ג. אלגנס בדיקת כימוטקסיס: שיטה לבדיקת כימוסנסציה בתולעים

תקציר

מקור: Campbell, J. C., et al. A Caenorhabditis elegans Nutritional-Status Based Copper Aversion. J. Vis. Exp. (2017).

סרטון זה מציג כימוטקסיס בנמטודה C. elegans ומציג פרוטוקול לדוגמה הבודק סלידה כימוטקטית מנחושת גופרתית.

פרוטוקול

הפרוטוקול הבא הוא קטע מתוך Campbell et al, A Caenorhabditis elegans Nutritional-Status Based Copper Aversion Assay, J. Vis. Exp. (2017).

1. הכנת אורגניזמים ניסיוניים
   1. בחר 10 נמטודות מבוימות L4 לכל זן 24 שעות לפני תחילת הבדיקה כדי להבטיח שהאורגניזמים הם בוגרים צעירים בעת הבדיקה. עבור כל מוטציה או נמטודת ביקורת שנבדקה, בחר 10 L4s (10 עבור הבקרה ו -10 עבור הבדיקה).
      1. שמור על אורגניזמים L4 בשיטות סטנדרטיות במשך 24 שעות על לוחות אגר סטנדרטיים שנזרעו עם OP50 Escherichia coli. אם אורגניזמים הולכים לאיבוד במהלך שלבי השטיפה הבאים, לפצות על ידי הגדלת גודל המדגם ההתחלתי (כלומר, לב....

תוצאות

איור 1: ייצוג חזותי של סימונים המעידים על מיקום תמיסת נחושת בצדה התחתון של צלחת פטרי בקוטר 5 ס"מ. אינדיקציות אלה משמשות כדי להבטיח שחלקי הצלחת נמדדו כראוי ומשמשות כקו מנחה בעת העברת המדבקה החיידקית ולאחר מכן תמיסת הנחושת על משטח האגר.

איור 2: צלחת פטרי בקוטר 5 ס"מ מחול.......

חומרים

<גבול טבלה="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:929px;" width="929"> רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה שם חברה מספר קטלוג הערות M9 פתרון [3 גרם KH2PO4, 6 גרם Na2HPO4, 5 גרם NaCl, 1 מ"ל 1 M MgSO4, H2O עד 1 ליטר. אוטוקלאבה לעיקור לפני השימוש.] מיוצר במעבדה Cupric Sulfate סיגמא C-1297 יש להשתמש במים כדי להשהות כראוי לריכוז של 0.5M