הזרקת ארנב intraductal: משלוח מקומי של פתרון עניין לתוך בלוטת החלב ארנב

תקציר

מקור: Clark et. al., Intraductal Delivery to the Rabbit Mammary Gland. J. Vis. Exp. (2017).

בסרטון זה אנו מתארים טכניקה של מתן פתרון מעניין לתוך צינור החלב של ארנב ומאשרים את המסירה על ידי הדמיה אולטרסאונד ברזולוציה גבוהה של סוכני ניגוד.

פרוטוקול

1. הכנה טרום ניתוחית

1. רשום את משקל הגוף של כל ארנב. כמו בכל המחקרים הפרה-קליניים, עקבו אחר משקלי בעלי חיים באופן קבוע כדי להעריך רעילות פוטנציאלית.
2. לפני הרדמת הארנב, מלא צינור חרוטי 50 מ"ל בג'ל אולטרסאונד זמין מסחרית וסחרור ב 500 x גרם במשך 30 שניות; לא אמורות להיות בועות גלויות בג'ל עם השלמת הצנטריפוגה.
3. מתן glycopyrrolate תת עורית במינון של 0.1 מ"ג / ק"ג ו acepromazine תוך שרירית במינון של 0.75 מ"ג / ק"ג. המתן 15-20 דקות עד שתרופת ההרגעה תיכנס לתוקף תוך ניטור סימנים והתנהגות חיוניים.
   הערה: Glycopyrrolate הוא סוכן אנטי cholinergic המונע ברדיקרדיה ומפחית הפרשות נשימה GI. Acepromazine הוא תרופת הרגעה המשמשת premedication להרדמה.
4. יש לתת 35 מ"ג/ק"ג קטמין ו-5 מ"ג/ק"ג קסילזין תת-עורית כחומר הרדמה. עם זאת, ככל שהמפעיל הופך מנוסה יותר ויכול לבצע את המסירה האינטרצינורית מהר יותר, להפחית את מינוני התרופה ל -15 מ"ג / ק"ג קטמין ו -3 מ"ג / ק"ג של קסילזין תת עורית; פעולה זו תקצר את זמן ההרדמה ואת הזמן הדרוש לבעל החיים להתאושש מההרדמה.
5. בדוק ותעד את קצב הלב, SPO_2, טמפרטורה, קצב נשימה וצבע קרום הריר כל 15 דקות. יש למרוח חומר סיכה לעיניים על שתי העיניים.
   הערה: רק אנשי צוות שעברו הכשרה מתאימה ואושרו על ידי IACUC של המוסד שלהם צריכים לנהל או לפקח על הרדמה. השימוש במוניטור הרדמה וטרינרית יכול לסייע ברכישת סימנים חיוניים ומומלץ. מוניטור ההרדמה הווטרינרית, לעומת זאת, אינו מחליף את הצורך לבדוק ידנית את בעל החיים כל 15 דקות. עיין בהוראות היצרן לשימוש נכון במוניטור וטרינרי.
6. ודא את תחילת ההרדמה על ידי צביטת בוהן עדינה; הארנב צריך להיות לא מגיב לפני שתמשיך.
7. בזהירות לגלח את הבטן הקאודלית של הארנב באזור סביב זוגות השלישי והרביעי של פטמות מפשעתיות.
8. לאחר הסרת רוב השיער, יש למרוח קרם להסרת שיער ללא מרשם על האזור המגולח. יש להסיר את הקרם 10 דקות לאחר המריחה באמצעות מגבות נייר לחות שהורטבו במים חמימים.
   הערה: עור ארנב הוא מאוד שביר/רגיש. קרם הסרת שיער יש להשתמש לא יותר מ 10 דקות. למעשה, בטוח יותר לנסות "נקודת בדיקה" ב 5 דקות ולהשאיר רק על זמן רב יותר אם נקודת הבדיקה מציינת פרק זמן ארוך יותר יש צורך.
9. נגבו את האזור עם רפידות גזה ספוגות אלכוהול כדי לנקות את אתר ההזרקה.
10. הניחו את הארנב על גבו בשוקת בצורת V מרופדת בשמיכת מים חמים וכרית סופגת.

