Method Article

הזרקה תוך צפקית: שיטה להעברת תמיסה לחלל הבטן של דג זברה בוגר

April 30th, 2023

In This Article

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מקור: Luukinen, H., et al. Modeling Tuberculosis in Mycobacterium marinum Infected Adult Zebrafish. J. Vis. Exp. (2018).

סרטון זה מתאר טכניקה של הזרקה תוך צפקית, שיטה להעברת תמיסות לחלל הבטן של דגי זברה בוגרים.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. זיהום ניסיוני M. marinum עם הזרקה intraperitoneal

  1. פיפטה טיפה של 5 μL של תמיסת החיידקים המדוללת על פיסת סרט פרפילם ולמשוך את הטיפה לתוך מחט אינסולין 30 גרם.
  2. השתמשו בדגי בר בני 5-8 חודשים ובדגי מוטציה מסוג rag1−/−hu1999 לצורך הניסוי. מרדימים דגי זברה בוגרים במי המיכל עם 0.02% אתיל אסטר חומצה 3-אמינובנזואית (pH 7.0). מקמו את צד הגחון של הדג לחריץ על פלסטיק מוקצף לח.
    הערה: דגים מוטנטיים מסוג Rag-/- אינם מסוגלים לעבור רקומבינציה סומטית ולייצר תאי T ו-B פונקציונליים.
  3. הזריקו את המחט בין סנפירי האגן בזווית של כ-45 מעלות. שמור על פתיחת המחט כלפי מעלה כדי לראות שכל הפתח נמצא בתוך חלל הבטן. להזריק לאט א....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
מיקובקטריום מרינום אוסף תרבות הטיפוס האמריקאי ATCC 927
פנול אדוםסיגמא-אולדריץ'P3532
טבליות מלח חוצצות פוספט (PBS)סיגמא-אולדריץ'P4417-50TAB
אגר Middlebrock 7H10BD, תרמו פישר סיינטיפיק11799042
3-חומצה אמינובנזואית אתיל אסטר (pH 7.0)סיגמא-אולדריץ'A5040
Omnican 100 30 גרם מחט אינסוליןבראון9151133
1 מזרק מ"להנקה סאס וולף4010.200V0

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Intraperitoneal InjectionZebrafish ModelAbdominal Cavity DeliveryTuberculosis ModelingMycobacterium MarinumAnesthesia ProcedureNeedle PositioningRecovery TankBacterial SolutionInfection Verification

Related Articles