées par les aidants familiaux

Cortisol (CORT) s'accumule dans l'arbre de la croissance des cheveux de l'homme et les primates non humains. Nous décrivons des méthodes pour extraire et analyser CORT de cheveux avec une grande précision et sensibilité. Mesure de cheveux CORT est particulièrement bien adapté pour évaluer le stress chronique sur des périodes de plusieurs semaines à plusieurs mois.

Extraction et analyse de cortisol de l&#39;homme et de singe cheveux

La recherche sur les émotions des étudiants de premier cycle en matière de réussite scolaire s’est principalement appuyée sur des auto-évaluations en laboratoire. Les études incluent rarement des mesures biophysiologiques à ces auto-évaluations. Ce protocole décrira une méthodologie qui intègre les auto-évaluations et les mesures biophysiologiques pour évaluer la réponse et la performance des élèves lors d’une activité d’examen de laboratoire.

Utilisation des réponses galvaniques de la peau, salivaires biomarqueurs, et l&#39;auto-rapports pour évaluer la performance de premier cycle lors d&#39;une activité de laboratoire d&#39;examen

Un protocole d’étude est présenté sur la façon d’évaluer les associations entre l’écoute de la musique et le stress psychobiologique (mesuré par les niveaux de stress subjectifs, le cortisol salivaire et l’alpha-amylase salivaire) dans la vie quotidienne. Des conseils sur la conception de l’étude, le matériel, les méthodes, la sélection des participants et le traitement statistique sont fournis. Des résultats représentatifs sont présentés et discutés.

Évaluation des effets de la musique d&#39;écoute sur le stress psychobiologique dans la vie quotidienne

Analyse des cheveux cortisol concentration offre une alternative aux mesures traditionnelles du cortisol ; Cependant, afin de prélever des échantillons de cheveux d’afro-américains, les scientifiques doivent être culturellement éclairée et compétente. Ce protocole vise à démontrer une technique culturellement éclairée pour prélever des échantillons de cheveux pour l’analyse de cortisol d’afro-américains.

Le prélèvement d’échantillons de cheveux pour cheveux analyse de Cortisol dans les Afro-américains

Nous présentons ici une méthode originale de mixte combinant un quantitatif et une approche qualitative afin d’examiner précisément les expériences des participants pendant le Test de Stress Social de Trèves et le Test de Stress Social de Trèves pour les groupes.

Enactive approche phénoménologique à l’épreuve de Stress Social de Trèves : un Point de vue de méthodes mixtes

Nous présentons un protocole pour déterminer le solvant optimal d'extraction pour mesurer le cortisol de la fourrure de koala. Les solvants utilisés dans ce protocole sont le méthanol, l'éthanol et l'isopropanol. La détermination d'un solvant d'extraction optimal aidera à mesurer de façon fiable la fourrure afin de déterminer l'impact du stress chronique sur les koalas.

Mesure de cortisol à Koala (Phascolarctos cinereus) Fourrure

Le but de cet article est d'identifier les changements dans les niveaux de stress après la visite à trois contextes différents et de décrire les méthodes utilisées pour identifier les niveaux de stress basés sur des mesures de cortisol salivaire, d'amylase et d'une auto-déclaration psychologique. instrument.

Mesurer les niveaux de stress biophysique et psychologique après la visite à trois endroits avec des niveaux différents de la nature

Dans cette étude, nous présentons un protocole pour l'extraction de cortisol de la nageoire et de la mâchoire des espèces d'esturgeons. Les niveaux de cortisol de fin et de mâchoire ont été plus loin examinés en comparant deux solvants de lavage suivis des essais d'ELISA. Cette étude a mis à l'essai la faisabilité du cortisol de mâchoire comme indicateur de stress nouveau.

Extraction de cortisol à partir de matrices de nageoires d'esturgeon et de mâchoires

Une conception expérimentale a été élaborée pour étudier les influences en temps réel d'une expérience d'examen afin d'évaluer les réalités émotionnelles que les élèves vivent dans les milieux et les tâches de l'enseignement supérieur. Cette conception est le résultat d'une approche interdisciplinaire (p. ex. psychologie de l'éducation, biologie, physiologie, ingénierie) et multimodale (p. ex. marqueurs salivaires, sondages, capteur électrodermique).

Une conception expérimentale interdisciplinaire et multimodale pour étudier les expériences d'examen authentiques en temps quasi réel

Ce protocole montre comment fournir un enrichissement environnemental utile pratique pour les porcs qui sont logés sur des planchers à lattes pendant les différentes étapes de leur vie, et comment recueillir des échantillons de salive d'une manière non invasive pour la mesure de cortisol, comme biomarqueur du stress aigu.

Fournir un enrichissement environnemental significatif et la mesure du cortisol de salive chez les porcs logés sur le plancher à lattes

112 vues.  Kwangwoon University. Notre recherche se concentre sur le prétraitement de la salive pour améliorer la fiabilité de la détection du cortisol. Ce protocole peut être appliqué à l'analyse des biomarqueurs dans la salive en utilisant l'analyse de flux latéral. Pour commencer, mélangez doucement l'échantillon de salive humaine combinée anonyme obtenue commercialement avant utilisation pour assurer l'homogénéité.Conservez les échantillons de salive à quatre degrés Celsius et utilisez-les dans le...

Dispositif portatif pour le prétraitement de la salive afin d’améliorer la détection du cortisol

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