30 juillet 2008
Le microscope optique est un outil de base pour le biologiste cellulaire, qui devraient avoir une connaissance approfondie de la façon dont il fonctionne, comment il devrait être aligné pour différentes applications, et comment elle devrait être maintenue tant que nécessaire pour obtenir un maximum d'images formant la capacité et la résolution. Les composants du microscope sont décrites en détail ici.
Les microscopes optiques sont des outils essentiels dans la recherche biomédicale. Les composants optiques permettent une résolution d’image beaucoup plus grande que la visualisation à l’œil nu. En combinant la microscopie avec le traitement d’images numériques, les chercheurs peuvent améliorer la visibilité de l’image et effectuer des mesures quantitatives précises.
Cette vidéo vous guidera à travers le microscope, ses principaux composants et ses fonctions. Bonjour, je suis Victoria Sanon Frolic de l’installation d’imagerie optique centrale du Centre des sciences de la santé de l’Université du Texas à San Antonio. Aujourd’hui, je vais vous montrer les principaux composants de votre microscope de vie et leurs fonctions de base.
Faisons donc le tour de votre microscope. Avant d’utiliser un microscope, il est préférable de se familiariser avec ses composants et leurs fonctions. Il s’agit d’un microscope à lumière composée inversée Nikon eclipse TI équipé à la fois pour la lumière transmise et la microscopie épifluorescente.
La direction le long de l’axe du microscope sera appelée l’axe Z et les directions perpendiculaires comme l’axi X et Y. Tout d’abord, nous examinerons le tube du corps de l’oculaire, l’embout nasal contenant les objectifs et la platine. Ce sont les principaux composants de formation d’images du microscope.
Les pièces sont l’interface entre l’observateur et le microscope. En saisissant la base des tubes oculaires binoculaires, vous pouvez ajuster la distance interpupillaire en les rapprochant ou en les éloignant. Cela vous permet de voir confortablement avec les deux yeux.
En même temps, la mise au point de l’oculaire peut également être ajustée pour chaque œil indépendamment. Le grossissement de l’oculaire est marqué sur le canon. Les caméras sont régulièrement montées sur les microscopes pour l’acquisition d’images.
Cette lunette particulière utilise un adaptateur de monture C pour fixer une caméra CCD au port latéral du corps du microscope. Un bouton du microscope est tourné pour positionner un prisme afin de diriger l’image formant des rayons lumineux loin des oculaires et vers la caméra, qui est montée sur le port de la caméra. Les différents objectifs, qui dictent la majeure partie du grossissement et de la résolution, sont montés sur une tourelle porte-objectifs rotative.
Chaque objectif est marqué avec des spécifications telles que le grossissement, l’ouverture numérique, le milieu d’immersion requis tel que l’huile, la glycérine ou l’épaisseur de la lamelle de recouvrement à l’air, et d’autres caractéristiques spéciales telles que le mode d’éclairage, la lumière laissant l’oculaire et les embouts nasaux non focalisés ou projetés à l’infini. Le tube du corps contient une lentille à focale positive qui met la lumière d’imagerie au point pour l’oculaire ou l’appareil photo. Maintenant que je vous ai montré les composants formant l’image de la lunette, jetons un coup d’œil aux composants qui nous aideront à nous concentrer sur une image et à ajuster la lumière transmise.
Ensuite, nous examinerons l’étage de l’échantillon, qui est le support mécanique qui maintient la lame de l’échantillon. En tournant les boutons, vous pouvez régler les échantillons dans les directions x et y. Dans la configuration du microscope inversé, la platine est fixe et l’échantillon est focalisé en déplaçant les objectifs de haut en bas le long des Z AE à l’aide des boutons de course et de mise au point fine sur le corps du microscope.
Nous allons maintenant examiner les composants de transillumination du microscope optique, qui fournissent la lumière nécessaire à la visualisation de vos échantillons. Tout d’abord, nous avons la lampe et le boîtier, qui fournit la lumière pour éclairer l’échantillon Pour la microscopie optique, la lampe est généralement une ampoule halogène basse tension avec un filament de tungstène qui peut être ajusté pour contrôler l’intensité lumineuse. Un obturateur peut être placé après la source lumineuse pour contrôler la durée de l’éclairage.
Juste après que la source lumineuse est un diaphragme de champ réglable du champ, le diaphragme contrôle la zone ou le champ de l’échantillon à éclairer. Vient ensuite le composant connu sous le nom de condenseur, dont la fonction principale est de concentrer un éclairage uniforme et brillant sur l’échantillon. Le condenseur ou diaphragme à iris situé au fond du condenseur contrôle l’angle du cône d’éclairage du condenseur de l’échantillon.
Le réglage de ce diaphragme contrôle la taille et l’ouverture numérique du cône lumineux dirigé vers l’échantillon, ce qui permet d’obtenir un éclairage, un contraste et une profondeur de champ corrects Le réglage optique du diaphragme du condenseur permet de remplir correctement l’élément de la lentille frontale de l’objectif. Idéalement, cet ajustement devrait être effectué pour chaque objectif afin de réaliser le plein potentiel de l’objectif. Pour l’éclairage fluorescent épi, la source lumineuse est généralement une lampe à arc au xénon ou au mercure.
Sur notre lunette, nous avons une lampe à arc à base de mercure qui doit être manipulée avec précaution car elle peut exploser. S’il est mal manipulé. Assurez-vous de porter des gants lors de l’installation de l’ampoule car les empreintes digitales et les débris peuvent créer des points chauds et provoquer la fissuration de la lampe, il est fortement recommandé de ne pas faire fonctionner une lampe à arc plus longtemps que le nombre d’heures pour lesquelles elle est conçue.
Le trajet de la lumière fluorescente comprend un diaphragme de champ et un diaphragme d’ouverture. Similaire à la voie de transmission de la lumière. Au-delà de ces diaphragmes, la lumière rencontrera un ensemble de filtres qui sélectionnent la bande passante lumineuse et dirigent l’éclairage vers l’objectif pour atteindre l’échantillon dans la voie d’éclairage épi, l’objectif agissant à la fois comme le condenseur et l’objectif.
Nous venons de vous montrer les principaux composants de votre microscope optique. J’ai commencé par vous montrer les composants formant l’image du microscope, à savoir les oculaires, l’objectif et la caméra CCD. Ensuite, nous avons examiné la manipulation de la scène, les boutons de réglage de la mise au point et le condenseur.
Donc c’est tout. Merci d’avoir regardé et bonne chance avec votre microscopie.
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Le microscope optique est un instrument fondamental dans la recherche biomédicale, offrant une résolution d'image améliorée par rapport à l'œil nu. Cet article décrit les composants principaux des microscopes optiques ainsi que leurs fonctions, essentiels pour les chercheurs dans ce domaine.
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