2. הכנת חומר הניגוד

1. הגדר מחדש את מגיב הניגודיות שאינו ממוקד בהתאם להוראות היצרן. פיפטה למעלה ולמטה בעדינות כדי לערבב.
   הערה: חומר הניגוד המשמש בפרוטוקול זה יציב בטמפרטורת החדר למשך 4 - 6 שעות לאחר הרכבה מחדש. נענע בעדינות את הבקבוקון בין כל שליפה.
   הערה: נפח התמיסה הנדרש תלוי במספר התעלות שיש להזריק. לארנב יש 4 פתחים צינוריים לכל טט, ו-0.2 מ"ל תמיסה מספיקים כדי למלא עץ צינורי אחד של ארנב לבן ניו זילנדי בוגר (Oryctolaguscuniculus). לפיכך, נפח כולל של 0.8 מ"ל עשוי להיות מועבר בלוטת חלב אחת.

3. משלוח אינטרדוקטלי

1. אתר את הפטמות המתאימות להזרקה; מומלץ להשתמש בזוגות 3^ו-4 של פטמות מפשעתיות, מכיוון שניתן לדמיין אותן בקלות כאשר בעל החיים ממוקם על גבו.
2. יש להעמיס 0.2 מ"ל של מלח סטרילי 0.9% לתוך מזרק שחפת Luer-lock 1 מ"ל עם מחט 22 גרם. יש להיפטר כראוי ממחט 22 גרם ברגע שהמלח נמצא במזרק ולהחליף אותו במחט סטרילית של 25 מד. נגבו בעדינות את האזור עם 85% אלכוהול איזופרופיל על פד גזה.
3. עם שיפוע המחט למעלה ואת מזרק מקביל לגוף של החיה, להכניס את השיפוע של המחט לתוך הצד של teat להזריק לאט 0.1-0.2 מ"ל של מלוחים; זה יאפשר הדמיה טובה יותר של פתחי ductal.
4. טען 0.2 מ"ל של תמיסת הזרקה לתוך מזרק שחפת 1 מ"ל Luer-lock.
5. החזק את הטיט בעדינות עם האגודל והאצבע המורה והרים אותו מעט כדי למקם אותו להזרקה intraductal; זכוכית מגדלת עינית לבישה עשויה לסייע בהדמיה של פתחי הצינור.
6. תוך שמירה על המיקום המורם של הטיט, בזהירות cannule את צינור העניין באמצעות מחט 25 G קהה.
7. לאחר הקנולציה, סובבו בעדינות את מזרק Luer-lock על רכזת מחט העירוי הקהה עד שהוא ננעל במקומו.
8. הרימו את הטיט והזריקו את התמיסה באיטיות כדי למזער את הנזק הפוטנציאלי שנגרם על ידי נוזל הנע במהירות בתוך הצינור; בשום שלב לא צריכה להיות התנגדות בעת הזרקת התמיסה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם	חברה	מספר קטלוג	הערות
מגיב ניגודיות לא ממוקד MicroMarker	VisualSonics	VS-11694
Luer Lock 1 מזרקים מ"ל	ב.ד.	309628
גליקופירולט 0.2 מ"ג/מ"ל	בית מרקחת תרכובת וודג'ווד	גליקופ-INJ013VC	חיי מדף של 6 חודשים, האספקה עשויה להיות מוגבלת.
קטמין הידרוכלוריד 100 מ"ג/מ"ל	בריאות בעלי חיים הבינלאומי	21250699	http:// www.animalhealthinternational.com/
אצפרומזין 10 מ"ג/מ"ל	בריאות בעלי חיים הבינלאומי	17640541
קסילזין 20 מ"ג/מ"ל	בריאות בעלי חיים הבינלאומי	20101547
קרם להסרת שיער	Veet		פתרון לעור רגיש. זמין דרך קמעונאים מקומיים.
מחטי עירוי קצה קהות	טכנולוגיית עירוי סאי	B14-50	אוספי http://www.sai-infusion.com//מחטים קהות
אוקסימטר דופק וטרינרי	EdanUSA	VE-H100B	http://www.edanusa.com/Product/ VE-H100B-Veterinary-PulseOximeter.html
משאבת מים חמים	אנונימי	TP700
שמיכת מים חמים	בריאות בעלי חיים הבינלאומי	21232696	רפידות חימום Maxi-Therm Lite