כריתת שד רדיקלית: הסרה כירורגית של בלוטת החלב כולה מעכבר כדי לחקור את התקדמות הסרטן

תקציר

מקור: Katsuta, E., et al. יצירת מודל סרטן שד גרורתי אורתוטופי מורין וביצוע כריתת שד רדיקלית מורין. J. Vis. Exp (2018).

סרטון זה מתאר טכניקה של כריתת שד רדיקלית, המשמשת להסרה כירורגית של בלוטת החלב כולה מעכבר כדי לחקור את התקדמות הסרטן.

פרוטוקול

1. כריתת שד

הערה: העיתוי של כריתת השד חשוב מאוד. אם זה נעשה מוקדם מדי, גרורות ריאות לא מתרחשת. אם זה נעשה מאוחר מדי, הגידול הראשוני פלש לכלי דם מרכזיים, מה שהופך כריתה אונקולוגית מלאה מאתגרת. לפיכך, נבדקו נקודות זמן מרובות לכריתת שד כדי לקבוע איזו נקודת זמן יצרה את האיזון המתאים בהמתנה לגרורות לפני שהכריתה הפכה מאתגרת מדי. לאחר שעשינו זאת ביותר מ-50 ניסויים בעכברים, הוכח כי כריתת שד 8 ימים לאחר חיסון התאים הסרטניים (או כאשר גודל הגידול מגיע ל-5 מ"מ) היא נקודת הזמן האידיאלית להשגת איזון זה.

1. מרדימים עכבר עם 2-4% איזופלורן ו-0.2 ליטר/דקה זרימת חמצן עד שהעכברים נושמים בשלווה (2-3 דקות) ומזריקים 0.05 מ"ג/ק"ג בופרנורפין לכתפו באופן תת-עורי.
2. יש לרסן את גפיו של העכבר באמצעות סרט מעבדה ולעקר את עורו באמצעות כלורהקסידין, יוד ואתנול 75%, באמצעות צמר גפן.
3. בצע חתך עור 5 מ"מ 2 מ"מ שמאלה מהצלקת הניתוחית שנעשתה בחיסון הראשוני של תאי סרטן, באמצעות מספריים microdissection. הרחבת החתך לכיוון שורש הגפה הקדמית להסרת הגידול, העור כולל הצלקת הניתוחית והנגע במגע עם הגידול, וכן אגן בלוטות הלימפה בבית השחי בו לרוב לא קיימת בלוטת לימפה נראית לעין בזמן הכריתה. יש להקפיד שלא לפגוע בווריד בית השחי.
4. סוגרים את פגמי העור על ידי תפירה, באמצעות תפרים סטריליים 5-0 שאינם נספגים בצורת "Y".
5. החזירו את העכבר לכלוב נקי ועקבו עד שהם התאוששו והם נעים בחופשיות (לאחר ~1-2 דקות). אם בעל חיים אינו נראה במצב בריאותי טוב בתוך 24 שעות מהניתוח, יש לתת בופרנורפין (0.2 מ"ג/ק"ג).
6. יש להסיר את התפרים בהרדמה (עם 2-4% איזופלורן ו-0.2 ליטר/דקה זרימת חמצן) 7 ימים לאחר הניתוח.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם	חברה	מספר קטלוג	הערות
מספריים לדיסקציה זעירה	רובוז	RS-5983	לחיסון תאים סרטניים וכריתת שד
אדסון מלקחיים	רובוז	RS-5233	לחיסון תאים סרטניים וכריתת שד
מחזיק מחטים	רובוז	RS-7830	לחיסון תאים סרטניים וכריתת שד
5-0 תפרי משי	להיראות	774ב	לחיסון תאים סרטניים וכריתת שד
סטרילנט יבש (נביטה 500)	בריינטרי סיינטיפיק	GER 5287-120V	לחיסון תאים סרטניים וכריתת שד
קליפר	וואהל	9908-717	לחיסון תאים סרטניים וכריתת שד