מבחן הרגלת מגע: שיטה לחקר למידה לא אסוציאטיבית ב- C. elegans

תקציר

מקור: Mersha, M. D., et al. השלכות התנהגותיות ורבייה ארוכות טווח של חשיפה עוברית לרעלים במינון נמוך. J. Vis. Exp. (2018).

סרטון זה מציג את מבחן הרגלת המגע, שיטה התנהגותית של C. elegans להערכת מכנוסנסציה וכימות הזמן להרגלה.

פרוטוקול

הפרוטוקול הבא הוא קטע מתוך Mersha et al. השלכות התנהגותיות ורבייה ארוכות טווח של חשיפה עוברית לרעלים במינון נמוך, J. Vis. Exp. (2018)

1. בדיקת התרגלות מגע קדמית
   1. העבירו כ-10 תולעים בוגרות צעירות מסונכרנות לצלחות NGM חדשות ללא זרעים באמצעות פיק חוטי פלטינה 30 G מעוקר באש. השאירו את התולעים ללא הפרעה למשך 5 דקות כדי לאפשר להן זמן להתאקלם לצלחת החדשה.
   2. לתגובת ההרגלה, השתמשו בשערת גבה המחוברת לקצה שיפוד עץ או קיסם, ועקרו על ידי טבילה באתנול 70%. נגבו עם טישו נקי ללא סיבים והמתינו דקה עד שהאתנול יתאדה. געו בעדינות בתולעת שעל הראש (החלק הקדמי של פקעת הלוע) באמצעות שיער הגבות. חזור על הנגיעות, ואפשר 10 שניות בין נגיעות כדי לאפשר לתולעת להתאושש.
   3. המשך לגעת (המאפשר מרווחים של 10 שניות בין גירויים) עד שהתולעת כבר לא זזה לאחור. בשלב זה, התולעת התרגלה לגירוי. רשום את מספר הנגיעות הדרושות לתולעת כדי להתרגל.
   4. נתח את ההבדל בין שיעורי ההתרגלות הממוצעים של הבקרות המטופלות והלא מטופלות באמצעות ANOVA חד-כיווני ואחריו מבחן פוסט-הוק של Tukey.

חומרים

<גבול טבלה="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:601px;" width="601"> רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה שם חברה מספר קטלוג הערות EtOH Sigma-Aldrich 64-17-5 N2 (Wild-type C. elegans) תולעים CGC מאגר ב- U of Minnesota בחירת חוט פלטינה ג'נסי סיינטיפיק 59-AWP Petri plates פישר 07-202-011 מיקרוסקופ דיסקציה אמסקופ SM-2TYY